Ein Schritt-für-Schritt-Protokoll für die inter-Positions Platzierung von Tissue Engineered Vessels (TEVs) in die Halsschlagader eines Schafes mit End-to-End-Anastomose und digitale Echtzeit-Beurteilung in vivo bis Tieropfer.
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Methodenartikel
Operationstechnik zur Implantation von Tissue Engineered Gefäßprothesen und Folge
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Entwicklung von Tissue Engineered Vessels (TEVs) wird durch die Fähigkeit vorgeschoben, um routinemäßig und effektiv Implantat TEVs (4-5 mm Durchmesser) in einen großen Tiermodell. Ein Schritt-Schritt-Protokoll für interposition Platzierung des TEV und Echtzeit-Digital Beurteilung des TEV und nativen Karotiden wird hier beschrieben. Durch die Implantation von Flusssonden, Katheter und Ultraschallkristallen (fähig In-vivo-Überwachung ermöglicht wird Aufzeichnungs Änderungen implantierter TEVs und nativen Karotiden) zu der Zeit der Operation dynamisch Durchmesser. Nach der Implantation können Forscher arterielle Blutströmungsmuster, invasive Blutdruck und Arteriendurchmesser ergibt Parameter wie Pulswellengeschwindigkeit, Augmentationsindex, Pulsdruck und Einhaltung zu berechnen. Datenerfassung unter Verwendung eines einzelnen Computerprogramms zur Analyse der gesamten Dauer des Experiments durchgeführt. Solche unschätzbaren Daten gibt Einblick in TEV Matrixumbau, dessen resemblance, native / Schein-Kontrollen und Gesamt TEV Leistung in vivo.
Einleitung
Das Hauptaugenmerk bei der Entwicklung TEVs war es, einen Ersatz für autologes Transplantat Ersatz bieten, wenn autologe Gefäße sind nicht verfügbar und die Gebersicht Morbidität zu begrenzen. Beispielsweise hat die Zahl der koronaren Arterien-Bypass-Operationen pro Jahr in den USA 350.000 überschritten, und die ideale Quelle geeigneter Transplantate bleibt der linken Arteria mammaria interna, linke vordere absteigende Koronararterie und die Vena saphena 1. Da viele Menschen, die unter Gefässkrankheiten leiden, nicht geeignet Arterien und Venen für autologes Transplantat ausgetauscht werden müssen, hat die Entwicklung von TEVs somit ein intensives Forschun....
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Protokoll
HINWEIS: Dieses Protokoll wurde von der Animal Care und Verwenden Committee an der State University of New York in Buffalo zugelassen.
1. Präoperative Vorbereitung
- Verwenden Schafe (Dorset Quer, weiblich, ca. 1-3 Jahre alt mit einem Gewicht von 40 bis 60 kg) für die folgende Studie. Verwalten Cyclosporin A (200 mg / Tag), Aspirin (975 mg / Tag) und Coumadin (20-30 mg / Tag) durch den Mund, ab 3 Tage vor der Operation und auch weiterhin für die Dauer aller Studien.
- Stellen Sie sicher, das Schaf hat 12 Stunden vor der Operation (normales Futter = 1,8 kg Heu und 0,4 kg Getreide) gefastet.
- Sterilisieren Sie alle....
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Ergebnisse
Mehr als 30 Schafe, die in diesem Bericht für die Implantation von TEVs beschrieben (im Druck) Operationstechnik 9 unterzogen. Eine Tabelle mit einer Zusammenfassung der jüngsten Schafe Operationen nach Protokolloptimierung sind in Tabelle 2 dargestellt. Alle Schafe nach TEV Implantation mit nicht lebensbedrohliche Komplikationen erholt. Bei einigen Tieren wurde Fibrose im nativen Arterie nahe der Spitze des innewohnenden arteriellen Katheter beobachtet. Eine signifikante Zunahme der Entzündu.......
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Diskussion
Der Zweck dieses Berichts ist es, ein sicheres und reproduzierbares Verfahren zur Implantat TEVs von Interesse in der Schaf- Halsschlagader ist. Die Mutterhalsschlagadern, die in diesem Modell verwendeten Tiere waren 0,5-0,75 mm Dicke und 4,5 bis 5 mm Außendurchmesser. Die hier beschriebene Operationstechnik wurde zum Implantieren TEVs unterschiedlicher Geometrien messen 0,25-1 mm Dicke, 4-5 mm Außendurchmesser und 4 cm Länge mit großem Erfolg bewährt sich bis zu 3 Monaten Dauer der beabsichtigten Endpunkt erfolgreich. .......
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Offenlegungen
Es gibt keine Offenlegungen zu berichten.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem National Heart and Lung Institute (R01 HL086582) und der New York Stammzellwissenschaftsfonds (NYSTEM, Vertrag # unterstützt C024316), um STA und in JoVE Video verwendet wurden von John Nyquist abgeschlossen DDS Abbildungen; Medical Illustrator von State University of New York in Buffalo.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Druckmessumformer | Becton Dickinson | P23XL-1 | Menge: 1+ (1 für jede Arterie). Wird mit wassergefüllten Membrankuppeln verwendet. |
| Verstärker- und Wandlerbox | Gould | 5900 Signal Conditioner | Käfig Menge: 1, Zwei Wandler und Verstärker sollten im Käfig enthalten sein. Während dieses spezielle Gerät nicht mehr hergestellt werden kann, kommunizieren andere im Handel erhältliche Druckmessumformer mit BNC/Analog-Ausgang mit dem Sonometrics-Gerät. |
| T403 Konsole mit TS420 perivaskulärem Durchflussmessermodul (x2) | Transonic Systems | T403 Modul und TS420 (x2) | Menge: 1, Durchflusssonden, die den Fluss durch jede der Halsschlagadern messen, werden mit jedem der TS420-Einheiten verbunden. |
| Digitale Ultraschall-Messeinheit | Sonometrics | TR-USB | Menge: 1 |
| Durchflusssonde Präzision S-Serie 4 mm | Transonic Systems Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | Menge: 2 |
| 1 mm Sonometrics Kristalle | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | Menge: 2-4 (2 für jede Arterie) |
| Katheter für die Implantation | BD (Becton Dickinson) | 381447 | Menge: 1+ (1 für jede Arterie). Katheter wird geschnitten und an Mikrobohrungsschläuchen befestigt, Stylette wird zum Einführen verwendet. |
| Tygon Microbore Tubing | Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulierung S-54-HL | Auf Länge geschnitten für ein Erweiterungsset |
| Luer Stub Adapter | BD (Becton Dickinson) | 427564 (20 gauge) | Menge: 1+ (1 für jeden Arterienkatheter) |
| Surflo Injektionsstopfen | Terumo | SR-IP2 | Menge: 1+ (1 für jeden Arterienkatheter) |
| Meadox | PTFE (Teflon) Filz | 19306 | Zuschnitt. Der in unseren Studien verwendete PTFE-Filz wurde eingestellt. Vergleichbare Unternehmen wie " Chirurgisches Netz" gleichwertige Produkte anzubieten. |
Referenzen
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: Results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. Journal of the American College of Cardiology. 44, 2149-2156 (2004).
- Achouh, P., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
