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Murine Hornhauttransplantation: Ein Modell, das die häufigste Form der Organtransplantation Studieren

DOI:

10.3791/51830

November 17th, 2014

In This Article

Summary

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Mäuse wurden als Modell für die Untersuchung vieler Formen der Transplantation verwendet, einschließlich der Hornhauttransplantation. In diesem Bericht beschreiben wir ein Mausmodell sowohl für die akute als auch für die späte Hornhauttransplantation.

Abstract

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Die Hornhauttransplantation ist die häufigste Form der Organtransplantation in den Vereinigten Staaten mit zwischen 45.000 und 55.000 Eingriffen pro Jahr. Es gibt zwar mehrere Tiermodelle für dieses Verfahren, und Mäuse sind die Spezies, die am häufigsten verwendet wird. Die Gründe für die Verwendung von Mäusen sind die relativen Kosten für die Verwendung dieser Spezies, das Vorhandensein vieler genetisch definierter Stämme, die die Untersuchung von Immunreaktionen ermöglichen, und das Vorhandensein einer umfangreichen Palette von Reagenzien, die zur weiteren Definition der Reaktionen bei dieser Spezies verwendet werden können. Dieses Modell wurde verwendet, um Faktoren in der Hornhaut zu definieren, die für den relativen Immunprivilegienstatus dieses Gewebes verantwortlich sind, der es Hornhautallotransplantaten ermöglicht, eine akute Abstoßung ohne immunsuppressive Therapie zu überleben. Es wurde auch verwendet, um die Faktoren zu definieren, die bei der Abstoßung solcher Allotransplantate am wichtigsten sind. Folglich ist vieles von dem, was wir über die Mechanismen der Aufnahme und Abstoßung von Hornhaut-Allotransplantaten wissen, auf Studien zurückzuführen, die ein Mausmodell der Hornhauttransplantation verwendet haben. Neben der Beschreibung eines Modells für die akute Abstoßung von Hornhauttransplantaten stellen wir erstmals auch ein Modell für die späte Abstoßung von Hornhauttransplantaten vor.

Introduction

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Hornhauttransplantation ist eine der erfolgreichsten und häufigsten Arten der Transplantation in Menschen durchgeführt. Die Gründe, warum diese Operation wird durchgeführt, sind das Ergebnis einer Verletzung, Infektionskrankheit, 1, oder andere Formen von nicht-infektiösen Erkrankung der Hornhaut 2. Zahlen aus dem Eye Bank Association of America zeigen, dass mehr als 46.000 wurden im Jahr 2011 durchgeführt (siehe Website unter: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). Ein Hinweis auf seinen Erfolg ist, dass ein Jahr Ausfallraten für allogene Hornhauttransplantate reichen von 10 bis 15% und nach 5 Jahren ist der Erfolg von über 70% 3-8.

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Protocol

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HINWEIS: Alle Tiere in diesem Verfahren verwendet werden, in Übereinstimmung mit der Association for Research in Vision and Ophthalmology Rechnung für den Einsatz von Tieren in Ophthalmic und Vision Research sowie den von der Tieraufsichtsgremium in Saint Louis University Leitlinien behandelt.
HINWEIS: Alle chirurgischen Instrumenten und Lösungen werden vor der Operation sterilisiert, um mikrobielle Infektionen des Auges zu begrenzen. Es sei darauf hingewiesen, dass, während die Tiere tun erleben einige Schmerzen von diesem Verfahren, wissen wir nicht Analgetika beschäftigen werden. Der Grund dafür ist, dass alle Analgetika sind entzündungshemmende und da die ....

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Results

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Das Mausmodell der Hornhauttransplantation ist seit über 20 Jahren verwendet worden, um erfolgreich zu charakterisieren Mechanismen sowohl Hornhauttransplantatabstoßung, 19-23 und Hornhauttransplantatannahme 13, 15,16,18, 24-27. Dieses Modell wurde verwendet, um die Bedeutung des FasL-Expression in Hornhauttransplantatakzeptanz zu schaffen, dass Tiere, die FasL fehlen nicht in der Lage, Hornhauttransplantate 15 zu akzeptieren. Es wurde auch verwendet, um zu zeigen, dass vaskuläre endothe.......

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Discussion

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Das Mausmodell der hier beschriebenen Hornhauttransplantation ermöglicht die Ermittler für die menschliche Hornhauttransplantatabstoßung in einem Modell, das Vorhersage, welche Faktoren am besten mit beiden Ablehnung 15,17,18,20, 26-30 und Akzeptanz 21-25 von Hornhaut assoziiert ist studieren Allografts. Im Gegensatz zu menschlichen Hornhauttransplantation, in denen die Patienten entweder topische oder systemische Behandlung mit Steroiden, entweder zu behandeln oder zu verhindern Ablehnung 31<.......

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Disclosures

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Die Autoren haben keine konkurrierenden finanziellen Interessen.

Acknowledgements

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Die Autoren möchten sich bei den vielen Personen bedanken, die an dieser Technik gearbeitet und sie perfektioniert haben und für die Erstellung vieler Manuskripte sowohl in diesem Labor als auch in anderen verantwortlich waren. Diese Arbeit wurde durch den National Institutes of Health Grant EY12707 (PMS) und einen uneingeschränkten Zuschuss von Research to Prevent Blindness an die Abteilung für Augenheilkunde unterstützt.

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Zeiss OperationsmikroskopZeissRebuilt
1 ml SpritzeBD305122
3 ml SpritzeBD309657
10 ml SpritzeBD309602
Vannus SchereStortzE-3387
11-0 NähteAlcon717939M
Trephin 2,0 mmKatenaK 2-7520
Trephin 1,5 mmKatenaK 2-7510
Tricainhydrochlorid 0,5%AlconNDC 0065-0741-12
HealonAbbottHealon OVD
PinzetteFST11251-20
7-0 NähteAlcon8065
2,5% Phenylephrin HClAlconNDC 61314-342-02
1% TropicamidBausch & LombNDC-24208-585-59
Hamilton SpritzeHamilton7654-01
33 Gauge NadelHamilton90033
Zellsieb (100 μ m nylon)BD Falcon352360
HämozytometerCardinal HealthB3175
Trypan BlueSigmaT8154

References

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  1. Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
  2. Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (201....

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Corneal TransplantationMurine ModelGraft RejectionSurgical ProcedureSuture TechniqueOpacity EvaluationSpleen Cell InjectionAnterior ChamberAllograft SurvivalImmune Privilege

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