Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.

Methodenartikel

Ein neuer Ansatz, die Handhabung für ein Studium Aggression Eliminiert und die "Loser" Effect in

9.5K Ansichten

⸱

DOI:

10.3791/53395

⸱

30. Dezember 2015

 ,  , 
1Department of Neurobiology, Harvard Medical School

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Während Fruchtfliege Kämpfe, die Verhaltensmuster beobachtet, kämpfen Dynamik, und die damit verbundenen Lern- und Gedächtnis werden von experimentellen Bedingungen beeinflusst. Die hier vorgestellte Protokoll beschreibt ein neues Verfahren, das vollständig eliminiert Handhabung von Fliegen während der Experimente. Dies verbessert Kampf Dynamik und ermöglicht die Bildung von starken "Verlierer" Effekte.

Zusammenfassung

Aggressives Verhalten in Drosophila melanogaster wird der sequentielle Expression der stereotype Verhaltensmuster zusammengesetzt (zur Analyse siehe 1). Dieses komplexe Verhalten durch genetische, hormonelle und Umweltfaktoren beeinflusst. Wie in vielen Organismen beeinflusst früheren Kampferfahrung die Kampfstrategie von Fliegen und das Ergebnis der späteren Wettbewerben: einem verlorenen Kampf erhöht die Wahrscheinlichkeit des Verlierens später Wettbewerbe und enthüllt "Verlierer" Auswirkungen, die wahrscheinlich beinhalten Lernen und Gedächtnis 2-4. Das Lernen und Gedächtnis, die die Expression von komplexen sozialen Verhaltensweisen wie Aggression begleitet, ist vor Test Umgang mit den Tieren 5,6 empfindlich. Vielen experimentellen Verfahren werden in verschiedenen Laboratorien verwendet, um Aggression 7-9 jedoch nicht routinemßig verwendete Protokoll das schließt Handhabung entfernt ist derzeit studieren. Hier berichten wir über eine neue Verhaltens Vorrichtung, die beseitigt Handhabung von Fliegen, mit instead ihre angeborene negativen geotactic Reaktionen auf Tiere in oder aus der Kampfkammern zu bewegen. In diesem Protokoll kleinen kreisförmigen Kampfarenen enthaltend ein Futternapf werden in zwei gleiche Hälften durch einen abnehmbaren Kunststoffschieber vor der Einführung der Fliegen unterteilt. Fliegen geben Kammern aus ihrer Heimat Isolierung Vials über Schleifkammertüren und Geotaxis. Nach dem Entfernen des Kunststoffgleitern, sind Fliegen frei zu interagieren. Nach bestimmten Zeitperioden werden entfernt wieder von Schiebereglern für die nachfolgenden Experimente getrennt. All dies wird leicht ohne Handhabung einzelner entfernt wurde. Dieses Gerät bietet einen neuartigen Ansatz zur Aggression und die damit verbundene Lernen und Gedächtnis, einschließlich der Bildung von "Verlierer" Effekte in fly Kämpfe zu studieren. Darüber hinaus kann dieses neue Mehrzweck-Verhaltens-Gerät verwendet, um andere soziale Verhaltensweisen von Fliegen lernen werden und sollte in der Regel sein, von Interesse für die Untersuchung von Erfahrungen im Zusammenhang mit Veränderungen in der grundlegenden Verhaltensprozesse.

Einleitung

Aggression in der Tieranlagen ist stark mit dem Erwerb und der Besitz von Ressourcen wie Nahrung, Territorium und Kollegen verbunden. Angesichts der wichtigen Rolle dieses spielt in der Fitness von Individuen, ist es nicht verwunderlich, dass Aggression in der Tierwelt entwickelt. Als ein adaptives Merkmal, das direkt zugute Individuen wird eine starke Lernen und Gedächtnis-Komponente mit Aggression verbunden. Im Wettbewerb um die sozialen Rang, beeinflusst das Ergebnis der späteren Wettbewerben früheren Kampferfahrung. In der Regel vor Verlierer Erfahrung zu und gewinnen Erfahrung ab, die Wahrscheinlichkeit zu verlieren späteren Wettbewerben (so genannte "Verlierer" und "Gewinner" Effekte). "Loser" Effekte wurden in einer Vielzahl von Arten beobachtet worden, und einige Berichte deuten darauf hin, dass diese mehrere Tage dauern, während "Gewinner" Wirkungen sind in der Regel von kürzerer Dauer 2,10,11.

