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Methodenartikel

Die Verwendung eines zentralen Venenkatheter für Flüssigkeiten, Drugs und Nährstoffverwaltung in einem Maus-Modell der Critical Illness

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DOI:

10.3791/55553

2. Mai 2017

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieses Protokoll beschreibt ein zentral katheterisiertes Mausmodell für anhaltende kritische Erkrankungen. Wir kombinieren die Zäkalligatur und die Punktionsmethode zur Induktion einer Sepsis mit der Verwendung eines zentralen Venenzugangs für die Verabreichung von Flüssigkeiten, Medikamenten und Nährstoffen, um das klinische Umfeld des Menschen nachzuahmen.

Zusammenfassung

Dieses Protokoll beschreibt ein zentral katheterisierte Mausmodell einer längeren kritischer Krankheit. Wir kombinieren die cecal Ligatur und Einstichverfahren Sepsis mit der Verwendung eines zentralen Venenkatheter für Flüssigkeiten, Medikamente und Nährstoff Verabreichung zu induzieren das menschliche klinische Umfeld zu imitieren. Schwerkranke Patienten erfordern eine intensive medizinische Unterstützung, um zu überleben. Während die Mehrheit der Patienten innerhalb von ein paar Tagen, etwa ein Viertel der Patienten müssen längere Intensivpflege und sind mit einem hohen Risiko zu sterben, von nicht-Lösung multiplem Organversagen wieder erholen wird. Darüber hinaus wird die verlängerte Phase der kritischen Erkrankung durch tiefe Muskelschwäche punziert, und endokrine und metabolische Veränderungen, von denen die Pathogenese noch nicht vollständig verstanden. Das am häufigsten verwendete Tiermodell in der Intensivmedizin-Forschung ist das cecal Ligatur und Einstich Modell Sepsis zu induzieren. Dies ist ein sehr reproduzierbares Modell, mit akuten entzündlichen und hämodynamischen Veränderungen ähnlich dem menschlichen Septembersis, die die akute Phase der kritischen Erkrankung untersuchen soll. Allerdings wird dieses Modell durch eine hohe Letalität punziert, die sich aus der klinischen menschlichen Situation anders ist, und entwickelt nicht die verlängerte Phase der kritischen Erkrankung zu untersuchen. Deshalb passen wir die Technik durch einen zentralen Venenkatheter in die Halsvene Platzierung ermöglicht es uns, eine klinisch relevante unterstützende Pflege, zu verabreichen, um besser auf die menschliche klinische Situation der kritischen Erkrankung zu imitieren. Dieses Mausmodell erfordert eine umfangreiche chirurgische Verfahren und die tägliche intensive Pflege der Tiere, aber es ergibt sich ein relevantes Modell der akuten und anhaltende Phase der kritischen Erkrankung.

Einleitung

Kritische Erkrankung ist ein Krankheitszustand, in dem die Funktion eines oder mehrerer Organsysteme in dem Maße behindert wird, dass der Patient sterben, es sei denn, eine intensive medizinische Unterstützung verabreicht wird. Während die ursprüngliche Ursache für die Aufnahme in die Intensivstation (ICU) variieren kann, im Bereich von Trauma, komplizierten Operationen, Verbrennungen, Krankheit Exazerbationen Sepsis, alle kritisch kranken Patienten leiden an Zellschäden, verursacht durch Hypoperfusion, Hypoxie und übermäßige Entzündung unter anderem , was zu Organversagen. Die meisten Patienten überleben ihre akute Beleidigung, sondern ein wichtiger Teil der Patient....

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Protokoll

Das Protokoll wurde von der Universität Leuven Ethical Review Board für Tierforschung genehmigt.

