Auswirkungen eines ethanolinduzierten sympathischen Ganglienblocks auf die Nervenregeneration im Hundemodell

Zusammenfassung

Quelle: Shionoya, Y., et al. Anwendungen für Ethanol-induzierte zervikale sympathische Ganglienblockaden zur Förderung der Regeneration des Nervus alveolaris inferior bei Hunden mit Hilfe eines künstlichen Nervs. J. Vis. Exp. (2018)

Dieses Video zeigt ein Hundemodell für die Regeneration des Nervus alveolaris inferior (IAN) unter Verwendung eines biologisch abbaubaren Gerüsts und einer Ethanol-induzierten Sympathikusblockade. Das Verfahren umfasst den chirurgischen Zugang zum sympathischen Ganglion des Gebärmutterhalses und die Injektion von Ethanol, um eine Vasodilatation zu induzieren. Die daraus resultierende Erhöhung des Blutflusses zur Verletzungsstelle, kombiniert mit der Schwann-Zell-gesteuerten axonalen Regeneration, fördert die Nervenregeneration.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Anästhesie und Hautvorbereitung

:

1. Betäuben Sie den Hund mit einer Mischung aus 5 mg/kg Ketaminhydrochlorid und 1 mg/kg Xylazin durch eine intramuskuläre Injektion.
2. Intubieren Sie mit einem Trachealtubus von 7,5 mm Durchmesser und 25 cm Länge.
3. Bringen Sie den Hund in die richtige Seitenposition. Halten Sie die Vollnarkose mit 3,2 % Sevofluran mit Sauerstoff (1,0 l/min) aufrecht.
4. Verwenden Sie ein Heizkissen, um die Körpertemperatur auf 37 °C zu halten.
5. Tragen Sie ein ophthalmisches Gel auf die vordere Oberfläche der Augen auf, um Hornhautabrieb zu vermeiden.
6. Rasieren Sie das Operationsfeld (linker Brustbereich) vorsichtig mit einer chirurgischen Haarschneidemaschine. Sprühen Sie eine große Menge alkoholischer Lösung auf die Wirkstelle. Warten Sie mindestens 15 Sekunden. Wiederholen Sie die Anwendung 3 Mal.
7. Erfassen Sie die Herzfrequenz und die Sauerstoffsättigung während der Operation.

2. Rekonstruktion des Nervus alveolaris inferior Mit einer Tube aus Polyglykolsäure-Kollagen (PGA-C): Entwicklung des reinen Rekonstruktionsmodells

1. Injizieren Sie 3 ml 1% Lidocain mit einer 27-G-Nadel in die linke Unterkiefergingiva als Lokalanästhetikum und Analgetikum.
2. Führen Sie einen 5 cm langen Querschnitt mit einer Skalpellklinge Nummer 15 in die linke Unterkiefergingiva durch, um den Unterkiefer des Tieres freizulegen.
3. Verwenden Sie piezoelektrische Ultraschallschwingungen, um die proximale Seite des Unterkiefers zu einem 3 cm × 8 mm großen Rechteck durch das hintere Foramen mentalis zu schleifen.
   HINWEIS: Die Schwingungsfrequenz betrug 28 bis 32 kHz.
4. Entfernen Sie den vorderen Teil der Unterkieferknochenplatte (Abmessungen, 3 cm × 8 mm), um die linke IAN freizulegen (Abbildung 1A).
   HINWEIS: Die Rekonstruktionsstelle entspricht der Wurzelspitze des ersten Molaren
.
5. Transschneiden Sie die IAN mit einem Skalpell, um ein 10-mm-Segment zu entfernen.
6. Führen Sie die proximalen und distalen Stümpfe des durchtrennten Nervs bis zu einer Tiefe von 2 mm in den Nervenschlauch ein.
7. Verwenden Sie 8-0 Nylonnähte und ein Operationsmikroskop mit 8-facher Vergrößerung, um den Schlauch mit den proximalen und distalen Nervenenden zu vernähen (Abbildung 1B).
8. Bringen Sie die Knochenplatte wieder an ihren ursprünglichen Platz im Unterkiefer zurück.
9. Verschließen Sie die Wunde mit 4-0 Nylonnähten.
10. Bestätigen Sie einen Tag nach der Operation, dass sich die Unterkieferknochenplatte in der richtigen Position befindet.
    1. 4.10.1 Durchführung einer Computertomographie (CT) Bildgebung des Gesichtsknochens unter Narkose. Stellen Sie die CT-Parameter wie folgt ein: 120 kVp, 200 mAs, 0,5 mm/s, 0,5 mm Schichtdicke.
       1. Verabreichen Sie die Anästhesie mit einer Mischung aus 5 mg/kg Ketaminhydrochlorid und 1 mg/kg Xylazin (Abbildung 2).
11. Verabreichen Sie eine Woche nach der Operation Ampicillin (100 mg / Tag) als Antibiotikum und Paracetamol (100 mg / Tag) als Analgetikum.

