Eine multimodale Bildgebung Ansatz basierend auf Mikro-CT und Fluoreszenz Molekulare Computertomographie für längs-Bewertung der Bleomycin-induzierten Lungenfibrose bei Mäusen

Zusammenfassung

Wir beschreiben eine nichtinvasive multimodale Bildgebung Ansatz basierend auf Mikro-CT und Fluoreszenz Molekulare Computertomographie für längs-Beurteilung der Lunge Fibrose Mausmodell durch doppelte intratracheale Instillation von Bleomycin induziert.

Zusammenfassung

Idiopathischer Lungenfibrose (IPF) ist eine tödliche Lungenkrankheit zeichnet sich durch die fortschreitende und irreversible Zerstörung der Lunge Architektur, wodurch wesentlichen Verschlechterung der Lungenfunktion und anschließenden Tod durch Atemstillstand.

Die Pathogenese der IPF in experimentellen Tiermodellen hat von Bleomycin Verwaltung veranlasst. In dieser Studie untersuchen wir eine IPF-wie Maus-Modell durch eine doppelte intratrachealen Bleomycin Instillation induziert. Standard histologische Beurteilungen verwendet für das Studium der Lungenfibrose sind invasive terminal Verfahren. Das Ziel dieser Arbeit ist zu überwachen, Lungenfibrose durch nicht-invasive bildgebende Verfahren wie z. B. fluoreszierende Molekulare Computertomographie (FMT) und Micro-CT. Diese beiden Technologien validiert mit histologischen Befunde könnte einen revolutionäre funktionalen Ansatz für nicht-invasive Überwachung in Echtzeit von IPF krankheitschwierigkeit und Progression darstellen. Die Verschmelzung verschiedener Ansätze ist ein Schritt weiter für das Verständnis der IPF-Krankheit, wo der molekularen Ereignisse in einem pathologischen Zustand mit FMT beobachtet werden und die anschließende anatomischen Veränderungen von Mikro-CT überwacht werden kann

Einleitung

Idiopathischer Lungenfibrose (IPF) ist eine chronische Lungenerkrankung mit fortschreitende Abnahme der Lungenfunktion, die innerhalb von vier Jahren Diagnose¹leider oft tödlich ist. Die wichtigsten Funktionen des IPF sind extrazelluläre Matrix Deposition und Fibroblasten-Proliferation, aber die Pathogenese ist noch nicht vollständig geklärt. Die meisten unterstützte Hypothese ist, dass mehrere Zyklen der Lunge Verletzungen verursachen die Zerstörung der alveolären Epithelzellen, das führt zur Veränderung der mesenchymalen Zellzyklus Proliferation, übertriebene Anhäufung von Fibroblasten und Myofibroblasts, und erhöhte Matrix Produktion. Mediat....

Protokoll

Alle Tierversuche, die hierin beschriebenen wurden genehmigt vom intramural Tierschutz Komitee für Tierversuche Chiesi Farmaceutici und ERASMUS MC unter Protokollnummer: EMC 3349 (138-14-07) Einhaltung der Europäischen Richtlinie 2010/63-UE Italienische D.Lgs 26/2014 und dem überarbeiteten "Guide for the Pflege und Verwendung von Laboratory Animals"²³.

Hinweis: Vor Gebrauch, weibliche Inzucht C57Bl/6 (7-8 Wochen alt) Mäuse wurden akklimatisiert für mindestens 7 Tage zu den lokalen Vivarium Bedingungen (Raumtemperatur: 20-24 ° C; Relative Luftfeuchtigkeit: 40-70 %; 12-h-Hell-Dunkel-Zyklus), den freien Zugang zu standa....

Ergebnisse

Spontane Auflösung der Lunge Fibrose Läsionen beobachtet drei Wochen, nachdem einzelne Bleomycin Verwaltung und moderate strukturelle Veränderungen die Grenzen dieses Modells markieren. Nur vorbeugende Behandlung konnte wegen der engen therapeutischen Fenster ausgeführt werden, die keine klinischen Praxis¹⁷darstellt.

Hier zeigen wir, dass unser Protokoll der doppelten Bleomycin intratracheale Instillation.......

Diskussion

Trotz vielen Forschungsgruppen mit Schwerpunkt auf der Entwicklung neuer Medikamente zur Behandlung von IPF im Moment sind nur zwei für Patienten zur Verfügung. Es muss dringend medizinische wirksamer Therapien⁷ weil finden nur Lunge Transplantationis in der Lage zu überleben von 4-5 Jahren²⁶verlängern. Die wesentliche Voraussetzung für Translationale Medizin und Entwicklung neuer Medikamente ist die Verfügbarkeit von einem Tiermodell, die imitiert die Merkmalen des IPF und.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
FMT 2500 Fluoreszenztomographie-System	Perkin Elmer Inc.	Experimenteller Builder
MMPsense 680	Perkin Elmer Inc.	NEV10126	Schützen Sie die Sonde vor Licht, lagern Sie sie bei 4 Grad; C
TrueQuant Software	Perkin Elmer Inc.
Weibliches Inzuchtpferd C57BL/6	San Pietro NatisoneHorst, Niederlande (UD),		Vor der Anwendung wurden die Tiere mindestens 5 Tage lang an die lokalen Vivariumbedingungen akklimatisiert
Isofluran	ESTEVE spa	571329.8	einatmen
Automatisierter Zellzähler	Dasit XT 1800J	Experimental Builder
Kochsalzlösung, 0,9 % Natriumchlorid (NaCl)	Eurospital	15A2807
Quantum FX Mikro-CT-Scanner	Perkin Elmer Inc.
Bleomycinsulfat aus Streptomyces Verticillus	Sigma	B2434
Automatischer Gewebeprozessor	ATP700 Histo-Line Laboratorien	ATP700
Einbettungssystem	EG 1160 Leica Biosystems	EG 1160
Rotationsmikrotom	Slee Cut 6062
Digitaler Diascanner	NanoZoomer S60, Hamamatsu Photonics
NIS-AR Bildanalysesoftware	Nikon
Masson' s Trichrome Staining	Histo-Line Laboratories
10% neutralgepuffertes Formalin	Sigma	HT5012-1CS
Penn-Century Modell DP-4M Dry Power Insufflator	Penn-century	DPM-EXT
PE190 mikromedizinische Schläuche	2biologische Instrumente snc	BB31695-PE/8
Spritze ohne Nadel 5 mL	Terumo	SS*05SE1	Schneiden Sie die Bretter des Kolbens mit einer Schere
Hamilton 0,10 mL (Modell 1710)	Gasdicht	81022
Discofix 3-Wege-Absperrhahn	Braun	4095111
Spritze mit Nadel 1 mL	Pic Lösung	3,071,260,300,320	Verwendung ohne Nadel
Ernährungsschläuche aus Kunststoff 18 ga x 50 mm	2biologische Instrumente snc	FTP-18-50	Schneiden Sie die Spitze schräg ab;