1. Herstellung der venösen Leitung

  1. Bereiten Sie die Spitze des Venenkatheters durch schnell den Mittelteil von 60 cm microrenathane (MRE) Schläuchen in heißem (> 220 ° C), Sesamöl eingetaucht wird. Anschließend dehnt den mittleren Teil des Rohres einen schmalen Durchmesser (Außendurchmesser (OD) von <0,5 mm) durch vorsichtige die Ende des Schlauches voneinander weg zu bewegen zu erzeugen.
  2. Verwenden eine Skalpellklinge das Rohr in zwei Teile von 30 cm geschnitten , die jeweils (siehe Figur 1, Tabell....

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Ergebnisse

C57BL / 6-Mäuse wurden schwer krank gemacht, wie oben beschrieben. Wir führten zwei Experimente post-CLP Überleben bis zwei Zeitpunkt zu bewerten: Überleben bis zum Tag 5 (n = 15) und das Überleben bis zum Tag 7 (n = 22) nach CLP. Überlebenskurven der beiden Experimente waren nicht signifikant unterschiedlich (im Vergleich bis zum Tag 5), was auf die Reproduzierbarkeit des experimentellen Aufbaus. Nicht überlebende Tiere wurden Tod oder eingeschläfert aufgrund des Erreichens menschlicher.......

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Diskussion

Wir entwickeln ein klinisch relevantes Mausmodell der kritischen Erkrankung, durch die cecal Ligatur und Einstichverfahren Kombination für Flüssigkeiten, Medikamente und Nährstoff Verabreichung Sepsis mit der Verwendung eines zentralen Venenkatheter zu induzieren. Dieser Versuchsaufbau reproduzierbar ist, ermöglicht die längere Phase der kritischen Erkrankung und führt zu einer stabilen Sterblichkeit zu untersuchen, hiermit die menschliche klinische Situation nachahmt 1.

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

GVdB, über die Universität Leuven (KU Leuven), erhält langfristige strukturelle Forschungsförderung aus dem von der flämischen Regierung finanzierten Methusalem-Programm (METH08/07) und hält einen European Research Council Advanced Grant AdvG-2012-321670 aus dem Ideenprogramm des siebten Rahmenprogramms der Europäischen Union. Das SET erhielt ein Research Assistant Fellowship der Research Foundation-Flanders (FWO).

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
BuprenorphinEcupharVetergesic 0,3 mg/ml
C57BL/6 Janvier labsC57BL/6JRj
KolloideFresenius KabiVolulyte 6%
kristalloideBaxterPlasmalyte a viaflo
Ethilon 3.0EthiconF3211
ImipenemMSDTienam 500  mg Pulver zur Herstellung von Injektionsflüssigkeiten
: Isofluran,EurovetIso-vet
KetaminEurovetNimatek, 100 mg/ml,
LocTite Sekundenkleber3, alle Kunststoffe Rectavit119818
Mersilk 3.0EthiconL192
Mersilk 5.0EthiconF682
Microrenathane .025" Außendurchmesser x .012" InnendurchmesserBiosebMRE-025
olimel N7EBaxter
PE10 - Polyethylen .011" x .024" Instech SolomonBTPE-10
PE-50 Schlauch .023" x.038"Instech SolomonBTPE-50
Nagetierwirbel 20 GBiosebRS-20G 
Ropivacaï neAstrazenicaNaropin 2  mg/ml
XylazinVMDXylazinhydrochlorid 2%
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Referenzen

  1. Angus, D. C., van der Poll, T. Severe sepsis and septic shock. N Engl J Med. 369 (9), 840-851 (2013).
  2. Singer, M., et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).
  3. Remick, D. G., Newcomb, D. E., Bolgos, G. L., Call, D. R.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Schlagwörter

Z kalligation und punktionMausmodell f r kritische ErkrankungenFl ssigkeits und MedikamentenverabreichungKatheterisierung der Jugularvenechirurgische Verfahrenstechnikberlebensratenanalysetotale parenterale Ern hrungintensivmedizinische Ma nahmenprolongierte kritische Erkrankung