Hypoxisch-ischämische Enzephalopathie nach perinataler Asphyxie kann mit Tiermodellen untersucht werden. Wir demonstrieren die Verfahren, die zur Etablierung eines Ferkelmodells der neonatalen hypoxisch-ischämischen Enzephalopathie erforderlich sind.
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Methodenartikel
Ein Ferkel Modell Neonatal hypoxischischämischer Enzephalopathie
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Asphyxie unter der Geburt, die hypoxisch-ischämischen Enzephalopathie (HIE) verursacht, entfallen 0,66 Mio. Todesfälle weltweit jedes Jahr rund ein Viertel der weltweit 2,9 Millionen Todesfälle bei Neugeborenen. Tiermodelle von HIE haben zum Verständnis der Pathophysiologie in HIE beigetragen hat und den dynamischen Prozess, der in Hirnverletzung auftreten aufgrund perinataler Asphyxie hervorgehoben. So haben Untersuchungen an Tieren ein Zeitfenster für die Post-Beleidigung Behandlungsstrategien vorgeschlagen. Hypothermie hat sich als Behandlung für HIE in pdiglet Modellen getestet und anschließend in klinischen Studien nachgewiesen wirksam. Variationen des Modells sind in der Studie von Zusatz neuroprotektive Verfahren und Ferkel Studien von Xenon und Melatonin angewendet worden sind, um die klinische Phase I und II führten Studien 1,2. Die Ferkel HIE Modell wird weiter für neonatale resuscitation- und hämodynamische Studien sowie in Untersuchungen von zerebrale Hypoxie auf zellulärer Ebene verwendet. Es ist jedoch eine technisch anspruchsvolleModell und Variationen in dem Protokoll kann entweder zu leicht oder zu schweren Hirnschäden führen. In diesem Artikel zeigen wir die technischen Verfahren für die Schaffung eines stabilen Ferkel Modell der neonatalen HIE notwendig. Zuerst wird die neugeborenen Ferkel (<24 h alt, Durchschnittsgewicht 1500 g) anästhesiert, intubiert und in ein ähnlicher Aufbau wie in einer Intensivstation gefunden überwacht. Globale Hypoxie-Ischämie durch Absenken des inspiratorischen Sauerstofffraktion, globale Hypoxie, Ischämie durch Hypotonie und eine flache Spur Amplitude integriert EEG (aEEG), der zerebrale Hypoxie erreichen induziert. Überleben durch Anpassung Sauerstoffversorgung nach dem aEEG Antwort und der Blutdruck vorangetrieben. Hirnverletzung durch Histopathologie und Magnetresonanztomographie nach 72 h quantifiziert.
Einleitung
Perinatale Asphyxie ist eine akute und oft unvorhergesehene Zustand mit hypoxisch-ischämischen Enzephalopathie (HIE) zugeordnet ist. Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, eine Ferkelüberlebensmodell der perinatalen hypoxischischämischer Enzephalopathie zu demonstrieren. Dieses Modell kann verwendet werden, um die Wirkung der verschiedenen Grade der Hypoxie-Ischämie am Gehirn und neonatalen von experimentellen Behandlungen auf Neuropathologie, Magnetresonanzbildgebung und Spektroskopie (MRI und MRS) und Biomarker in Körperflüssigkeiten wie Blut, Rückenmarksflüssigkeit und Urin zu untersuchen . Das Modell hat sich auch als nützlich für die Untersuchung der H....
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Protokoll
Dieses Protokoll wurde von der dänischen Tierversuche Inspektion genehmigt. Alle Versuchstiere wurden während der Verfahren anästhesiert. Reproduktion dieses Protokoll muss in Übereinstimmung mit den nationalen Ethik und Tierschutz-Richtlinien durchgeführt werden, und von den lokalen Ethikkommissionen genehmigt.
1. Tiere
- Dänische Landrasse Ferkel <24 Stunden alt mit einem Gewicht von ca. 1.500 - 2.000 g.
