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Methodenartikel

PRP als neuer Ansatz, um eine Infektion zu verhindern: Vorbereitung und

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DOI:

10.3791/50351

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9. April 2013

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Implantat-assoziierten Infektion ist eine signifikante klinische Komplikation. Diese Studie beschreibt einen Ansatz mit plättchenreichem Plasma (PRP) zu implantieren-assoziierten Infektionen zu verhindern, stellt das Protokoll zur Herstellung PRP mit konstanter Blutplättchenkonzentration, und meldet die neu identifizierten antimikrobiellen Eigenschaften von PRP und verwandten Protokollen für die Prüfung wie antimikrobielle Eigenschaften In vitro.

Zusammenfassung

Implantat-assoziierte Infektion wird immer schwieriger, die Healthcare-Industrie weltweit durch die zunehmende Antibiotika-Resistenz, die Übertragung von Antibiotika-resistenten Bakterien zwischen Tieren und Menschen, und die hohen Kosten der Behandlung von Infektionen.

In dieser Studie offenbaren wir eine neue Strategie, die wirksam bei der Verhinderung Implantat-assoziierten Infektion basierend auf den potentiellen antimikrobiellen Eigenschaften von plättchenreichem Plasma (PRP) kann. Aufgrund seiner gut untersuchten Eigenschaften zur Förderung der Heilung hat PRP (ein biologisches Produkt) zunehmend für klinische Anwendungen einschließlich der orthopädischen Operationen, parodontalen und oralen Chirurgie, Kiefer-Operationen, Schönheitsoperationen, Sportmedizin, etc. verwendet

PRP könnte eine erweiterte Alternative zu herkömmlichen Antibiotika zu verhindern Implantat-assoziierten Infektionen. Der Einsatz von PRP kann vorteilhaft sein, im Vergleich zu herkömmlichen Antibiotika since PRP ist weniger wahrscheinlich zu Antibiotikaresistenz induzieren und PRP Die antimikrobielle und Heilung fördernden Eigenschaften können einen synergistischen Effekt auf die Infektionsprävention haben. Es ist wohlbekannt, daß Erreger und menschliche Zellen werden für Implantatoberflächen Renn, und PRP die Eigenschaften der Förderung der Heilung könnte menschlichen Zellanheftung zu verbessern wodurch die Chancen für Infektion. Darüber hinaus ist PRP inhärent biokompatibel und sicher und frei von der Gefahr von übertragbaren Krankheiten.

Für unsere Studie haben wir verschiedene klinische Bakterienstämme, die üblicherweise in der orthopädischen Infektionen gefunden und untersucht, ob PRP in vitro antimikrobielle Eigenschaften gegen diese Bakterien ausgewählt hat. Wir haben PRP hergestellt unter Verwendung eines doppelten Zentrifugation Ansatz, der die gleiche Thrombozytenkonzentration für alle Proben erhalten werden können. Wir haben konsequente antimikrobielle Ergebnisse erreicht und festgestellt, dass PRP starke weist in vitro eine antimikrobielle Eigenschaften gegen Bakterien wie methicillin-sensitiv und Methicillin-resistenten Staphylococcus aureus, Streptococcus der Gruppe A, und Neisseria gonorrhoeae. Daher kann der Einsatz von PRP haben das Potenzial, Infektion zu verhindern und die Notwendigkeit für kostspielige Nachbehandlung von Implantat-assoziierten Infektionen zu reduzieren.

Einleitung

Implantat-assoziierten Infektion eine signifikante klinische Komplikation. Staphylococcus aureus (S. aureus) ist eine der häufigsten Mikroorganismen aus Implantat-assoziierten Infektionen isoliert. Es ist geeignet zur Herstellung einer Biofilm, die die Oberflächen von Implantaten abdeckt und kann zu antibiotikaresistenten Infektion 1,2 führen. Behandlung von Implantat-assoziierten Infektionen erfordert häufig langfristige Krankenhausaufenthalte für wiederholte Debridements und verlängerte parenterale antibiotische Therapie. In antibiotikaresistente Fällen kann die Entfernung des Implantats erforderlich sein. Die steigende Resistenz von Bakterien g....

