Stereotaktische Virusinjektion zur gezielten neuronalen Geneditierung im Gehirn von Mäusen

Zusammenfassung

Quelle: Fricano-Kugler, C. J., et al. Design, Verpackung und Verabreichung von CRISPR-Retro- und Lentiviren mit hohem Titer durch stereotaktische Injektion. J. Vis. Exp. (2016)

Dieses Video zeigt die stereotaktische Virusinjektion zur präzisen neuronalen Geneditierung im Gehirn von Mäusen. Das Protokoll gewährleistet eine genaue Virusabgabe an den Gyrus dentatus und ermöglicht die Fluoreszenzmarkierung und den CRISPR-vermittelten Gen-Knockout, um neuronale Schaltkreise, Genfunktionen und Krankheitsmechanismen in vivo zu untersuchen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Stereotaktische Injektion

1. Vergewissern Sie sich, dass die Belüftung des Operationssaals geöffnet ist, um einen ordnungsgemäßen Luftstrom zu gewährleisten. Bereiten Sie die Maus auf die Operation vor, indem Sie sie in einer Induktionskammer mit 4% Isofluran anästhesieren. Rasieren Sie nach der Anästhesie den Kopf, um die Injektionsstelle vorzubereiten.
   1. Platziere die Maus in das stereotaktische Instrument, indem du die Zunge mit einer Pinzette nach unten und zur Seite bewe....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Vet-Spritze für Tierärzte verwenden nur T.B. Spritze 1cc Luer-Slip T.B. 100/bx	Med-Vet International	1CCVLS
Isofluran
Skalpellklingen aus Edelstahl, #10, 100 Stück	Med-Vet International	JOR580S
Künstliche Tränensalbe	Med-Vet International	RXPARALUBE-O
PVP PrepSolution	Med-Vet International	HPIV108208H
Normale Kochsalzlösung	Med-Vet International	DYND500MLSH
Applikatoren mit Wattespitze	Med-Vet International	CTA6
Dreifache antibiotische Salbe	Med-Vet International	RXTRIP-OI15
MONOJECT® Nadeln Soft Pack 25g x 5/8"	Med-Vet International	25058
6-0 Seidennähte	Med-Vet International	MV-711

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