3. Ethanol-induzierter zervikaler sympathischer Ganglienblock (CSGB): Entwicklung des Rekonstruktion + CSGB-Modells

1. Führen Sie die IAN-Rekonstruktion wie in Abschnitt 2 beschrieben durch und lassen Sie eine Woche Zeit für die Genesung.
2. Betäuben Sie das Tier mit 1,5 % Sevofluran in Sauerstoff (4 l/min) und Luft (6 l/min). Rasieren und reinigen Sie das vorgesehene Operationsfeld, wie in Abschnitt 3 beschrieben.
3. Markieren Sie die Schnittlinie mit einem chirurgischen Hautmarker, indem Sie eine Linie auf der linken Seite des Brustbereichs ziehen (Abbildung 3, die Schnittlinie ist 20 cm lang).
4. Injizieren Sie 5 ml 1% Lidocain mit einer 21-g-Nadel in den linken Brustbereich als Lokalanästhetikum und Analgetikum.
5. Schneiden Sie die linke Brusthaut mit einer Skalpellklinge Nummer 10 ein.
6. Schneiden Sie die Fettschicht mit einem elektrischen Skalpell ein, um die Muskelfaszie freizulegen.
7. Legen Sie den Musculus serratus ventralis und den Musculus scalenus frei.
8. Heben Sie den Musculus serratus ventralis und den Musculus scalenus von ventral nach dorsal an, um die zweite und dritte Rippe freizulegen (Abbildung 4).
9. Führen Sie eine linke laterale Thorakotomie am zweiten und dritten Interkostalraum durch, um das linke zervikale sympathische Ganglion freizulegen (Abbildung 5).
10. Injizieren Sie 0,2 ml 99,5 % Ethanol mit einer 30-G-Nadel unter direkter Visualisierung in das zervikale sympathische Ganglion (Abbildung 6).
11. Schließen Sie den Interkostalraum mit unterbrochenen 1-0 resorbierbaren Stichen.
12. Schließen Sie die Haut mit unterbrochenen 3-0 Nylonstichen.
13. Verabreichen Sie eine Woche nach der Operation Ampicillin (100 mg / Tag) als Antibiotikum und Paracetamol (100 mg / Tag) als Analgetikum.
14. Messen Sie 1 Woche nach der CSGB die Temperatur der Gesichtshaut mit Infrarot-Thermografie, um die CSGB zu bestätigen.

Ergebnisse

Abbildung 1: Vor- und Nachkonstruktion des linken Alveolarnervs (IAN). A) Bild vor der Rekonstruktion des linken IAN nach der Belichtung durch den Entfernung von Knochen. B) Postrekonstruktionsbild des linken I...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Surgical clippers	Roboz Surgical Instrument Company	RC-5903
Einweg-Skalpell (Nr.15)	Kai medical	219ABBZX00073000
VarioSurg3	Nakanishi	VS3-LED-HPSC, E1133	Piezoelektrische Chirurgie für die Knochenaufbereitung
4-0 Nylon-Nähte	Ethicon	8881H
8-0 Nylon-Nähte	Ethicon	2775G
Isepamicinsulfat	Nichi-Iko	620005641
Einweg-Skalpell (Nr.10)	Kai medical	219ABBZX00073000
30-Gauge-Nadel	Nipro	1134
1-0 resorbierbare Stiche	Ethicon	J347H
3-0 Nylonstiche	Ethicon	8872H
Neo Thermo	NEC Avio	TVS-700	Infrarot-Thermografie