Methodenartikel

Die Skalierung von Engineered Gefäßprothesen Mit 3D-gedruckte Führer und den Ring Stapelverfahren

DOI:

10.3791/55322

27. März 2017

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Skalierbare engineered Blutgefäße würde klinische Anwendbarkeit zu verbessern. Mit leicht ansehnliche 3D-gedruckte Führer, Ringe der glatten Gefäßmuskulatur wurden in eine röhrenförmige Form erstellt und gestapelt, ein Gefäßtransplantat zu bilden. Die Transplantate können so bemessen sein, um den Bereich der menschlichen Koronararterie Dimensionen gerecht zu werden, indem einfach die 3D-gedruckten Führungsgröße zu verändern.

Zusammenfassung

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Koronare Herzkrankheit bleibt eine Haupttodesursache, Millionen von Amerikanern beeinflussen. Mit dem Mangel an autologe Gefäßtransplantate zur Verfügung, bietet entwickeln Transplantate großes Potenzial für die Behandlung des Patienten. Allerdings sind dazu entworfen Gefßtransplantate im Allgemeinen nicht leicht skalierbar, erfordern Herstellung von kundenspezifischen Formen oder Polymerrohren, um verschiedene Größen anzupassen, eine zeitraubende und kostspielige Praxis bilden. Menschliche Arterien erstrecken sie im Lumendurchmesser von etwa 2,0 bis 38 mm und in der Wandstärke von etwa 0,5-2,5 mm. Wir haben ein Verfahren geschaffen, das „Ring-Stacking-Methode“ bezeichnet wird, in der variable Größe Ringe von Geweben der Zelltypen gewünscht wird, hier gezeigt mit vaskulären glatten Muskelzellen (SMCs), kann unter Verwendung von Führungen der Führungsstangen erzeugt wird Lumendurchmesser zu steuern, und Außenschalen Gefäßwanddicke zu diktieren. Diese Geweberinge werden dann mit einem rohrförmigen Konstrukt zu erzeugen gestapelt, um die natürliche Form eines Blutgefäßes nachahmt. Die Fahrzeuglänge kann be durch einfaches Stapeln der Anzahl der Ringe zugeschnitten erforderlich benötigt, um die Länge zu bilden. Mit unserer Technik, Gewebe von röhrenförmigen Formen, ähnlich einem Blutgefäß, kann leicht in einer Vielzahl von Abmessungen und Längen hergestellt werden, um die Bedürfnisse der Klinik und Patienten gerecht zu werden.

Einleitung

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Bei der Behandlung der koronaren Herzkrankheit (KHK), eine eigene Blutgefäße des Patienten werden als Implantatmaterial für Bypass-Operation entnommen wurden. Doch oftmals, kranke Patienten haben keine tragfähige Schiffe selbst zu spenden, und in Fällen, in denen sie das tun, bewirkt, dass der Spenderstelle erheblichen zusätzlichen Schaden und hat ein ernsthaftes Risiko für eine Infektion. 1 Engineered Gefäßtransplantaten könnte diesen Bedarf zu füllen. Skalierbarkeit ist von größter Bedeutung für das Engineering Schiffe, um die breite Palette von Patienten Gefäßgröße Anforderungen zu erfüllen. vorliegenden Verfahren für technische Gefäße sind....

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Protokoll

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1. Zellkultur Vorbereitung

  1. Nutzen Sie die menschliche Aorta-Glattmuskelzellen im Handel erworben.
  2. Pflegen Zellen in Glattmuskelzellwachstumsmedium, bestehend aus 88,6% 231 Medien, jeweils 0,1% von rekombinantem Humaninsulin (rh-Insulin), rekombinanten humanen Fibroblasten-Wachstumsfaktor (rH-FGF), rekombinanten humanen epidermalen Wachstumsfaktor (rH-FGF), und Ascorbinsäure; und jeweils 5% fötales Rinderserum (FBS) und L-Glutamin; und 1% Antibiotikum / Antimykotikum.
    HINWEIS: Jeder Wachstumsfaktor, FBS und L-Glutamin als Gefäß Medien Wachstum Kit erworben.
  3. Ändern Medien alle 48 Stunden, bis die Zellen sind etwa 90% konfluent und ....

