Messen und Ändern von Mating Antrieb in Male<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Zusammenfassung

Dieser Artikel beschreibt einen Verhaltenstest , die männliche Paarungs Laufwerk verwendet in Drosophila melanogaste r Motivation zu studieren. Mit dieser Methode können die Forscher fortgeschrittene Fliegenneurogenetischen Techniken verwenden, um die genetischen, molekularen aufzudecken und zellulären Mechanismen, die diese Motivation zu Grunde liegen.

Zusammenfassung

Trotz jahrzehntelanger Forschung, bleiben die neuronalen und molekularen Grundlagen der motivierenden Staaten mysteriös. Wir haben vor kurzem eine neue, reduktionistische und skalierbares System für eingehende Untersuchung der Motivation zur Aufnahme der Antriebs der männlichen Drosophila melanogaster (Drosophila) verwenden, werden die Methoden , für die hier Detail , das wir. Das Verhaltensparadigma Zentren auf der Erkenntnis, dass männliche Gegenplatte neben Fruchtbarkeit im Laufe von wiederholten Paarungen ab und erholt sich über ~ 3 d. In diesem System konvergieren die mächtigen neurogenetische Werkzeuge zur Verfügung, in der Fliege mit dem genetischen Zugänglichkeit und vermeintlichen für das Sexualverhalten zur Verfügung Schaltplan. Diese Konvergenz ermöglicht eine schnelle Isolierung und Befragung von kleinen neuronalen Populationen mit spezifischen Motivations Funktionen. Hier stellen wir ausführlich die Planung und Ausführung des Sättigungs Assay, der verwendet wird, zu messen und Balz Motivation in der männlichen Fliege verändern. Mit dieserTest zeigen wir auch, dass niedrige männliche Paarungs Antrieb durch die Stimulierung dopaminergen Neuronen überwunden werden können. Der Sättigungs Test ist einfach, kostengünstig und robust gegenüber Einflüssen von genetischen Hintergrund. Wir erwarten, dass das Sättigungs Test viele neue Einblicke in die Neurobiologie der Motivationszustände zu erzeugen.

Einleitung

Die Arbeit in Drosophila hat tief und Pionier Einblick in viele biologische Phänomene zur Verfügung gestellt, einschließlich der Art des Gens ^1, Prinzipien der Embryonalentwicklung ^2, zirkadianen Rhythmen ³ und die Entwicklung und die Verdrahtung des Nervensystems ^{4, 5, 6.} Motivation bleibt weit weniger gut als diese Phänomene zu verstehen, vielleicht wegen der Einschränkungen auf den Systemen, die bisher untersucht wurden. Motivation in der Fliege wird im Rahmen des Hungers in erster Linie unte....

Protokoll

Hinweis: Dieses Protokoll beschreibt die Herstellung (§§ 1 - 3), Durchführung (Abschnitt 4) und Analyse (Abschnitt 4) von 2-D-Sättigung-Assays. Dann dopaminerge Stimulation als Beispiel, Abschnitt 5 zeigt, wie thermogene Stimulation zu kombinieren mit 2-D-Sättigungsassays hypersexuality zu induzieren. Abschnitt 6 beschreibt drei Möglichkeiten, um die Ergebnisse der 2-D-Sättigungstests zu verifizieren. Schließlich Abschnitt 7 zeigt, wie die Erholung der Paarung Antrieb in männlichen Fliegen zu messen.

1. Die Herstellung von 8- und 32-Kammer Behavioral Arenas

HINWEIS: Jede Verhaltens Arena besteht aus mehreren Sch....

Ergebnisse

Zur Charakterisierung Drosophila Gegen - Antrieb, 3 Tage alten, WT Canton-S Männer wurden in einem 2-D - Sättigungstest getestet. Im Laufe des Tests (4,5 h), Männchen im Durchschnitt 4,8 ± 0,3 paaren (Mittelwert ± Standardabweichung vom Mittelwert, SEM) Zeiten. Paarungen initiieren meist in den ersten 2 h (78%) (6A, 6B) und weniger häufig , wie der Test fortschreitet (6A, 6B). Dieser Rückgang ist auf den Mangel an passenden Partner nicht durch (.......

Diskussion

Motivation Zustände können gesättigt, aufrechterhalten werden und erholte ^34. Wir stellen eine 2-D Sättigungs Assay, schnell und robust all dieser Aspekte der Paarung Antrieb im fly misst. Dieser Assay eröffnet die Möglichkeit, fortgeschrittene fly genetische Manipulationen der Verwendung der molekularen und Schaltungskomponenten eines motivierten Verhalten zu untersuchen.

Der Sättigungs Assay beruht auf der Fähigkeit des männlichen erfolgreich vor Gericht und kopulie.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
1/16 Zoll klares Acryl	McMaster-Carr	8589K12	Wird zur Herstellung von Arenen verwendet; siehe Zusatzmaterial 1 für Designs.
1/8 Zoll klares Acryl	McMaster-Carr	8589K42	Wird zur Herstellung von Arenen verwendet; siehe Zusatzmaterial 1 für Designs.
3/16 Zoll klares Acryl	McMaster-Carr	8560K219	Wird zur Herstellung von Arenen verwendet; siehe Zusatzmaterial 1 für Designs.
1/32 Zoll schwarzer Delrin	McMaster-Carr	8575K132	Wird zur Herstellung von Arenen verwendet; siehe Zusatzmaterial 1 für Designs.
Sechskantschrauben, 1 Zoll lang (50x)	McMaster-Carr	92314A115	Wird verwendet, um Arenen zu bauen. Kann durch 3/4-Zoll-Schrauben (92314A113, McMaster-Carr) für 32-Kammer-Arenen ersetzt werden.
Rändelmuttern (25x)	McMaster-Carr	92741A100	Wird zur Herstellung von Arenen verwendet. Kann durch normale Sechskantmuttern (90480A005, McMaster-Carr) ersetzt werden.
Camcorder	Canon	Vixia HF R700	Kann durch jeden Consumer-Comcorder ersetzt werden.