Der erste Bericht über aggressives Verhaltenin Fruchtfliegen (D. ampelophila) wurde durch Sturtevant 1915 in einer mit Sex Anerkennung und Geschlechtsselektion 12 betroffenen Papier. Ein halbes Jahrhundert später, vollständigere Untersuchung der männlichen Fruchtfliege Aggression wurden, dass die meisten der während der Fruchtfliege Kämpfe beobachtete Verhaltensmuster beschrieben. Diese Versuche waren meist in kleinen Gruppen von mehr als 13 bis 15 Stunden beobachtet, männliche und weibliche Fliegen durchgeführt. In jüngster Zeit mit der Zugabe von leistungsfähigen genetischen Werkzeuge, dyadische gleichgeschlechtlichen Kampf Setups und kürzere Zeiten der Beobachtung, D. melanogaster hat sich als wichtiges Modellsystem für das Studium der Biologie der Aggression 1,16 entstanden. Die Analyse der Kämpfe zwischen gleichgeschlechtlichen Paaren von männlichen und weiblichen Fliegen zeigten, dass Aggression beinhaltet stereotype Verhaltensmuster, die Übergang von einem zum anderen zu einer statistisch zuverlässige Weise 1,17. Einige der beobachteten Verhaltensmuster sind geschlechtsspezifisch, während andere im Kampf beobachtets bei beiden Geschlechtern. Männlich Kämpfe gehen zu höheren Intensitätsstufen als weibliche Kämpfe und führen zur Bildung von Dominanzverhältnisse mit klaren "Gewinner" und "Verlierer". Derzeit haben viele Labors begann die Untersuchung der biochemischen 18, neuronale 7,19-21 und genetische 22 Grundlagen der Aggression. Leider eine Meta-Analyse von Studien, um Einblick in Kampf Dynamik und die Bildung und Aufrechterhaltung der Dominanzbeziehungen ist problematisch aufgrund der Verwendung einer Vielzahl von experimentellen Verfahren in verschiedenen Labors erhalten. Im wesentlichen alle der in der Literatur beschriebenen Techniken beinhalten Handhabung und Manipulationen der Fliegen, um sie in Arenen 19,23,24 und während des Verhaltensexperiment 3,4 einzuführen Fliegen aus Arenen übertragen. Sanfte Aspiration ist der häufigste Weg, um Fliegen zu manipulieren 3,4,23-25, aber kalt oder CO 2 Anästhesie werden auch verwendet, 9,26, auch wenn previous Studien haben bereits berichtet, dass diese Verfahren haben schädliche Auswirkungen auf Flugverhalten 27,28. Ein Zeitraum von mindestens 24 h nach der Verwendung von Anästhetika empfohlen, ihre Auswirkungen auf das Verhalten 29,30 minimieren.

Fliegen lernen aus früheren Kampferfahrung und ihre Verhaltensmuster zu verändern Nutzung in neuen Situationen, was darauf hindeutet, dass Lernen und Gedächtnis zu begleiten und Folgen der agonistischen Begegnungen. In diesem Sinne, Fliegen Kämpfe ähneln operante Konditionierung Lernsituationen, in dem Fliegen zu lernen, dass eine Strategie hat funktioniert und es dann immer öfter bei der späteren Begegnungen. Fliegen ändern ihre Kampfstrategien nach dem Dominanzverhältnisse wurden während der Kämpfe etabliert, mit Gewinnern Longieren mehr und mehr und Verlierer immer weniger. Nach einer Zeit der Trennung vorherigen Verlierer zeigen viel mehr unterwürfige Verhalten und mit hoher Wahrscheinlichkeit 2. wenn gepaart mit naiven fl kämpft verlierenies oder vorherigen Gewinnern 3,4. Jedoch hat das Fehlen eines experimentellen Verfahrens gesetzt wird, das Handling von Fliegen detaillierte Studien "loser" Effekte erschwert. In einer aktuellen Studie verglichen wir zwei experimentellen Verfahren routinemäßig in Laboratorien (Aspiration und Kälte-Anästhesie) verwendet werden, um Fliegen in Verhaltenskammern an das neue Verfahren, das Handling eliminiert einzuführen. Die Ergebnisse zeigten, dass Kalt Anästhesie hatten viel größere negative Auswirkungen auf Aggression als Aspiration, sondern sogar Aspiration reduziert das Niveau der Aggressivität von Fliegen. Aspiration war jedoch zu hoch signifikante Auswirkungen auf das Lernen und Gedächtnis, die Aggression zu begleiten. Nach identischen Protokoll mit zwei experimentellen Verfahren (Aspiration und keine Behandlung), eine robuste "Verlierer" Effekt wurde nur beobachtet, wenn die Handhabung von Fliegen wurde von der Versuchsdurchführung 5,6 eliminiert.