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Ergebnisse

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Nachgewiesene hier ist die Herstellung von 3 verschiedenen engineered Gefäßimplantat Größen (Abbildung 1), die zeigen , dass der Ring Stapelverfahren (RSM) skalierbar ist. Um zu beweisen , Anwendbarkeit, die 3 verschiedene Gefäßgrößen Korrelat tatsächlichen menschlichen Gefäßgröße für den linken vorderen absteigenden Arterie gewählt (klein; Lumendurchmesser = 4 mm) 17, absteigend Aorta (Zwischen; Lumendurchmesser = 10 mm) und aufsteigende Aorta (g.......

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Diskussion

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Der Ring Stapelverfahren stellt mehrere Vorteile gegenüber aktuellen Gefäßgewebe manipulierten Konstrukts Techniken. Die RSM können menschliche Gefäße jeder Größe durch einfaches Anpassen der Post und Außenschale Abmessungen zu schaffen angepasst werden. Unsere Methode ermöglicht die Entwicklung von polymerfreien konstruierte Schiffe, die ausschließlich aus menschlichen Zellen zusammengesetzt und schnell Trägermaterial in der körpereigenen natürlichen Wundheilungsprozess gefunden zu verschlechtern. Polymer-Transplantate.......

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Offenlegungen

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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Danksagungen

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Die Autoren möchten sich unsere Kolleginnen und Lam Labor Kollegen mit einigen der Histologie und Zellkultur Ammar Chishti und Bijal Patel für die freundliche Unterstützung danken. Die Finanzierung wurde von der Wayne State University Nano Fellowship (CBP) zur Verfügung gestellt, Start-up-Fonds und Cardiovascular Research Institute Seed Grant (MTL).

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Menschliche glatte Muskelzellen der AortaATCCPCS-100-012vaskuläre glatte Muskelzellen
Medium 231Gibco (Life Technologies M-231-500spezifisches Medium für vaskuläre glatte Muskelzellen
Aorta Smooth Muscle Cell Growth Kit ATCCPSC-100-042Wachstumsfaktoren zur Aufrechterhaltung der Lebensfähigkeit der vaskulären glatten Muskelzellen
Replicator Mini 3D-Drucker MakerBot N/A3D-Drucker
Poly(milchsäure) 3D-Tinte (PLA)MakerBot N/A3D-Drucker Filament
Poly(dimethlysiloxan) (PDMS)Ellworth Adhesives 3097358-1004Polymer zum Verkleben von Plattenteilen
FibrinogenHyclone Labratories, Inc.SH30256.01Fibrin-Gel-Komponente
Thrombin Sigma Life SciencesF3879-5GFibringelkomponente
Transformforming Growth Factor-Beta 1 PeproTech100-21Wachstumsfaktor zur Stimulierung der Kollagenproduktion
Hämozytometer Hausser Scientific Co.3200für die Zellzählung
Polycarbonat-SchläucheUS-Kunststoffe PCTUB1.750X1.625Material zur Herstellung von hohen, ringförmigen Stapelplatten
Polycarbonat-Platte Home Depot409497Material für die Herstellung von hohen, ringstapelbaren Platten
Klebepolymer LösungsmittelSCIGRIP10799Material zur Herstellung von hohen, ringförmigen Stapelplatten
Instron 5940InstronN/AZugprüfmaschine
U-StretchCell ScaleN/AZugprüfmaschine
Smooth Muscle Actin MA5-11547Thermo FisherAntikörper
TropomyosinMA5-11783Thermo FisherAntikörper
Human

Referenzen

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  1. Luciani, G. B., et al. Operative risk and outcome of surgery in adults with congenital valve disease. ASAIO J. 54 (5), 458-462 (2008).
  2. Lawson, J. H., et al. Bioengineered human acellular vessels for dia....

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Schlagwörter

3D gedruckte F hrungenvaskul re glatte MuskelzellenGeweberingbildungGef prothesen EngineeringErstellung von PDMS PostsHerstellung von Fibrin HydrogelZellaussaattechnikKontrolle der Gef l ngehistologische Analyse

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