Tumor Engraftment in einem Xenograft-Maus-Modell der menschlichen Mantel-Zell-Lymphom

Zusammenfassung

Mantel-Zell-Lymphom (MCL) ist ein schwer zu B-Zell-Störung zu behandeln, und es ist ebenso schwierig, zur Einrichtung eines Xenograft-Maus-Modell der primären MCL zu studieren und Therapeutika zu entwickeln. Hier beschreiben wir die erfolgreiche Etablierung von MCL Xenotransplantate bei Mäusen zu helfen, die zugrunde liegende Biologie zu verstehen.

Zusammenfassung

B-Lymphozyten sind wichtige Akteure im Immunzelle Zirkulation und sie vor allem zu Hause und in den lymphatischen Organen befinden. Während normalen B-Zellen vermehren sich nur, wenn durch T-Lymphozyten stimuliert, Onkogene B-Zellen überleben und autonom in undefinierter Orgel Nischen zu erweitern. Mantel-Zell-Lymphom (MCL) ist eine solche B-Zell-Störung, wo die mediane Überlebenszeit der Patienten von 4-5 Jahren. Dies erfordert die Notwendigkeit wirksamer Mechanismen, durch die das Homing und Engraftment dieser Zellen blockiert werden, um das Überleben zu erhöhen, und Langlebigkeit des Patienten. Daher ist der Aufwand, ein Xenograft-Maus-Modell um die Wirksamkeit von MCL-Therapeutika zu studieren, durch die Blockierung der homing Mechanismus in Vivo zu entwickeln von größter Bedeutung. Entwicklung der tierischen Empfänger für menschliche Zelle Xenotransplantation, frühen Phase Medikamente zu testen haben seit langem verfolgt worden, wie relevanten präklinischen Mausmodelle für neue Therapeutika Bildschirm entscheidend sind. Dieses Tiermodell ist, menschliche Transplantat Ablehnung zu vermeiden und, ein Modell für menschliche Krankheiten entwickelt und es kann sein, dass ein extrem nützliches Werkzeug, Fortschreiten der Erkrankung von verschiedenen Lymphom-Arten zu studieren und Kandidat Drogen für präklinische Tests durchführen hämatologischen malignen Erkrankungen wie MCL. Wir etabliert ein Xenograft-Maus-Modell, die als eine hervorragende Ressource zu erforschen und entwickeln neue therapeutische Ansätze für MCL dienen wird.

Einleitung

Lymphozyten von der Natur eine wichtige Rolle in Immunüberwachung und Lymphozyten Menschenhandel ist ein entscheidender Schritt bei der Montage von Antigen-spezifischen Immunantwort^1,2. Dieser Prozess umfasst Migration von naiven T-Lymphozyten aus dem Thymus in den Blutkreislauf und von dort nach sekundären lymphatischen Organe, einschließlich Lymphknoten, Peyer Patches oder Milz, wo sie cognate Antigene treffen. Die B-Lymphozyten im Knochenmark differenzieren und Wandern als naive Zellen in Follikel der sekundären lymphatischen Organe³. Einige dieser B-Zellen Antigen mit ihrem Rezeptor....

Protokoll

Die menschlichen Blutproben wurden nach Genehmigung durch die lokale Ethik und menschliche Experimente Ausschüsse des Universitätsspitals Genf Verfahren verwendet.

Tierische Verfahren wurden im Einklang mit den institutionellen ethischen Ausschuss von Animal Care in Genf, der Schweiz und beim kantonalen Veterinäramt durchgeführt (Zulassungsnummer: GE/26/15).

1. Vorbereitung primäre peripheren mononukleären Blutzellen (PBMCs) durch Dichtetrennung Gradient

Hinweis: 3-5 mL des peripheren Blutes wurden Patienten mit MCL in einer leukämischen Phase entnommen. Die Diagnose wurde gemäß standard....

Ergebnisse

Das Manuskript beschreibt eine optimierte Protokoll für die erfolgreiche Entwicklung von einem Xenograft-Maus-Modell für Engraftment MCL Zellen. Vorbereitung einer reinen Zellpopulation (in diesem Fall MCL-Zellen), ist sehr kritisch, erfolgreiche MCL Xenotransplantate zu entwickeln. Abbildung 1 stellt die präparative Schritte zur Isolierung von mononukleären Zellen aus Blut MCL der Patienten durch Dichtetrennung Farbverlauf. Die mononukleären Zellen werden we.......

Diskussion

Klinische Studien sind möglich für Medikamente, die in einem fortgeschrittenen Stadium der Entwicklung sind jedoch nicht für die Wirkstoffforschung verwendet werden. Bemühungen um tierische Empfänger für die menschliche Zelle Xenotransplantation zu entwickeln, um frühe Phase Medikamente zu testen haben lange verfolgt. Hier präsentieren wir ein Tiermodell, das menschliche Transplantat Ablehnung vermeidet und kann ein Modell für menschliche Krankheiten, wie MCL. Dies ist derzeit ein State-Of-The-Art-Xenograft-Modell, die M.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Ficoll-Paque-Medien	GE Healthcare	17-1440-02	zur Trennung von mononukleären Zellen
RPMI Medium 1640	Gibco-Life-Technologien	61870-010	zur Verdünnung von Blutproben
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)	Sigma-Aldrich	D8537	Waschen von Zellen
Rinderserumalbumin (BSA)	Sigma-Aldrich	A8412	zur Herstellung von PBS mit 1 % BSA, das in Waschzellen während der Isolierung verwendet wird
CD19-APC700	Beckman Coulter	B49212	humaner pan-B-Zellmarker
CD20-APC	Beckman Coulter	A21693	humaner pan-B-Zellmarker
CD20-ECD	Beckman Coulter	IM3607	humaner pan-B-Zellmarker
CD5-PC 5.5	Beckman Coulter	PN A70203	humaner T-Zellmarker
CD23-PE	Pharmingen	555711	Zelloberflächenprotein fehlt typischerweise in MCL
CD45 KO Beckman	Coulter	B36294	Pan-Leukozytenmarker
CD200-PE	Pharmingen	552475	Zelloberflächenprotein fehlt typischerweise nicht in MCL
NOD scid gamma (NSG) Mäusen	River Laboratories	5557	wurde in dieser Studie
zur Entwicklung von MCL-Xenotransplantaten verwendetEasy sep Humanes B-Zell-Anreicherungskit	Stammzelltechnologien	19054	zur Anreicherung von B-Zellen zur Gewinnung reiner Zellen für die Injektion in Mäuse
FACS	Beckman Coulter	Navios	zur Charakterisierung von MCL-Proben und zur Untersuchung der Organe für die MCL-Transplantation
1X Ammoniumchlorid, Kaliumpuffer			roter Blutlysepuffer (NH4Cl 8.024 mg/l; KHCO3 1.001 mg/l; EDTA. Na2· 2H2O 3,722 mg/l )

Charles , : ,