Idealerweise Studium der Drosophila Aggression in labotorien sollten Umweltsituationen, die normalerweise in der Wildnis begegnen fliegt (Wettbewerb um Ressourcen, Territorium zu verteidigen und Raum zu entkommen) enthalten. Darüber hinaus sollten Versuchsbedingungen optimiert werden, um zuverlässig zu induzieren, zu beobachten und das Verhalten zu untersuch interpretiert werden (versuchen, die Behandlung der Tiere zu minimieren, die Verwendung von CO 2 als Narkosemittel zu begrenzen, und Standardisierung der experimentellen Verfahren). Bei dem Versuch, die meisten oder alle diese Probleme anzugehen, haben wir einen neuen Verhaltensgerät, das Handling von Fliegen beseitigt, bevor, während und nach den verhaltens Arenen ihre Einführung. Mit diesen Vorrichtungen verwenden Fliegen ihre angeborene negativen Geotaxis zu bewegt und in die und aus den Kampf Kammern übertragen werden. Durch den Wegfall der Handhabung von Fliegen, zielt darauf ab, das Protokoll an: (a) verringern die Verhaltens Variabilität zwischen Individuen; (b) verringern Sie die notwendige Zeit für Fliegen zu interagieren und erzeugen klare Dominanzverhältnisse (Männer); und (c) sicher zu induzieren stark genug behavioral Änderungen Bildung "Verlierer" Effekte erlauben.

Dieses Protokoll beschreibt eine neue experimentelle Vorrichtung und ein schrittweises Vorgehen, um Aggressionen zu analysieren und die Bildung einer starken "Verlierer" Effekt in D. ermöglichen melanogaster. Wir erwarten, dass dieser Verhaltensvorrichtung leicht für die Untersuchung von anderen sozialen Verhaltensweisen, die von Fruchtfliegen zeigte angepasst werden.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Protokoll

Hinweis: Nachfolgend finden Sie eine Schritt-für-Schritt-Beschreibung der Versuchsprotokoll wir verwenden, um zwischen Paaren von männlichen Fruchtfliegen ermöglichen zuverlässige Auslösung der Aggression (D. melanogaster). Dieses Verfahren führt zur Bildung eines "loser" -Effekt. Über dieses Protokoll, um eine kurzfristige "Gewinner" Effekt wurde auch vor kurzem berichtet, 5,6. Abbildung 1 zeigt die Zeitleiste der Verhaltensexperimente.

figure-protocol-1

Abbildung 1. Zeitleiste der Aggression Experiment. Am Tag 1 werden im Spätstadium männlichen Puppen (bei Flügeln werden schwarz) in frisch hergestellten Isolationsdurchstechflaschen isoliert. Am Tag 5 nach dem Austritt als Erwachsene, werden 4 Tage alten männlichen Fliegen mit CO 2 anästhesiert und mit verschiedenen Farben zur Identifikation lackiert. Am Tag 7, Lebensmittel Tassen und Kampfkammernbereit, die Verhaltensexperimente einzurichten. Zwei 6-7 Tage alten Männchen werden in die Kammern eingelegt und in der Lage sind, zu interagieren. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

