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1. Überlegen Sie sich eine Sampling Matrix systematische und umfassende Beprobung Lysimeter zur Gewährleistung
- Teilen Sie Lysimeter in Voxel mit fester Länge, Breite und Tiefe.
- Verwenden Sie einen euklidischen Raum-Koordinatensystem und teilen sich die Gesamtstrecke entlang jeder Richtung (X, Y und Z) in einer ausreichenden Anzahl von gleichmäßigen Abständen. Betrachten wir die Erde in der Nähe der Mauern der Lysimeter verwirft Randeffekte zu vermeiden.
HINWEIS: Ein Puffer von 5 cm entlang der vier Wände ist in diesem Experiment angenommen Randeffekte zu vermeiden, während sichergestellt wird, dass das Bodenvolumen gesammelt ausreicht. - Jede Probe eine eindeutige XYZ Position zuweisen und als Voxel zu identifizieren.
HINWEIS: In dieser Ausschachtung, X die Position entlang der Breite der Steigung, bezeichnet Y Stelle entlang der Länge der Steigung, während Z Position entlang der Tiefe der Steigung bezeichnet. Die Größe der Intervalle innerhalb jeder Dimension bestimmt die Breite, Länge und Tiefe der Voxel. Fild 2 zeigt die Aufteilung des lysimeter nach Intervallen Abstand zusammen mit dem gewählten Ursprung für die XYZ - System zu bestimmen. Die Unterteilung in der aktuellen Grabungsschema hat 9 Abständen entlang der beiden Y und Z - Richtung und 4 Abständen entlang der X - Richtung, die insgesamt 324 Voxeln von 10 cm x 20 cm x 10 cm Abmessungen (Figur 3) zu erzeugen.
HINWEIS: Die Stichprobenstrategie gewählt wird sichergestellt, daß das gesamte System gleichmäßig mit minimaler Beschädigung der Sensoren abgetastet wird. Grenzen jedes Voxel (1-2 cm) werden verworfen aus dem benachbarten Voxel Kreuzkontamination zu begrenzen. Zusätzlich sorgen Voxeldimensionen dass genügend Bodenmaterial für die mikrobiologische verfügbar ist, geochemischen und hydrologische Probensammlung in jedem Voxel.

Abbildung 1. Seitenansicht Lysimeter. Mit Blick auf Lysimeter aus der Versickerung face. Ebenfalls sichtbar sind drei Sensorbereiche (weiße PVC-Rohre) entlang der Neigung und Sprinkleranlage an den vier Ecken.

Abbildung 2. Stichprobenplan. Probenahmeschema Lysimeter entlang XYZ. A. Die X - Dimension teilt die Breite in 4 Abschnitte zu je 10 cm , während Y die Länge in 20 cm. B. Die Z - Dimension gibt an Tiefe und wurde aufgeteilt in neun Schichten unterteilt von 10 cm Tiefe. Eine Grenze von 5 cm entlang den Rändern der Lysimeter identifiziert wurde Entnahme von Proben zu verhindern , die möglicherweise Grenze Wirkung zeigen können. Bitte klicken Sie hier , um diese Datei herunterzuladen.

