Wir beschreiben die Herstellung von Druckhormonpellets sowie subkutane chirurgischen Implantation in Mäuse. Diese Strategie kann mit dem Wachstum von Zellen und Geweben Xenotransplantate unter die Nierenkapsel von Nacktmäusen ohne Thymus hormonelle Regulation der Karzinogenese und der gutartigen Prostatawachstum zu beurteilen kombiniert werden.
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Methodenartikel
Nierenkapsel Xenografting und subkutane Implantation Pellet für die Beurteilung von Prostata-Karzinogenese und benigne Prostatahyperplasie
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Neue Therapien für zwei gemeinsame Prostataerkrankungen, Prostata-Krebs (PRCA) und gutartige Prostata-Hyperplasie (BPH), hängen entscheidend von der Bewertung ihrer Experimente hormonellen Regulation. Sex Steroidhormone (vor allem Androgene und Östrogene) sind wichtig, PRCA und BPH, wir sondieren ihre jeweilige Rolle bei der Induktion Wachstum der Prostata und Krebsentstehung bei Mäusen mit Experimenten mit Druckhormon Pellets. Hormon-und / oder Drogen-Pellets sind leicht mit einer Pelletpresse hergestellt und operativ in das subkutane Gewebe der männlichen Maus Wirt implantiert. Wir beschreiben auch ein Protokoll für die Bewertung der hormonellen Karzinogenese durch Kombinieren subkutane Implantation Hormon Pellet mit xenografting Prostatazell Rekombinanten unter die Nierenkapsel von immungeschwächten Mäusen. Darüber hinaus subkutane Implantation Hormon Pellet, in Kombination mit Nierenkapsel xenografting der BPH Gewebe, ist nützlich, um die hormonelle Regulation der gutartigen prost besser zu verstehenaß Wachstum und neue Therapien, die auf Sexualsteroidhormon Wege zu testen.
Einleitung
Prostatakrebs (PRCA) und gutartige Prostata-Hyperplasie (BPH) sind erhebliche gesundheitliche Belastungen. PRCA ist die zweithäufigste Organkrebserkrankung bei Männern und eine der häufigsten Ursachen bei Krebserkrankungen ein. BPH ist auch sehr weit verbreitet unter älteren Männern, und es wird geschätzt, dass die klinische Manifestation der BPH, Symptome der unteren Harnwege (LUTS), wird von 50 bis 90% der Männer, 2 beeinflussen. Während Androgene und Östrogene bekannt, in PRCA BPH und wichtig zu sein, unser Verständnis der hormonellen Mechanismen, die Krebsentstehung und das Wachstum zugrunde liegen, ist noch unvollständig 3,4. Ein....
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Protokoll
1. Aufbereitung von Druck Hormone / Drug Pellet
- Dieses Verfahren sollte in einem Stoffsicherheitsabzug erfolgen, während das Tragen eines Labormantel, Handschuhe, Maske, Schutzbrille und Haube. Um eine Kreuzkontamination zu vermeiden, ist es entscheidend, dass die Pelletherstellung Ausrüstung wird gründlich mit 70% igem Ethanol vor und nach der Herstellung jeder Art von Pellet gereinigt.
- Mit Hilfe eines analytischen Maßstab und wiegen Papier, messen gewünschte Menge des Hormons / Drogenpulver. Etwa 5% Extra-Material wird empfohlen, um den Verlust beim Pressen zubringen.
- Einige Hormone / Medikamente erfordern ein Bindemittel oder Füllsto....
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Ergebnisse
Abhängig von der Hypothese getestet werden soll, kann die Nierenkapsel xenografting von Gewebe-oder Zell Rekombinanten isoliert oder in Kombination mit subkutaner Implantation Hormon Pellets durchgeführt werden. Eine schematische Darstellung eines hypothetischen Experiment kombiniert Nierenkapsel xenografting Experiment mit subkutanen Implantation Hormon Pellet wird in 1 dargestellt. Eine Vielzahl von pulverförmigen und / oder kristallinen Substanzen bei der Herstellung von Druck Pellets mit dem P.......
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Diskussion
Dieses Papier und die hierin beschriebenen Protokoll beschreiben die Herstellung von Druckhormon und / oder Drogen-Pellets und das chirurgische Verfahren für die subkutane Implantation von Pellets Mäusen. Je nach Fragestellung angegangen werden, kann diese Technik einzeln oder in Kombination mit Nierenkapsel xenografting der Prostatazelle rekombinante Transplantate oder Prostatagewebe Heterotransplantate, die Techniken weit in Prostata-Forschung verwendet werden, sind von 17 bis 19 durchgeführt werden. Zusamm.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen konkurrieren.
Danksagungen
Die Autoren bedanken sich alle Mitglieder der Ricke Labor, Vergangenheit und Gegenwart zu danken. Wir danken Calvin Patten, Jr., DVM und Brigitte Raabe, DVM, für hilfreiche Anmerkungen zum Protokoll. Wir möchten das NIDDK, NCI und NIEHS für ihre finanzielle Unterstützung für diese Studien bestätigen: R01DK093690, R01CA123199, RC2ESO18764. TMN ist Auszubildender in der Medical Scientist Training Program an der University of Rochester durch NIH T32 GM07356 finanziert, die NIH unter Ruth L. Kirschstein National Research Service Award F30DK093173 unterstützt auch dieses Projekt. CDV wird durch T32CA157322 und ABT unterstützt durch T32ES007015 an der Universität von Wisco....