1. Tag 1: Soziale Isolation der Puppen

  1. Raise und Pflege Fliegen Aktien in einer umwelt kontrollierten 12 Stunden Licht / 12 h Dunkel-Zyklus Brutschrank bei 25 ° C und 50% relativer Luftfeuchtigkeit.
  2. Bereiten Isolationsdurchstechflaschen: Erhitzen Sie frische fliegen Essen, bis sie geschmolzen. Verwendung einer Pasteur-Pipette etwa 1,5 ml geschmolzene Fliege Nahrung in Einzel leer Probiergläser (1,6 x 10 cm). Lassen Sie die Speisen zu verfestigen.
  3. Isolieren, Puppen: Mit einem feinen Pinsel, entfernen Sie vorsichtig eine Late-Stage-männliche Puppe (bei Flügeln werden schwarz) aus dem Vorratsröhrchen und legen Sie sie auf der Seite eines frisch hergestellten Lebensmittel, die Reagenzglas. Schließen Isolationsdurchstechflaschen mit Baumwolle (Abbildung 2).
  4. Platz Isolationsdurchstechflaschen mit Puppen in den 12 Stunden Licht / 12 Stunden Dunkelheit Brutschrank bei 25 ° C und 50% relativer Luftfeuchtigkeit.

figure-protocol-2

Abbildung 2. Soziale Isolation. Eine Spätstadium männliche Puppe ist auf der Seite an einer frisch hergestellten Isolations Fläschchen gegeben. Isolation Fläschchen Puppe enthalten, sind in den 12 Stunden Licht / 12 Stunden Dunkelheit Brutschrank bei 25 ° C und 50% relativer Luftfeuchtigkeit aufgestellt. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

2. Tag 5: Malerei die Fliegen für individuelle Identifikationszwecken

  1. Führen Sie diesen Schritt am Tag 5 4 Tage alten männlichen Fliegen und zwei Tage vor der Verhaltensexperimente, um die negativen Auswirkungen der CO 2 Anästhesie zu minimieren.
  2. Anesthetize Fliege mit CO 2.
  3. Mit einem feinen Zahnstocher, legen Sie einen kleinen Punkt von Acrylfarbe auf den Brustkorb. Vermeiden Sie es, Farbe auf dem Kopf, Flügel, Bauch oder Beine (Abbildung 3).
  4. Lassen Sie Farbe trocken für etwa 10 sec, und sanft übertragen Fliegen zurück zu ihrer ursprünglichen Isolationsdurchstechflaschen.
  5. Return Isolationsdurchstechflaschen mit dem 12 Stunden Licht / 12 Stunden Dunkelheit Brutschrank bei 25 ° C und 50% relativer Luftfeuchtigkeit.

figure-protocol-3

Figur 3. Individuelle Identifizierung. Nach Betäubung eines Fliege mit CO 2, einem kleinen Tropfen Acrylfarbe auf dem Thorax angelegt wird. Für individuelle Identifikations Zweck werden verschiedene Farben verwendet (weiß und hier blau). Siehe nachstehende Diskussion über die Verwendung von CO 2 bei diesem Schritt. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses figu ansehenRe.

3. Tag 7: Vorbereitung der Vorrichtung

  1. Bereiten Sie Lebensmittel Cups:
    1. Erhitzen Sie frische fliegen Essen, bis es schmilzt.
    2. Verwendung einer Pasteur-Pipette, etwa 0,8 ml Lebensmittel an den Deckel eines Schraubdeckelfläschchen (1,5 cm Durchmesser, 1 cm Höhe) und abkühlen lassen. Vermeiden Sie Luftblasen.
    3. Machen Sie frische Hefe Paste durch Mischen von Trockenhefe mit ein paar Tropfen Wasser. Wenn dicke, wenden Sie einen kleinen Tropfen von Hefe-Paste auf der Mitte des Nahrungsmittelbecher Oberfläche mit einem Zahnstocher (Abbildung 4).

figure-protocol-4

Abbildung 4. Vorbereiten der Nahrung Tasse. Ein Nahrungsmittelbecher mit frischen Fliege Essen zubereitet. Nach den Lebensmittel verfestigt wird ein Punkt von Hefe-Paste in der Mitte des Nahrungsmittelbecher Oberfläche platziert. Bitte klicken Sie hier, um die vIEW eine größere Version dieser Figur.