Abbildung 3. Drei-Dimensional Darstellung eines Voxel. Visuelle Schema eines Voxel entlang der XYZ - Ebene des Lysimeter. Der gesamte Hang wurde in 324 solcher Voxel aufgeteilt, wobei jedes Voxel eine einzige Abtasteinheit zeigt. Bitte hier klicken , um diese Datei herunterzuladen.
2. Fügen Sie Brilliant Blue FCF Dye to Track Wasserinfiltrations im Slope
- Bewerben strahlend blauen Farbstoff an der Oberfläche des Bodens, genug Top-105 cm von der Oberfläche entlang der Y-Richtung zu decken. Decken Sie die restlichen Boden mit Kunststoffplatten.
- Wählen Sie eine Konzentration (hier 10 g / L) Kontrast gegen schwarzen basaltischen Boden zu gewährleisten. Fügen Sie den Farbstoff zu Bewässerungstanks und verdünnt mit Wasser auf die gewünschte Konzentration.
- Entscheiden, die Dauer der Spülung auf Basis der gewünschten Tiefe der Infiltrationsfront und die Rate durch das Bewässerungssystem versorgt.
HINWEIS: Für diese Studie ein irrigation Rate von 30 mm / h für 20 min (4) vor der Grabung wird als ausreichend erachtet , um heterogene Muster der Wasserinfiltration in den ersten wenigen Zentimetern zu identifizieren. - Nach dem Farbauftrag, geben Zeit für die Infiltration zu stoppen und die Feuchtigkeitszuständen im Lysimeter äquilibrieren. Für diese Studie ist ein Zeitraum von 10 Stunden (über Nacht) zwischen Farbstoff Anwendung und Aushub war angemessen.
3. Abgrenzung von Voxel
- Befestigen entlang der Länge des Gefälles Maßband einen in-situ Referenzsystem für die Führung während Abgrenzung von Voxeln zu liefern.
- Markieren Sie die Dimension eines jeden Bodens Voxel mit Hilfe des Maßbandes. Zeichne Gitterlinien für jede Schicht unter Verwendung von Aluminium-blade Abschirmungen und Kunststoff Spachtel (Abbildung 4). Entsorgen Sie die Grenze Materialien (5 cm von jeder Wand Randeffekte zu vermeiden).
Abbildung 4. Draufsicht auf Lysimeter. Diese Ansicht zeigt die gefärbte Oberfläche der Schicht 2 (10 cm tief). Gitter auf der Bodenoberfläche gezogen Probenahme zu unterstützen sind ebenfalls sichtbar, zusammen mit Kernlöchern Regionen in jedem Voxel nach der mikrobiologischen Probensammlung.
4. Mikrobiologie Probenentnahme
- Sammeln Sie Mikrobiologie Proben aseptisch aus jedem Voxel vor der hydrologischen und geochemischen Analysen Kreuzkontamination von Proben zu verhindern. Stellen Sie sicher, dass die neuen Handschuhe von allen Mitgliedern der Baugrube Durchführung getragen werden Verunreinigungen durch menschliche Haut zu reduzieren.
- Verwenden Sie einen Bodengreifer von 1 cm Durchmesser und 20 cm Höhe und einem dünnen Spachtel für die mikrobiologische Probenentnahme. Reinigen Sie den Ausstecher und den Spatel mit destilliertem Wasser, trocknen Sie sie mit sauberen Tüchern, und spülen mit 75% Ethanol mit einer Sprühflasche. Lassen Sie corer und Spachtel an der Luft trocknen.
- Beachten Sie die collection Zeit jeder Probe. Verwenden Entkerner zum Kern zu einer Tiefe von 10 cm in jedem Voxel Ort und dem Spatel der Bodenprobe in vorsterilisierten Kunststoffbeutel (Abbildung 5) zu entleeren. Achten Sie darauf, den Beutel unmittelbar vor dem Aufbringen der Probe zu öffnen. Homogenisieren der Probenbeutel mit der Hand.
- Bewahren Sie die Probenbeutel in einem Eis-Kühler während der Probenahme, und so rasch wie möglich an der -80 ° C Gefrierschrank.

Abbildung 5. Mikrobiologie Probensammlung. Eine kleine Handheld - Ausstecher von 20 cm x 1 cm, sterile Beutel und Spachtel wird hier gezeigt bei mikrobiologischen Probenahme. Bitte hier klicken , um diese Datei herunterzuladen.
5. Geochemie und Hydrologie Probenentnahme
- Fotografisches gefärbte Bereiche in X und Y planes während des Aushubs für Tiefen, in denen der Farbstoff beobachtet wird. Verwenden Sie eine Farbkarte Referenz für die Farbe beobachtet (Abbildung 6) zu liefern. Stellen Sie sicher, die richtige natürliche Beleuchtung vorhanden ist, um richtig Farbintensität zu dokumentieren.
- Kalibrieren Sie tragbare Röntgenfluoreszenz-Spektrometer (pXRF) täglich vor den Messungen beginnen. Für die Kalibrierung und Messung Einzelheiten finden Sie den Anweisungen des Herstellers 13 (Abbildung 7). Kurz gesagt, stellen Sie das Gerät auf den Halter und direkt in die Fabrik Metallperle des Strahlfenster zeigen. Wählen Sie 'Cal' und 30 Sekunden warten die Kalibrierung abgeschlossen werden kann.
- Reinigen Sie das Strahlfenster vor jeder Messung. Messen Sie die Oberfläche jedes Voxel in dreifacher Ausführung an drei verschiedenen Stellen. Legen Sie das pXRF Instrument auf der Bodenoberfläche und warten 90 Sekunden die Messung zu ermöglichen, abgeschlossen sein.
HINWEIS: X-ray kann in der Richtung des Strahls eine große Entfernung durchdringen. Daher ensuerneut, dass nur geschultes Personal das Gerät behandelt und geeignete Sicherheitsprotokolle unterhält.

Abbildung 6. Farbkarte zu folgen Infiltration färben. Jeder Ort mit sichtbaren Farbstoffpenetration wurde mit einer Farbkarte fotografiert , als Referenz dient. Bitte klicken Sie hier , um diese Datei herunterzuladen.

