Dieses Protokoll / Manuskript beschreibt einen optimierten Prozess für die Herstellung von Sporopollenin exine Kapseln (SECs) von Keulen-Bärlapp - Sporen und für die Beladung von hydrophilen Verbindungen in diese SECs.
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Methodenartikel
Dieses Protokoll / Manuskript beschreibt einen optimierten Prozess für die Herstellung von Sporopollenin exine Kapseln (SECs) von Keulen-Bärlapp - Sporen und für die Beladung von hydrophilen Verbindungen in diese SECs.
Mikrokapseln, die aus pflanzlicher Basis Sporen oder Pollen bieten eine robuste Plattform für ein breites Spektrum von Mikroverkapselung Anwendungen. Sporopollenin exine Kapseln (SECs) erhält, wenn Sporen und Pollen verarbeitet werden, um die interne sporoplasmic Inhalte zu entfernen. Die resultierenden hohlen Mikrokapseln mit einem hohen Grad an Micromeritic Einheitlichkeit aufweisen und komplizierte mikrostrukturellen Eigenschaften auf die besonderen Pflanzenarten im Zusammenhang behalten. Hier zeigen wir einen optimierten Prozess für die Herstellung von SECs von Keulen-Bärlapp - Sporen und für die Beladung von hydrophilen Verbindungen in diese SECs. Die aktuelle SEC Isolierungsverfahren wurde in SEC Isolations kürzlich optimiert, um signifikant die Verarbeitungsanforderungen zu reduzieren, die konventionell verwendet werden, und die Produktion von intakten Mikrokapseln zu gewährleisten. Natürliche L. clavatum Sporen werden mit Aceton entfettet, mit Phosphorsäure behandelt und extensiv sporoplasmi zu entfernen gewaschenc Inhalt. Nach Aceton Entfettung, alle sporoplasmic einen einzigen Schritt Verarbeitung 85% unter Verwendung von Phosphorsäure gezeigt Inhalte zu entfernen ist. Durch die Begrenzung der Säurebearbeitungszeit auf 30 Stunden, ist es möglich, saubere SECs zu isolieren und SEC Fracturing vermeiden, die gezeigt worden ist, mit einer verlängerten Verarbeitungszeit auftreten. Ausgiebiges Waschen mit Wasser, verdünnte Säuren, verdünnte Basen und Lösungsmittel sichergestellt, dass alle sporoplasmic Material und chemische Rückstände ausreichend entfernt werden. Die Vakuumbeladungstechnik wird verwendet, um ein Modellprotein (Rinderserumalbumin) als repräsentative hydrophile Verbindung zu laden. Vakuumbelastung stellt eine einfache Technik verschiedene Verbindungen ohne die Notwendigkeit einer scharfen Lösungsmittel oder unerwünschte Chemikalien zu laden, die oft in anderen Mikroverkapselung Protokolle erforderlich sind. Auf der Grundlage dieser Isolation und Belastungsprotokollen bieten SECs ein vielversprechendes Material für den Einsatz in einem breiten Spektrum von Mikroverkapselung-Anwendungen, wie Therapeutika, Lebensmittel, Kosmetika und Körperpflege proddukten.
Es gibt großes Interesse an natürlichen Pflanzenbasis Kapseln aus Pflanzensporen und Pollen für die Verwendung in der Mikroverkapselung Anwendungen erhalten. 1-15 In der Natur, Sporen und Pollen Schutz für empfindliche genetische Materialien gegen raue Umgebungsbedingungen. Die Grundstruktur der Pflanzensporen und Pollen umfasst typischerweise eine äußere Hüllschicht (exine), eine innere Mantelschicht (intine) und die interne zytoplasmatische Material. Die exine besteht aus einem chemisch robust Biopolymer 1,9,10,13,16 bezeichnet als Sporopollenin und die intine besteht hauptsächlich aus cellulosischen Materialien besteht. 16-18 leere....
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1. Extraktion von Sporopollenin Exine Kapseln (SECs) von L. clavatum Spores
Hinweis: Der Extraktionsprozess SEC beinhaltet ein entflammbares Pulver (L. clavatum), heiße ätzende Säuren und brennbare Lösungsmittel, also richtige persönliche Schutzausrüstung (Schutzbrille, Gesichtsmaske, Handschuhe, Kittel) genehmigte Risikobewertung auf Nutzung und Entsorgung Chemikalien von autorisiertem Laborpersonal ist von wesentlicher Bedeutung.
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Schlanke Extraktionsverfahren für Sporopollenin Exine Kapseln
Die L. clavatum SEC Extraktion wurde durch drei Hauptschritte erzielt: (1) Entfettung mit Aceton; (2) Acidolyse mit Phosphorsäure 85% (v / v); und (3) Umfangreiche SEC Waschen unter Verwendung von Lösungsmitteln. Die Strömung des rationalisierte SEC Extraktionsprozess in Abbildung 1 A dargestellt wird . - Ich
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In dieser Arbeit wird eine systematische Analyse der SEC - Extraktion aus L. clavatum Sporen präsentiert und dieser Bericht zeigt , dass es möglich ist , eine höhere Qualität Kapseln zu produzieren , während auch eine deutliche Straffung der vorbestehenden häufigsten verwendete Protokoll zu erreichen. 11 Im Gegensatz zu dem bestehenden Protokoll eine hohe Prozesstemperatur erforderlich ist (180 ° C) und eine lange Prozessdauer (7 Tage), 11 die aktuelle Optimierungs wurde SEC - Extraktionsv.......
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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Diese Arbeit wurde von der National Research Foundation (NRF-NRFF2011-01) und dem National Medical Research Council (NMRC/CBRG/0005/2012) unterstützt.
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Lycopodium clavatum Sporen (s-Typ) | Sigma | 19108-500G-F | |
| Rinderserumalbumin | Sigma | A2153-50G | |
| FITC-konjugiert BSA | Sigma | A9771-250MG | |
| Phosphorsäure (85% w/v) | Sigma | 438081-2,5L | |
| Salzsäure | Sigma | V800202 | |
| Natriumhydroxid | Sigma | S5881-1KG | |
| Aceton | Sigma | V800022 | |
| Ethanol | AcME | ||
| Deionisiertes Wasser | Millipore gereinigtes Wasser | ||
| Qualitatives Filterpapier (Sorte Nr. 1, Baumwollzellulose) | |||
| Mikrokügelchen aus Polystyrol (50 ± 1 & micro; m) | Thermowissenschaftlich (CA, USA) | 4250A | |
| Vectashield | Vector labs (CA, USA) | H-1000 | |
| Sticky-Dias, D 263 M Schott Glas, Nr.1.5H (170 μ m, 25 mm x 75 mm) unsteriler Objektträger | Ibidi GmbH (München, Deutschland) | 10812 | |
| Commercial Lycopodium SECs (L-Typ) | Polysciences, Inc. (PA, USA) | 16867-1 | |
| Heizplatten | IKA, Deutschland | ||
| Rasterelektronenmikroskop | Jeol, Japan | JFC-1600 | |
| Elementar-Analysator | Elementar, Deutschland | VarioEL III | |
| FlowCam: Das Tischsystem | Fluid Imaging Technologies, USA | FlowCamVS | |
| Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop | Carl Zeiss, Deutschland | LSM710 | |
| Gefriertrockner | Labconco, USA | ||
| UV-Spektrometer | Boeco, Deutschland | S220 |
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