  1. Bereiten Individuelle Kämpfen Chambers:
    1. Mit Wasser gründlich waschen der Vorrichtung und individuellen Kampfkammern vor Gebrauch jedes Mal. Dry mit Papiertuch vor dem Gebrauch.
    2. Legen Sie ein Lebensmitteltasse in der Mitte jeder kämpft Kammer und fixieren mit einem Rückgang von Kitt.
    3. Bedeckung Löschkammern mit dem Vorrichtungsdeckel (Abbildung 5).
    4. Platzieren der Vorrichtung in einer Umgebung mit hoher Feuchtigkeit (60%) bei 25 ° C.
    5. Legen Sie eine Lichtquelle über dem Gerät, um die Kämpfe Kammern zu beleuchten und stellen Sie eine Videokamera für die Aufnahme von oben.

figure-protocol-5

Abbildung 5. Vorbereitung der einzelnen Kampfraum. Das frisch zubereitete Speisen Tasse mit einem Punkt von Hefe-Paste auf der Oberfläche in gewaschen einzelnen fi FestKämpfe Kammern. Kammern mit der zweiteilige Deck das Einführen eines undurchsichtigen Kunststoffteiler in einzelne Kampfkammern geschlossen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

4. Tag 7: Verhalten Experiment

  1. Führen Sie die Verhaltensexperimente mit 6-7 Tage alten männlichen Fliegen.
  2. Legen Kunststoffteiler in jeden Kampf gegen Kammer.
  3. Entfernen Sie die Watte aus der Isolationsröhre und positionieren Sie den Schlauch unter einem offenen Loch auf der Seite des Geräts.
  4. Lassen Sie die Fliege in den Kampfraum gelangen durch negative Geotaxis, in der Regel innerhalb von wenigen Sekunden.
  5. Schließen Sie den Schiebewand nach der Fliege hat das Rohr nach links und die Kammer eingetragen.
  6. Wiederholen Sie den Vorgang, um die zweite Fliege in den Kampf Kammer auf der anderen Seite des Gerätes einführen.
  7. Legen Sie das Gerät wieder in den beleuchteten videotaping Position.
  8. Beginnen Sie Videoaufzeichnung und entfernen Sie die Plastikteiler, damit Fliegen zu interagieren.
    1. Für Aggression Experimente:
      1. In diesen Experimenten kämpft Rekord für mindestens 20 Minuten, um die Bildung von starken Dominanzverhältnisse zu gewährleisten.
      2. Nach der gewünschten Zeit, zu stoppen Videoaufzeichnung.
      3. Fliegen aus den Kämpfen Kammern entfernen durch die Umkehrung der oben beschriebenen Vorgehensweise.
      4. Gründlich Verhaltensgerät mit einem milden Reinigungsmittel und Wasser nach jedem Gebrauch spülen und waschen.
    2. Für "Loser" Effect Experimente:
      Hinweis: In diesen Experimenten werden zunächst Kämpfe als der Konditionierungsphase und zweiten Kämpfe als der Testphase berücksichtigt. Die Zeit der Ruhe zwischen den Kämpfen kann unterscheiden, aber 10 Minuten ermöglicht die Bildung einer starken "Verlierer" Wirkung.
      1. Folgen Sie dem oben beschriebenen, einen ersten Kampf durchführen Vorgehensweise.
      2. Entscheidender Schritt: Um die Bildung einer "Verlierer" Mentalität, e induzierenNsure, die ersten Kämpfe sind mindestens 20 min lang, um starke Dominanz Beziehungen aufzubauen. Nach 20 min Setzen Sie die Kunststoffteiler in Kampfkammern, um die Fliegen zu trennen.
      3. Nach 10 min Ruhezeit, entfernen Sie vorsichtig die Kunststoffteiler, damit Fliegen zum zweiten Kämpfe zu interagieren.
      4. Am Ende der zweiten 20 Minuten Kampf, stoppen Sie die Videoaufzeichnung.
      5. Fliegen aus Verhaltens Kammern wie oben entfernen.
      6. Wieder einmal gründlich den Verhaltensgerät reinigen.

