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Methodenartikel

Die Bestätigung der myokardialen Ischämie und Reperfusion Injury in Mäusen Oberflächen Pad Elektrokardiographie

13.2K Aufrufe

DOI:

10.3791/54814

24. November 2016

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Während der murinen myokardialen Ischämie/Reperfusionsoperation wird die korrekte Platzierung der okkludierenden Ligatur typischerweise durch sichtbare Beobachtung der Myokardblässe bestätigt. Hierin wird ein Verfahren zur elektrokardiographischen Bestätigung von Ischämie und Reperfusion zur Ergänzung der beobachteten Myokardblässe an männlichen C57Bl/6-Mäusen demonstriert.

Zusammenfassung

Viele Tiermodelle wurden für die Untersuchung des myokardialen Umbaus und der Herzinsuffizienz etabliert, da es weltweit die häufigste Todesursache ist. Beim Menschen bildet sich ein pathologischer Verschluss in einer Koronararterie, und eine Reperfusion dieser verschlossenen Arterie wird als wesentlich angesehen, um die Lebensfähigkeit des gefährdeten Myokards aufrechtzuerhalten. Obwohl die Reperfusion des ischämischen Myokards für die Wiederherstellung des Myokards unerlässlich ist, führt sie zu einer eigenen Gewebeverletzung. Das physiologische Ansprechen und die Heilung einer Ischämie/Reperfusionsverletzung unterscheidet sich von einer chronischen Okklusionsverletzung. Die myokardiale Ischämie/Reperfusionsverletzung wird zunehmend als klinisch relevantes Modell für Myokardinfarktstudien anerkannt. Aus diesem Grund sind parallele Tiermodelle der Ischämie/Reperfusion von entscheidender Bedeutung, um die Wissensbasis über Myokardschäden zu erweitern. Typischerweise wird eine Ischämie des Mausherzens nach einem Verschluss der linken anterior absteigenden Koronararterie (LAD) durch eine sichtbare Blässe des Myokards unterhalb der Okklusion (Ligatur) bestätigt. Dies bietet jedoch nur eine subjektive Möglichkeit, die korrekte oder konsistente Platzierung der Ligatur zu bestätigen, da es mehrere große Arterien gibt, die in verschiedenen Myokardregionen Blässe verursachen können. Eine Methode zur Aufzeichnung elektrokardiographischer Veränderungen zur Beurteilung der korrekten Ligaturplatzierung und der daraus resultierenden Ischämie sowie der Reperfusion zur Ergänzung der beobachteten Myokardblässe würde dazu beitragen, konsistente Infarktgrößen in Mausmodellen zu erzielen. Dies würde wiederum dazu beitragen, die Anzahl der verwendeten Mäuse zu verringern. Darüber hinaus können elektrokardiographische Veränderungen auch nach der Operation weiterhin nicht-invasiv und zeitabhängig erfasst werden. In diesem Artikel wird eine Methode zur elektrokardiographischen Bestätigung von Myokardischämie und Reperfusion in Echtzeit vorgestellt.

Einleitung

Herzkrankheit bleibt die führende Todesursache weltweit 1,2. Nicht nur ist der linke Ventrikel (LV) die kräftigste Kammer, verantwortlich für das Blut vom Herzen zu den gesamten Körper pumpt 3, es ist eine gemeinsame Herzverletzungsstelle nach einem Myokardinfarkt 4. Die linksventrikuläre Absterben von Gewebe führt oft zu systolischen Herzinsuffizienz. Tiermodelle von Herzkrankheiten sind unerlässlich für die Förderung der biomedizinischen Forschung kardiovaskulär. Die C57Bl / 6-Stamm von Mäusen eine beliebte Wahl für Tiermodellen haben aufgrund ihrer schnellen Brutzeit, geringe Kosten und Leichtigkeit in genetischen Veränderungen. Di....

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Protokoll

Alle chirurgischen Eingriffe an Tieren durchgeführt , sollte mit Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren 13 oder einer anderen geeigneten ethischen Richtlinien entsprechend durchgeführt werden. Protokolle sollten von der Tierschutzausschusses bei der entsprechenden Institution, bevor Sie fortfahren genehmigt werden.

