Hydrolyse eines Ni-Schiff-Base-Komplex unter Verwendung von Bedingungen, die für Retention von säurelabilen Schutzgruppen

Zusammenfassung

Hier stellen wir eine effiziente Hydrolyse und anschließender Fmoc Schutz einer Aminosäure isoliert aus einer Ni-Schiff-Base-Komplex. Hydrolysebedingungen hier vorgestellten sind geeignet für die Verwendung bei der Beibehaltung der säurelabilen Seitenkettenschutzgruppen erforderlich ist. Diese Technik kann auf eine Vielzahl von Substraten unnatürlicher Aminosäuren anpassbar sein.

Zusammenfassung

Unnatürliche Aminosäuren, Aminosäuren Seitenkettenfunktionalitäten, die nicht üblicherweise in der Natur gesehen, wird zunehmend in der synthetischen Peptidsequenzen gefunden. Synthese einiger unnatürliche Aminosäuren beinhaltet oft die Verwendung eines Vorläufers, bestehend aus einer Schiff-Base durch einen Nickelkation stabilisiert. Unnatürliche Seitenketten können in diesem Schiff-Base-Komplex gefunden auf einem Aminosäurerückgrat eingebaut werden. Die resultierenden unnatürlichen Aminosäure können dann aus dieser Komplex unter Verwendung von Hydrolyse der Schiffschen-Base isoliert werden, typischerweise durch Rückfluss in stark saurer Lösung einsetzt. Diese stark sauren Bedingungen können säurelabilen Seitenkettenschutzgruppen, die für die nicht natürlichen Aminosäuren verwendet werden in Mikrowellen-unterstützten Festphasen-Peptidsynthese entfernt werden. In dieser Arbeit präsentieren wir eine effiziente Hydrolyse und anschließender Fmoc Schutz eines aus einer Ni-Schiff-Base-Komplex isoliert Aminosäure. Hydrolysebedingungen in dieser Arbeit vorgestellten eignen sich zur Aufbewahrung von säurelabilen side Ketten-Schutzgruppen und kann auf eine Vielzahl von Substraten unnatürlicher Aminosäuren anpassbar sein.

Einleitung

Unnatürliche Aminosäuren (UAA'S) Lagerseitenketten, die sich von denen der zwanzig natürlich vorkommenden Aminosäuren, die in der Natur gefunden variieren haben einen Nutzen in einer breiten Palette von Anwendungen zu finden. Synthese dieser UAA ist, kann jedoch schwierig sein, in Abhängigkeit von der Struktur der Seitenketten und der Stereochemie des Aminosäure-Rückgrats. CH - Bindungsaktivierung von Glycin in Zusammenhang mit einer Nickel Schiff-Base - Komplex wird verwendet, um ² fluoriert oder heterocyclischen Seitenketten , die eine Vielzahl von Aminosäurederivaten einschließlich α, β-Diaminosäuren ¹ und UAA de....

Protokoll

1. Hydrolyse von Ni-Schiff-Base-Komplex

1. Man löst 1 mmol des Ni-PBP-Schiff-Base - Komplexes in 40 ml N, N - Dimethylformamid (DMF) mit in einem 250 ml Rundkolben bei Raumtemperatur gerührt wird.
2. 60 ml von 0,2 M wässrigen EDTA-Lösung, pH 4,5.
3. Unter Verwendung eines magnetischen Rührstabs und Platte rühren, über Nacht rühren die kombinierte Lösung. Da der Schiff-Base-Komplex hydrolysiert wird, wird die Farbe von einem tiefen Rot nach Weiß verschieben.
4. Nach Beendigung der Reaktion, wie durch das Fehlen jeglicher Rotfärbung angegeben, übertragen, um die Reaktion in einen 250 ml Scheidetrichter.
5. In 50 ml ....

Ergebnisse

Wir nahmen an, dass die Entfernung des Ni ²⁺ aus der Ni-PBP-Gly - Komplex könnte eine effiziente wässrige Hydrolyse der Schiffschen-Base , ohne die Notwendigkeit für raue pH - Bedingungen ermöglichen. Als EDTA eine kostengünstige und gut untersuchten Chelatbildner ist, ¹⁰ die Hypothese aufgestellt , dass wir die Zugabe von EDTA zu einer Lösung von Ni-PBP-Gly Chelatisierung von Ni ²⁺ -Ionen erleichtern würde, wodurch die Hydrolyse des Komplexe.......

Diskussion

Das oben beschriebene Protokoll ist nützlich in seiner Fähigkeit, die Isolierung aus einer Aminosäurerückgrat aus einem Ni-Schiff-Base-Komplex unter milden pH-Bedingungen und anschließenden Fmoc-Schutz dieses isolierten Aminosäure durch zwei kritische Schritte zu erleichtern. Der erste Schritt beinhaltet Rühren eine DMF / Wasser-Lösung, enthaltend EDTA Freisetzung der Aminosäure aus dem Komplex zu erleichtern. Residual-Komplex oder organische Nebenprodukte können leicht mit der Extraktion entfernt werden. Der zweite Sch.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Ni-PBP-Gly			Synthetisiert aus dem veröffentlichten Protokoll
DMF	Fisher	D119-4
EDTA	Fisher	S311-100
Dichlormethan	Acros	AC610050040
Natriumbicarbonat	Fisher	S233-500
Fmoc-OSu	Chem-Impex	"00147"
Dioxan	Fisher	D111-500
Salzsäure	Fisher	A144-500
Ethylacetat	Acros	AC610060040
Magnesiumsulfat	Fisher	M65-500
ZEOPrep 60ECO Silica Gel	ZEOChem
Hexane	Fisher	3200250.650.443
Chromatographie-Säule
pH-Teststreifen
Rotationsverdampfer
250 mL Scheidetrichter
250 mL Rundkolben
Rührstab
Rührplatte