5. Behavioral Analysis

  1. Übertragen Filme
    1. Verbinden Kameras an den Computer.
    2. Konvertieren Fliegen .MTS um Fliegen .mov und kommen Filme Clips zusammen, mit Hilfe von Video-Konvertierungssoftware und die Option "beizutreten ausgewählten Clips".
    3. Beobachten Sie und jeden Film mit Video-Reader-Software zu analysieren.
  2. Scoring-Verhalten
    Hinweis: Dies kann manuell durchgeführt werden oder mit unsing Verhaltensanalyse-Software-Programm, sofern verfügbar. Die folgende Abbildung beschreibt eine mögliche manuelle Analyse für einen "Verlierer" Wirkung.
    1. Note die Zeit der ersten Begegnung zwischen den Fliegen an der Nahrungsmittelbecher (Begegnungen sind Wechselwirkungen zwischen Paaren von Fliegen, die mindestens 2 Sek halten) und dem Zeitpunkt des Auftretens der ersten Ausfallschritt (ein Verhaltensmuster, in dem eine Fliege erhebt sich hoch auf seiner Hinterbeine und schnappt nach unten auf und versucht, den Gegner zu greifen). Dann punkten die Latenz zu stürzen (das Intervall zwischen der ersten Begegnung und der ersten Ausfallschritt).
    2. Zählen Sie die Anzahl der Begegnungen und Ausfallschritte während eines Kampfes.
      Hinweis: Falls gewünscht, kann man auch andere Verhaltensmuster punkten, wie Flügel Bedrohung, Boxen, Fechten, Rückzug oder die Zahl der Begegnungen, bevor die erste Ausfallschritt, zum Beispiel.
    3. Note die Zeit der Gründung der Dominanz (Zeit zwischen der ersten Begegnung, und die Zeit, wenn man fliegen Exerzitien für drei Mal in Folge von der Food Tasse Achterer empfängt Ausfallschritte). Hinweis, die fliegen, ist der Gewinner und dem der Verlierer des Kampfes.
  3. Berechnung eines "Loser" Effect
    1. Teilen Sie die Anzahl der Kämpfe, in denen vorherige Verlierer verlieren 2. Kämpfe (Losers, die zu verlieren: LL) durch die Gesamtzahl der Kämpfe, und multiplizieren Sie mit 100. Das erhaltene Prozentsatz stellt die "Verlierer" Wirkung:
      [(# Fliegt LL) / (# Gesamt Kampf)] x 100
    2. Verwenden Sie einen Chi-Quadrat-Test, um zu vergleichen, ob die "Verlierer" Effekt ist statistisch von dem Erwartungswert von 50%.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

Dieser Abschnitt stellt das Design des Verhaltenskammer und die Analyse eines typischen Satz von Verhaltensexperimenten im Anschluss an die oben genannten Mess Aggression und die Bildung einer "Verlierer" Effekt beschriebenen Protokoll. Ebenfalls dargestellt sind Proben von anderen Verhaltensweisen, die unter Verwendung dieser Vorrichtung gemessen werden kann.

Figur 6 zeigt eine schematische Darstellung der neuen Vorrichtung. Das Gerät besteht aus drei zylindrische...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

Das moderne Zeitalter der Verwendung von Drosophila mit seinen leistungsfähigen genetischer Methoden als Modellorganismus für das Studium der Aggression vor einem Dutzend Jahren begann etwa mit der Einführung der neuen experimentellen Arenen, in denen zuverlässige Kampfverhalten konnte mit einzelnen Paaren von Fliegen 1,7 erhalten werden kann, 8,17,19. Diese Arenen enthalten gewünschten Ressourcen (ein Nahrungsmittelbecher, potenziellen Partnern) und ein Raum für die Verlierer fliegt in zu...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Offenlegungen

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

Diese Forschung wurde unterstützt durch Zuschüsse aus dem National Institute of General Medical Sciences (GM099883 und GM074675) EAK Die Geldgeber hatten keine Rolle in Studiendesign, Datenerhebung und -analyse, Entscheidung zur Veröffentlichung oder Erstellung des Manuskripts unterstützt. Wir danken den Menschen aus unserer Maschinenhalle an der Harvard Medical School für den Entwurf des Verhaltensgerät (Kontakt: http://mikesmachine.com).

