Neuronale Anpassung an repetitive hypoxische Präkonditionierung bei Mäusen

Zusammenfassung

Quelle: Poinsatte, K., et al., Quantifizierung des neurovaskulären Schutzes nach wiederholter hypoxischer Präkonditionierung und vorübergehendem Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2015)

Dieses Video zeigt die Methode der repetitiven hypoxischen Präkonditionierung (RHP), indem eine Maus kontrollierten Hypoxiezyklen ausgesetzt wird, bevor sie einen ischämischen Schlaganfall induziert. Das Experiment untersucht seine Auswirkungen auf die Stabilität der Blut-Hirn-Schranke, die neuronale Anpassung und die Entzündung.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Wiederholte hypoxische Vorkonditionierung

1. : Entwerfen Sie vier Durchflussmesser für Gasregler und befestigen Sie sie an standardmäßigen 15-Liter-Induktionskammern mit Polyvinylchlorid (PVC)-Rohren, damit komprimiertes Gas aus den Sauerstofftanks (O₂) über einen Einlassanschluss in die Kammern strömen kann.
2. Teilen Sie die Mäuse in 2 Gruppen ein: Die Gruppe der repetitiven hypoxischen Präkonditionierung (RHP), die eine Exposition von 8 % und 11 %_O2 erhält, und die Kontrollgruppe, die gleichzeitig eine Exposition von 21 %_O2 (Raumluft) erhält.
3. Entfernen Sie den oberen Filterdeckel jedes Käfigs und stellen Sie den Käfig mit intakten Futter- und Wasserflaschen in die Kammern, die mit den entsprechenden Ø_2-Tanks verbunden sind. Schließen und verriegeln Sie den Deckel der Kammer.
   Öffnen
   1. Sie das Hauptgasventil für die Tanks und stellen Sie den Anfangsdurchfluss für jede Induktionskammer auf 2 l pro Minute (LPM) für die ersten 5 Minuten der Exposition ein. Reduzieren Sie die Durchflussrate für den Rest der Exposition auf 1 l/min.
   2. Reduzieren Sie am Ende der Exposition den Durchfluss auf 0 l/min und schließen Sie die Gasventile der Tanks.
   3. Öffnen Sie die Kammerdeckel und setzen Sie den oberen Filterdeckel auf jeden Käfig auf. Stellen Sie die Käfige bis zur nächsten hypoxischen Exposition in ein Standardgehäuse.
4. Sprühen Sie jede Induktionskammer nach jedem Gebrauch mit NPD (Steris) oder einem gleichwertigen Desinfektions-/Desodorierungsmittel ein.
5. Setzen Sie sowohl 21%- als auch RHP-Mäuse zur gleichen Tageszeit über einen Zeitraum von zwei Wochen aus.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Durchflussmesser, Regler	VetEquip, Inc	Spezialauftrag	Vier Durchflussmesser sind an einem 6,0 mm flexiblen PVC-Schlauch befestigt, der mit einer Kunststoffbuchse mit dem Einlassanschluss jeder Induktionskammer verbunden ist. Diese Durchflussmesser sind mit einer Metallstange von 6,5" x 1" x 1" verschraubt. Dieser Metallstab ist mit einem MI-246-P-Manometer mit DISS-Ausgang verschraubt. Dieses Manometer und Durchflussmessgerät kann mit einem Schraubenschlüssel an jede neue Gasflasche angebaut werden.
21 % O₂-Tank	AirGas	OX USP200
11 % O₂-Tank	AirGas	Sonderbestellung
8 % O₂-Tank	AirGas	Spezialbestellung
15 L Induktionskammern	VetEquip	941454