1. Vorbereitung für die EKG

HINWEIS: Bevor Sie beginnen, don persönliche Schutzausrüstung einschließlich der Handschuhe, Brillen und einem sauberen Laborkittel oder Einweg-Kleid.

  1. Reinigen Sie die EKG-Pad mit einem Nicht-Alkohol und nicht-Bleich basierte Dekonta....

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Ergebnisse

Eine normale Maus - ECG ist in Figur 2 mit alphabetischen Markierungen für elektrische Ereignisse P, Q, R, S, J und T. P angezeigt ist die anfängliche Vorhofdepolarisation. QRS ist die Welle der Depolarisation über den Ventrikeln. J ist eine frühe Repolarisation und T heterogenen Repolarisation stellt auch als Recovery - 11 bekannt. Es ist zu beachten , dass viele Labors verwenden Sie nicht die J-Welle Nomenklatur und stattdessen beziehen sich auf die SJT-Segm.......

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Diskussion

Mit EKG-Veränderungen als eine ergänzende Methode für myokardiale Ischämie und Reperfusion bestätigt die genaue Platzierung des verdeck Ligatur gewährleistet. Die Genauigkeit der Ligatur Platzierung ist entscheidend für die Datenvariabilität unter den Tieren zu reduzieren. Die LAD in einem Maus-Herz ist eine schwierige Arterie zu visualisieren. Daher kann mit Veränderungen im Elektrokardiogramm visuelle Blässe Ergänzung wird dazu beitragen, die korrekte Platzierung der Ligatur und daraus resultierende Gewebeschäden gewä.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde durch Merit Review Awards (BX002332 und BX000640) vom Biomedical Laboratory Research and Development Service des Veterans Affairs Office of Research and Development, National Institutes of Health (R15HL129140) und Mittel aus dem Institutional Research and Improvement Account unterstützt. Das Projekt wird teilweise durch das Stipendium der National Institutes of Health C06RR0306551 unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Vevo 1100Fujifilm
Visual Sonics
Echokardiographie-Gerät
Maus-HandhabungsplatteFujifilm
Visual Sonics Beheizte
EKG-Platte
Signa-GelHochleitfähiges
Multi-Elektroden-GelParker15-25Purpose Elektrolyt
Transpore Medical Tape3M1527-0
PI-Spray IIPharmaceutical InnovationsNDC 36-2013-25Reinigungsmittel für EKG-Platte
C57Bl6 MäuseThe Jackson Laboratory000664Männlich, 8 - 12 Wochen
IsoThesia-IsofluranHenry ScheinNDC 1169-0500-1
ExcelMicrosoft
Systane Nachtschmiermittel AugensalbeAlcon65050935
7-0 Perma-Hand SeidennähteEthicon640.O32
5-0 Perma-Hand SeidennähteEthiconK809. O32
Chirurgische SchereROBOZRS-5881
PinzetteFine Science Tools11052-10
GauzeBio Nuclear Diagnostics IncDIS-022B
NadelhalterFine Science Tools12565-14
Buprenex CIII Patterson Veterinary0-891-9756Buprenorphinhydrochlorid Analgetikum 
BetadinePurdue Products67618-150-08
NairChurch und Dwight Co.NRSL-22339-05

Referenzen

  1. Kochanek, K. D., Murphy, S. L., Xu, J. Deaths: Final Data for 2011. Natl Vital Stat Rep. 63 (3), 1-120 (2015).
  2. World Health Organization. The 10 leading causes of death in the world. , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2012).
  3. Klabunde, R. E. Cardiovascular Physiology Concepts 2edn. , Wolters....

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Myokardiale Isch mie ReperfusionHerzoperation bei M usenVerschluss des Ramus descendens anteriorEKG WellenformanalyseBest tigung der Isch mie ReperfusionEKG berwachung in EchtzeitMausmodell f r InfarktLigatur der Koronararterieelektrokardiographische Ver nderungen