Abbildung 7. tragbare Röntgenfluoreszenz - Spektrometer. Hand pXRF positioniert auf der Oberfläche eines Voxel. Messungen wurden an drei verschiedenen Stellen auf der Oberfläche jedes Voxels aufgezeichnet und dann gemittelt.
- Saubere metallischen Kerne (height = 3 cm, Durchm. = 5,7 cm) und Polycarbonat cores (height = 6 cm, Durchm. = 5,7 cm) für Schüttdichten (BD) und hydraulische Leitfähigkeitsmessungen (Ksat) des gewünschten Voxel, bzw. (Abbildung 8).
- Vertically Metallkerne und Polycarbonat-Kerne (vertikale Ksat) in die gewünschte Voxel die Pflege Stecken Sie keine Sensoren oder Sensorkabel zu beschädigen. Tun Sie dies, indem Sie vorsichtig die Kerne in den Boden hämmern, dabei eine ebene Fläche wie Holzblock zwischen dem Kern und dem Hammer zu verwenden, um zu minimieren Störungen auf den Boden. Zusätzlich, wenn der Kern zur Hälfte in den Boden ist, einen zweiten Kern auf dem ersten Kern schalten. Platzieren Sie den Holzblock auf der Oberseite des zweiten Kerns und Hammer vorsichtig den Block, bis der erste Kern im Boden mit dem Kernrand eingebettet ist noch sichtbar.
- Legen Sie Kerne für horizontale Ksat als die Seitenfläche des Voxel mit sequentieller Ausgrabung eröffnet. Verwenden Sie den Holzblock und der zweite Kern als 5,4 in Schritt erwähnt Verdichtung zu minimieren.
- Achten Sie darauf, dass das Voxel, um sicherzustellen,wird abgetastet wird von Grenzen und den benachbarten Voxel vor geochemische Probenentnahme isoliert. Verwenden Sie Kunststoff - Spachtel für diesen Zweck, gefolgt von Hand Kellen Bodenproben um Metall oder Polypropylen Kerne in markierte geochemischen (GC) Probenbeutel zu sammeln , bis Kerne leicht entfernt werden können ( zum Beispiel 9a, b).

Abbildung 8. Die Schüttdichte und hydraulische Leitfähigkeit Kerne. Polypropylen Kerne (links) wurden für das Sammeln von vertikalen und horizontalen hydraulischen Leitfähigkeit Proben verwendet , während Metallkerne (rechts) zum Sammeln von Schüttdichte Proben verwendet wurden.

Abbildung 9. Voxel Abgrenzung. Kunststoff - Spachtel wurden (A) isolierenVoxel Grenzen vor (B) geochemische, Schüttdichte und hydraulische Leitfähigkeit Kernsammlung. Bitte hier klicken , um diese Datei herunterzuladen.
- Entfernen Sie den metallischen Kern, abbürsten überschüssige Material von den beiden Enden, und übertragen Probe von Kern zu einem markierten BD Probenbeutel. Wiegen Sie jede Probenbeutel mit Probe und notieren Sie die Gesamtgewicht.
- Entfernen Sie die Polypropylen-Kerne. Decken Sie beide Seiten mit roten Kunststoffkappen und beschriften vertikale Polypropylen-Kern als "V" und die horizontale Polypropylen-Kern als "H", gefolgt von der Proben-ID.
- Sammeln verbleibende Material aus dem Voxel in den GC-Probenbeutel, hinter ein paar Zentimeter Boden an allen vier Seiten verlassen Kreuzkontamination mit dem nächsten Voxel zu verhindern.
- Wiederholen von Schritten von 5,1 bis 5,9 für den Rest der Voxel in einer Schicht.
- Sobald alle Voxel von einer Schicht gewesenabgeschlossen ist, wiederholen Sie die Schritte 3,2-5,10 für die nachfolgende Schicht.
HINWEIS: Schritt 5.1 muss nur für die Voxel durchgeführt werden, die sichtbaren Farbstoff haben. Siehe Abbildung 10 sichtbar zu machen repräsentatives Diagramm eines Voxel markieren alle Proben von jedem Voxel gesammelt.

Abbildung 10. Repräsentative Voxel. Die rote gestrichelte Linie Kern für die Mikrobiologie Probe gesammelt zeigt an , die grüne gestrichelte Linie Kern horizontal hydraulische Leitfähigkeit zeigt, die gelbe gestrichelte Linie vertikale hydraulische Leitfähigkeit Kern zeigt, der lila gestrichelt zeigt Schüttdichte Kern, und das blaue Oval Grenze gibt an, von dem Voxel verbleibende Probe für geochemische Analyse verwendet werden. Bitte hier klicken , um diese Datei herunterzuladen.
6. Probenanalyse
- Verwenden Proben für mikrobiologische Analysen gesammelt für die molekulare (Boden mikrobielle DNA - Extraktion) 14 und kultiviert (heterotrophe Plattenzählungen) 15 Analysen. Verwenden Sie extrahierten DNA für quantitative Polymerase - Kettenreaktionen (qPCR) 16 und Hochdurchsatz - Gen - Sequenzierung Experimente 17,18.
- Anwendungsbeispiele für geochemische gesammelt analysiert eine Vielzahl von geochemischen Eigenschaften zu messen , einschließlich pH - Wert (US - EPA - Methode 150.2), elektrische Leitfähigkeit (EC) (US - EPA - Methode 120.1), Kohlenstoff und Stickstoffgehalt (US - EPA - Methode 415.3, sequentielle Extraktion von Elementen 19, und Röntgenbeugung (XRD) und erweiterte Röntgenabsorptionsfeinstruktur (EXAFS) Spektroskopie als pro Spezifikationen der Stanford Synchrotron Radiation Laboratory, an Mineral Transformationen untersuchen.
- Verwenden Kernproben für hydrologische Analysen für Laborexperimente gesammelt, wie Schüttdichte 20und hydraulische Leitfähigkeit 21.