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Protokoll

Ein. Vorbereitung und Aktivierung von PRP

1,1 Blutentnahme

  1. Anesthetize Kaninchen durch Inhalation von Isofluran (2% in O 2 für die Induktion und 1% für Wartung).
  2. Ziehe 2 ml 0,129 M Tri-Natriumcitrat (ein anticoagulent Lösung) in einen 20-ml-Spritze. Die Tri-Natriumcitrat-Lösung wird durch Auflösen von 1,897 g Trinatriumcitrat in 50 ml destilliertem H 2 O und eine Filterung mit einer 0,22 um Sterilfilter hergestellt.
  3. Sterilisieren rabbit ear mit 70% Ethanol.
  4. Ziehen Blut (zB 5 ml) aus dem Kaninchen Ohrvene über einen Butterfly-Nadel (25 G), die mit der Spritze.
  5. M....

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Ergebnisse

PRP wird reproduzierbar hergestellt unter Verwendung einer doppelten Zentrifugation Ansatz (Abbildung 1). PRP wird festgestellt präsentieren starke (bis zu 100-fache Verringerung der KBE) in vitro antimikrobielle Eigenschaften gegen Methicillin resistenten S. aureus (MRSA) (Abbildung 3), die üblicherweise in Krankenhäusern weltweit 14 gefunden. Ebenso hat PRP starke antimikrobielle Eigenschaften gegen Methicillin sensiblen S. aureus (MSSA), Gruppe A.......

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Diskussion

Platelet-Rich Plasma wurde zunehmend für klinische Anwendungen aufgrund seiner Heilung fördernden Eigenschaften 15-17 verwendet. In der vorliegenden Studie wurde PRP als neuer Ansatz für die Infektionsprävention vorgestellt. PRP wurde festgestellt, dass starke antimikrobielle Eigenschaften gegen MRSA, MSSA, Gruppe A Streptococcus und Neisseria gonorrhoeae haben. Die wichtigsten Vorteile von PRP im Vergleich zu konventionellen Antibiotika, für Infektionsprävention gehören: (1) Aktuelle antibi.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.

Danksagungen

Die Autoren danken Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis und Suzanne Smith für experimentelle Unterstützung und Suzanne Smith für das Korrekturlesen. Die Autoren danken John Thomas, PhD für die Bereitstellung der bakteriellen klinischen Isolaten und John B. Barnett, PhD für seine Unterstützung und die Nutzung der biologischen Sicherheit Labor an der Abteilung für Mikrobiologie, Immunologie und Zellbiologie an der West Virginia University. Die Autoren danken für die finanzielle Unterstützung durch die Osteosynthese und Trauma Care Foundation und der National Science Foundation (# 1003907). Microscope Experimente und Bildanalyse wurden auch in der West Virginia Un....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
RinderthrombinKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-05Thrombin (boviner Ursprung)
CalciumchloridKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-0510% Calciumchlorid
EthanolSigma-AldrichE7023
IsofluranBaxter1001936060
Mueller Hinton BrüheBecton, Dickinson and Company275710
Phosphatgepufferte KochsalzlösungSigma-AldrichD8662
TrinatriumcitratSigma-AldrichW302600
Tryptisches Soja-AgarFisher ScientificR01202
ZentrifugeKendro Laborprodukte750043077
SpritzenfilterMilliporeSLGP033RS

Referenzen

  1. Gristina, A. G. Biomaterial-centered infection: microbial adhesion versus tissue integration. Science. 237, 1588-1595 (1987).
  2. Gristina, A. G., Costerton, J. W. Bacterial adherence to biomaterials and tissue. The significance of its role in....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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