Dieses Video zeigt die intrakranielle Injektion von kurzkettigen Fettsäuren (SCFAs) in eine frei bewegliche Maus, um deren Auswirkungen auf das hirnvermittelte Verhalten zu untersuchen. Eine Injektorkanüle wird in eine Führungskanüle eingeführt, die in das Gehirn der Maus implantiert wird. Nach der Genesung akklimatisiert sich die Maus in einem neuartigen Käfig. Anschließend werden SCFAs verabreicht und das Bewegungsverhalten aufgezeichnet.
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Methodenartikel
Intrakranielle Injektion von mikrobiellen Metaboliten aus dem Darm in einem Mausmodell
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7. August 2025
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Protokoll
Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Vorbereitung für das Versuchstier
- : Besorgen Sie sich 6-8 Wochen alte männliche Wildtyp-Mäuse vom Typ C57BL/6JNarl von einem Händler.
- Halten Sie die Mäuse in einem Standard-Mauskäfig mit Standard-Mauskäfig und sterilisiertem Wasser ad libitum.
HINWEIS: Die Haltungsbedingungen für das Versuchstierzentrum betragen 22 ± 1 °C Temperatur, 55 % ± 10 % Luftfeuchtigkeit und ein 13 h/11 h Hell-Dunkel-Zyklus.
2. Stereotaktische Chirurgie....
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Ergebnisse
Abbildung 1: Implantation der kommerziellen Führungskanüle bei Mäusen. (A) Das repräsentative Bild einer handelsüblichen Führungskanüle, eines Dummys und eines Injektors. (B) Das repräsentative Bild einer kommerziellen Führungskanüle und ein.......
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Material | |||
| Advil Liqui-Gels Solubilized Ibuprofen A2:D41 | Pfizer | n/a | |
| Flaschenaufsatz-Vakuumfilter, 500 mL, 0,22 μm, PES, steril | NEST | 121921LA01 | |
| CaCl₂ | Sigma-Aldrich | C1016 | ACSF: 0,14 g/L |
| Chlorhexidin-Peeling 2% | Phoenix | NDC 57319-611-09 | |
| Chlorhexidin-Lösung | Phoenix | NDC 57319-599-09 | |
| Kommerzieller Dummy | RWD Life Science | 62004 | Single_OD 0,20 mm/ M3,5/G = 0,5 mm |
| Kommerzielle Führungskanüle | RWD Life Science | 62104 | Single_OD 0,41 mm-27G/ M3,5/C = 2,5 mm |
| Kommerzieller Injektor | RWD Life Science | 62204 | Single_OD 0,21 mm-33G/ Passend für M3,5/C = 3,5 mm/G = 0,5 mm |
| D-(+)-Glukose | Sigma-Aldrich | G8270 | ACSF: 0,61 g/L |
| Dental-Acryl | HYGENIC | n/a | |
| Befestigungsschrauben | RWD Life Science | 62521 | |
| Pferdeserum | ThermoFisher Scientific | 16050130 | |
| Insulinspritzen | BBraun | XG-LBB-9151133S-1BX | 1 mL |
| Isofluran | Panion & BF biotech | DG-4900-250D | |
| KCl | Sigma-Aldrich | P3911 | ACSF: 0,19 g/L |
| Ketoprofen | Swiss Pharmaceutical | n/a | |
| Lidocain | AstraZeneca | n/a | |
| Niedriger Schmelzpunkt | Agarose Invitrogen | 16520 | |
| MgCl₂ | Sigma-Aldrich | M8266 | ACSF: 0,19 g/L |
| Objektträger | ThermoFisher Scientific | 4951PLUS-001E | |
| Mineralöl light, weiß NF | Macron Fine Chemicals | MA-6358-04 | |
| NaCl | Sigma-Aldrich | S9888 | ACSF: 7,46 g/L |
| NaH₂PO₄ | Sigma-Aldrich | S8282 | ACSF: 0,18 g/L |
| NaHCO₃ | Sigma-Aldrich | S5761 | ACSF: 1,76 g/L |
| n-Butylcyanacrylat-Klebstoff (Gewebekleber) | 3M | 1469SB | 3M |
| Vetbond Neural Tracer | Santa Cruz | SC-358883 | FluorGold |
| Paraformaldehyd | Sigma-Aldrich | P6148 | |
| Polyethylen-Tube | RWD Life Science | 62329 | OD 1,50, I.D 0,50 mm und OD 1,09, I.D 0,38 mm |
| Puralube Vet (Auge) Salbe | Dechra | 12920060 | |
| Natriumacetat | Sigma-Aldrich | S2889 | SCFAs: 13,5 mM |
| Natriumazid | Sigma-Aldrich | S2002 | |
| Natriumbutyrat | Sigma-Aldrich | B5887 | SCFAs: 8 mM |
| Natriumpropionat | Sigma-Aldrich | P1880 | SCFAs: 5,18 mM |
| Edelstahl-Führungskanüle | Chun Ta Edelstahlunternehmen CO., LTD. | n/a | AD 0,63 mm; Lokaler Anbieter |
| Edelstahl-Injektor | Chun Ta Edelstahlunternehmen CO., LTD. | n/a | AD 0,3 mm; Dummy besteht aus Injektor; lokaler Anbieter |
| Sekundenkleber | Krazy Glue | KG94548R | |
| Triton X-100 | Merck | 1.08603.1000 | |
| Ausrüstung | |||
| Kanülenhalter | RWD Life Science | B485-68217 | |
| Deckenkamera | FOSCAM | R2 | |
| Digitale stereotaktische Instrumente | Stoelting | 51730D | |
| Präpariermikroskop | INNOVIEW | SEM-HT/TW | |
| Glasperlensterilisator | RWD Life Science | RS1501 | |
| Heizkissen | Stoelting | 53800M | |
| Mikro-Präparierzange | ROBOZ | RS-5136 | gezackt, leichte Wölbung; Extra zart; 0,5 mm Spitzenbreite; 4" Länge |
| Mikro-Präparierschere | ROBOZ | RS-5918 | 4,5" abgewinkelt Sharp |
| Mikroinjektions-Controller | World Precision Instruments (WPI) | MICRO2T | SMARTouch Controller |
| Mikroinjektionsspritzenpumpe | World Precision Instruments (WPI) | UMP3T-1 | UltraMicroPump3 |
| Mikroliter-Spritze | Hamilton | 80014 | 10 μL |
| Optische Faser Kaltes Licht mit doppelter Faserstufe | LGY-150 | Lokaler Anbieter | |
| Haustiertrimmer | WAHL | 09962-2018 | |
| Software | |||
| Tierverhaltens-Videoverfolgungssoftware | Noldus | EthoVision | Version: 15.0.1416 |