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Pelletpresse | PARR Industries | 2815 | 3mm Stanze & Matrizensatz |
| Analysenwaage | Ohaus | 1918302 | Voyager oder anderer |
| Bunsenbrenner | Fisher Scientific | 03-962Q | |
| Präpariermikroskop | Leica | L2 | |
| Deltaphase Pad Kit (aufwärmbares Wachs) | Braintree Scientific | 39DP | Alternative zu einem elektrischen Heizkissen |
| Hot Bead Sterilisator | F.S.T.18000-45 | ||
| Isofluran-Verdampfer | Supera Anästhesie Innov | VAP3000 | |
| Induktionskammer | Supera Anästhesie Innov | RES644 | |
| F/AIR Kanister | Supera Anästhesie Innov | 80120 | |
| 4-Port-Verteiler | Supera Anästhesie Innov | RES536 | |
| Rückatmungskreise | Supera Anästhesie Innov | CIR529 | |
| Einlass-/Auslassarmaturen | Supera Anesthesia Innov | VAP203/4 | |
| Druckregler / Manometer | Supera Anästhesie Innov | OXY508 | |
| Sauerstoff-Durchflussmesser | Supera Anästhesie Innov | OXY660 | |
| 21mm Klarer Schlauch | Supera Anesthesia Innov | 301-150 | |
| Kleine Mäuse Nasenkegel | Supera Anästhesie Innov | ACC526 | |
| Steriler OP-Kittel | Midwest Vet Supply | 350.79866.2 | |
| Chirurgische Maske | Midwest Vet Supply | 350.50111.2 | 2-lagig mit Ohrschlaufen |
| Sterile Gaze | Midwest Vet Supply | 001.14100.2 | 2 x 2 Zoll |
| sterile Handschuhe | Kimberly Clark | 55092 | |
| Bouffant | Midwest Vet Supply | 001.27100.2 | |
| Wattespitzen-Applikator | Midwest Vet Supply | 001.06220.2 | |
| Chirurgisches Peeling Wash | Midwest Vet Supply | 733.80010.3 | |
| Sterile Felder (gefenstert) | General Econopak, Inc | 88VCSTF | |
| REAGENTS | |||
| Cholesterol | Sigma-Aldrich | C-3292 | |
| Testosteron Proprionat | Sigma-Aldrich | T-1875 | |
| 17β-Estradiol | Sigma-Aldrich | E-2758 | |
| Isofluran | Midwest Vet Supply | 193.33161.3 | |
| Carprofen | Midwest Vet Supply | 193.70200.3 | Injizierbar (Rimadyl) |
| Betadine | Webster Veterinary | 07-836-3379 | |
| Sterile Kochsalzlösung | Midwest Vet Versorgung | 193.74504.3 | NaCl 0.9%, Injectable |
| SURGICAL INSTRUMENTS | |||
| Straight Sharp/Blunt Scissors | Fine Scientific Tools (F.S.T.) | 14054-13 | |
| Graefe Zange (gezahnt, gezahnt, gebogen) | F.S.T. | 11055-10 | |
| Feine Irisschere | F.S.T. | 14090-09 | |
| Graefe Skalpell | F.S.T. | 10071-12 | |
| Dumont #5 Pinzette | F.S.T. | 11251-20 | |
| Glaspasteurpipetten | Fisher Scientific | S67050 | " |
| Länge Graefe Pinzette (gezahnt, gebogen) | F.S.T. | 11052-10 | |
| Graefe Zange (gezahnt, gerade) | F.S.T. | 11050-10 | |
| Vicryl Nahtmaterial | Midwest Vet Supply | 295-92100.2 | 4-0, FS-2, Resorbierbarer |
| Nadelhalter mit Scherenmechanik | F.S.T. | ||
| Wundclips | Braintree Scientific | ACS CS | Kann 7mm oder 9mm Clips verwenden |
| Reflex Wound Clipper | F.S.T. | 12031-09 | Entspricht der gewickelten Clipgröße |
| Would Clip Remover | F.S.T. | 12033-00 | |
| Universal-Sterilisationsbehälter | F.S.T. | 20810-01 | Jeder autoklavierbare Behälter eignet sich für |
| Spritze mit Nadel | BD | 148292C 1cc | , 25Gx1 |
| Ohrmarken-Applikator | National Band Tag Co. | 1005s1 | Alternative zum Einkerben |
| von Kleintieren Ohrmarken | National Band Tag Co. | Nr. 1005-1 |
Referenzen
- Cancer Facts Figures. 4, American Cancer Society. (2010).
- McVary, K. T. BPH: epidemiology and comorbidities. Am. J. Manag. Care. 12, S122-S128 (2006).
- Nicholson, T. M., Ricke, W. A.
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Nachdrucke und Genehmigungen