Autor Beiträge: ST, entworfen BC den Verhaltensgerät. ST ausgelegt und optimiert Das experimentelle Protokoll. ST und BC durchgeführt und die Versuche analysiert. ST, EAK und BC schrieb die Zeitung.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Drosophila melanogaster PuppeBloomington Stock Center
Standard Fliegenfuttereigenen Haus hergestellt. 
VerhaltenskammernMike-MaschineIm eigenen Haus gefertigt. Direkt  Kontaktieren Sie das Unternehmen für weitere Informationen.
Fläschchen aus BorosilikatglasVWR International 47729-57616 x 10 mm
CottonFisherbrand22-456-881Marke kann verwendet werden
PasteurpipettenVWR International53300-567
Pinsel Blick Art Material06157-7030Rund , Gr. 3/0
ZahnstocherN/AN/AJede Marke verwendbar
Acrylfarbe (blau/weiß)Blick Art Material01637-5172/01637-1022Jede Marke verwendbar
TrockenhefeSigmaYSC2-500G
SchraubverschlusstubeVWR Deutschland10011-394 15 mm Durchmesser, 10 mm Höhe
EppendorfVWR International 
KlebebandN/AN/AJede Marke kann verwendet werden
KunststoffscheibenElektronenmikroskopie Wissenschaft70329-4022 x 40 x 0,25 mm Dicke
Lichtquelle (Glühbirne)VWR International 500003-418Jede Marke kann verwendet werden
TimerVWR International 62344-641Jede Marke kann verwendet werden
InkubatorPercivalWenden Sie sich direkt an den Hersteller, um weitere Informationen zu erhalten.
Kohlendioxid trocken (CO2)Medizinisch-technische Gase, Inc14H31
FernglasNikonSMZ-745Jede Marke kann verwendet werden
Kamera (SONY Handycam  HDR-CX330)B& HSOHDRCX330BJede Marke kann verwendet werden
Computermit mindestens 1,4 GHz Prozessor, auf dem Microsoft Windows oder Machintosh HD
ClipWrapOnlineJede Import-Software kann verwendet werden
QuickTime PlayerOnlineJede Lesesoftware kann verwendet werden
GraphPad SoftwareOnlineBeliebige Statistik Software kann verwendet werden
Im Jede 22363212 herunterladen herunterladen