2. Anästhesie und Wartungsflüssigkeiten
- Bereiten Sie die Geräte für die Anästhesie benötigt (Abbildung 1): Eine Maske für Sevofluran Verwaltung, Alkoholtupfer, peri....
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Ergebnisse
Die Wirkungen von Hypoxie-Ischämie am Gehirn, die während der induzierten Insult auftreten, durch Aufzeichnen der Spur aEEG dokumentiert. Ein Vertreter aEEG Trace wird in 6 gezeigt.
Abbildung 6. Repräsentative aEEG Spur. Low Amplitude aufgrund von Hypoxie-Ischämie.
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Diskussion
Aufgrund seiner Komplexität kann das beschriebene Modell nur in Einrichtungen akkreditiert implementiert und in Tierversuchen erlebt werden. Genehmigung durch lokalen Ethikausschüsse müssen vor Beginn der Experimente erhalten werden kann, und eine optimale Tierschutz muss jederzeit gewährleistet sein. Da das Modell auf das Überleben der Testtiere basiert, ist es wichtig, dass eine sterile Umgebung während invasiven Verfahren um Infektionen zu verhindern, gehalten.
Die Wahl der Anästhesie ist.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Danksagungen
Die Autoren danken John Kristensen und Søren Braad Andersen von der Abteilung für Kommunikation des Universitätskrankenhauses Aarhus, Dänemark, für ihre außergewöhnliche Hilfe beim Filmen und Schneiden. Die Tiertechnikerin Diana Gyldenløve und die Tierärztin Birgitte Kousgaard, Institut für klinische Medizin des Universitätskrankenhauses Aarhus, Dänemark, für die Unterstützung bei der Tierpflege. Diese Studie wurde unterstützt von der Lundbeck-Stiftung, der Laerdal-Stiftung für Akutmedizin, der Forschungsstiftung der Region Mitteldänemark, der Augustinus-Stiftung, der Aase und der Ejnar-Danielsens-Stiftung, dem Institut für klinische Medizin des Universitätskrankenhau....
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Warm-Touch-Kinderdecke | Covidien | 5030840 | |
| selbstklebend Apertrue Abdecktuch | Barriere | 915447 | |
| Utility Tuch (steril) 75x80 cm | Barriere | 800530 | |
| Neoflon | BD - Luer | 391350 | |
| Laryngoskop | Miller | 85-0045 | |
| Endotrachealtubus 2,5 mm | Covidien | 111-25 | |
| Endotrachealtubus 3,0 mm mit Manschette | Unomedical | MM61110030 | |
| Endotrachealtubus 3,5 mm mit Manschette | Unomedical | MM61110035 | |
| Anästhesiegerät | GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
| EEG - Elektroden/Subdermale Nadelelektrode zum Einmalgebrauch | Cephalon | ACCE120550 | |
| EKG - Elektroden | medtronic | 3010107-003 | |
| EKG-Elektroden für MR | philips | ACCE120550 | |
| Arterieller Blutprobenehmer - Aspirator | Radiometer medical ApS | 956552 | |
| Polyurethan Nabelvenenkatheter (5 Fr/Ch) | Covidien | 8888160341 | |
| Polyurethan Nabelvenenkatheter (3,5 Fr/ch) | Covidien | 8888160333 | |
| Nahtset (Größe 3-0) | Covidien | 8886 623341 | |
| BD Spinalnadel 0,7x38mm | BD Nadeln | 405254 | |
| Gas mit 96% Stickstoff / 4% Sauerstoff | Air Liquide | auf Bestellung | |
| NeuroMonitor (CFM) System | Natus Medical Incorporated | OBM70002 |
Referenzen
- Chakkarapani, E., et al. Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs. Annals of. 68, 330-341 (2010).
- Robertson, N. J., et al. Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model. <....
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Nachdrucke und Genehmigungen