Referenzen

  1. Chen, S., Lee, A. Y., Bowens, N. M., Huber, R., Kravitz, E. A. Fighting fruit flies: a model system for the study of aggression. Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 5664-5668 (2002).
  2. Hsu, Y., Earley, R. L., Wolf, L. L. Modulation of aggressive behaviour by fighting experience: mechanisms and contest outcomes. Biol Rev Camb Philos Soc. 81, 33-74 (2006).
  3. Yurkovic, A., Wang, O., Basu, A. C., Kravitz, E. A. Learning and memory associated with aggression in Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci U S A. 103, 17519-17524 (2006).
  4. Penn, J. K., Zito, M. F., Kravitz, E. A. A single social defeat reduces aggression in a highly aggressive strain of Drosophila. Proc Natl Acad Sci U S A. 107, 12682-12686 (2010).
  5. Trannoy, S., Chowdhury, B., Kravitz, E. A. Handling alters aggression and 'loser' effect formation in Drosophila melanogaster. Learn Mem. 22, 64-68 (2015).
  6. Trannoy, S., Kravitz, E. A. Learning and memory during aggression in Drosophila: handling affects aggression and the formation of a ''loser'' effect. Journal of Nature and Science. 1 (3), e56(2015).
  7. Alekseyenko, O. V., Chan, Y. B., Li, R., Kravitz, E. A. Single dopaminergic neurons that modulate aggression in Drosophila. Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 6151-6156 (2013).
  8. Dierick, H. A., Greenspan, R. J. Serotonin and neuropeptide F have opposite modulatory effects on fly aggression. Nat Genet. 39, 678-682 (2007).
  9. Williams, M. J., et al. Regulation of aggression by obesity-linked genes TfAP-2 and Twz through octopamine signaling in Drosophila. Genetics. 196, 349-362 (2014).
  10. Chase, I. D., Bartolomeo, C., Dugatkin, L. A. Aggressive interactions and inter-contest interval: how long do winners keep winning? Anim. Behav. 48, 393-400 (1994).
  11. Goessmann, C., Hemelrijk, C., Huber, R. The formation and maintenance of crayfish hierarchies: behavioral and self-structuring properties. Behav Ecol Sociobiol. 48, 418-428 (2000).
  12. Sturtevant, A. H. Experiments on sex recognition and the problem of sexual selection in Drosophila. J Animal Behav. 5, 351-366 (1915).
  13. Jacobs, M. E. Influence of light on mating of Drosophila melanogaster. Ecology. 41, 182-188 (1960).
  14. Dow, M. A., von Schilcher, F. Aggression and mating success in Drosophila melanogaster. Nature. 254, 511-512 (1975).
  15. Hoffmann, A. A laboratory study of male territoriality in the sibling species Drosophila melanogaster and D. simulans. Anim. Behav. 35, 807-818 (1987).
  16. Vrontou, E., Nilsen, S. P., Demir, E., Kravitz, E. A., Dickson, B. J. fruitless regulates aggression and dominance in Drosophila. Nat Neurosci. 9, 1469-1471 (2006).
  17. Nilsen, S. P., Chan, Y. B., Huber, R., Kravitz, E. A. Gender-selective patterns of aggressive behavior in Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 12342-12347 (2004).
  18. Fernandez, M. P., Kravitz, E. A. Aggression and courtship in Drosophila: pheromonal communication and sex recognition. J Comp Physiol A Neuroethol Sens Neural Behav Physiol. 199, 1065-1076 (2013).
  19. Alekseyenko, O. V., et al. Single serotonergic neurons that modulate aggression in Drosophila. Current biology : CB. 24, 2700-2707 (2014).
  20. Asahina, K., et al. Tachykinin-expressing neurons control male-specific aggressive arousal in Drosophila. Cell. 156, 221-235 (2014).
  21. Andrews, J. C., et al. Octopamine neuromodulation regulates Gr32a-linked aggression and courtship pathways in Drosophila males. PLoS genetics. 10, e1004356(2014).
  22. Zwarts, L., et al. Complex genetic architecture of Drosophila aggressive behavior. Proc Natl Acad Sci U S A. 108, 17070-17075 (2011).
  23. Dierick, H. A. A method for quantifying aggression in male Drosophila melanogaster. Nat Protoc. 2, 2712-2718 (2007).
  24. Wang, L., et al. Hierarchical chemosensory regulation of male-male social interactions in Drosophila. Nat Neurosci. 14, 757-762 (2011).
  25. Davis, S. M., Thomas, A. L., Nomie, K. J., Huang, L., Dierick, H. A. Tailless and Atrophin control Drosophila aggression by regulating neuropeptide signalling in the pars intercerebralis. Nat Commun. 5, 3177(2014).
  26. Yuan, Q., Song, Y., Yang, C. H., Jan, L. Y., Jan, Y. N. Female contact modulates male aggression via a sexually dimorphic GABAergic circuit in Drosophila. Nat Neurosci. 17, 81-88 (2014).
  27. Perron, J. M., Huot, L., Corrivault, G. W., Chawla, S. S. Effects of carbon dioxide anaesthesia on Drosophila melanogaster. J Insect Physiol. 18, 1869-1874 (1972).
  28. Joachim, D., Curtsinger, J. W. Genotype and anesthetic determine mate choice in Drosophila melanogaster. Behav Genet. 20, 73-79 (1990).
  29. Barron, A. B. Anaesthetising Drosophila for behavioural studies. J Insect Physiol. 46, 439-442 (2000).
  30. Greenspan, R. J. Fly Pushing: The theory and Practice of Drosophila Genetics. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring Harbor. (1997).
  31. Cabral, L. G., Foley, B. R., Nuzhdin, S. V. Does sex trade with violence among genotypes in Drosophila melanogaster? PLoS One. 3 (4), e1986(2008).

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Schlagwörter

Drosophila AggressionVerhaltenskammernegative GeotaxisEliminierung der FliegenhandhabungVorbereitung von Isolierfl schchenVerwendung von KunststoffteilerVideoaufzeichnungsanalyseAusbildung von Dominanzverh ltnissenUntersuchung des Sozialverhaltens
Ein neuer Ansatz, die Handhabung für ein Studium Aggression Eliminiert und die "Loser" Effect in
Kontakt
Rückmeldung an Ihre Bibliothek

Datenschutz

Nutzungsbedingungen

Richtlinien

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle Rechte vorbehalten.