Pentylenetetrazole-induzierten anzünden-Maus-Modell

Zusammenfassung

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode des chemischen anzünden mit Pentylenetetrazole und bietet einem Mausmodell der Epilepsie. Dieses Protokoll kann auch zur Anfälligkeit für Beschlagnahme Induktion und Pathogenese nach epileptischen Anfällen bei Mäusen zu untersuchen.

Zusammenfassung

Pentylenetetrazole (PTZ) ist ein GABA-A-Rezeptor-Antagonist. Eine intraperitoneale Injektion von PTZ in ein Tier induziert einen akuten, schweren Anfall bei einer hohen Dosis während sequenzielle Injektionen einer subconvulsive Dosis für die Entwicklung von chemischen kindling, eine Epilepsie-Modell verwendet wurden. Eine niedrig dosierte Injektion des PTZ induziert einen leichten Anfall ohne Krampf. Jedoch verringern sich wiederholende niedrig dosierte Injektionen von PTZ die Schwelle um einen krampfartigen Anfall hervorrufen. Kontinuierliche niedrig dosierte Verabreichung von PTZ induziert schließlich einen schweren Tonikum-klonischen Anfall. Diese Methode ist einfach und vielseitig einsetzbar, die Pathophysiologie der Epilepsie, die ist definiert als eine chronische Erkrankung, die sich wiederholende Anfälle beinhaltet zu untersuchen. Diese Chemikalie Anfeuerholz Protokoll verursacht wiederkehrende Anfälle bei Tieren. Mit dieser Methode schätzte Anfälligkeit für PTZ-vermittelten Anfälle oder der Grad der Erschwerung von epileptischen Anfällen. Diese Vorteile führten zu die Verwendung dieser Methode für das screening von Antiepileptika Medikamente und Epilepsie-Genen. Darüber hinaus wurde diese Methode zur neuronalen Schaden nach epileptischen Anfällen zu untersuchen, weil die histologischen Veränderungen in den Gehirnen von epileptischen Patienten auch in den Gehirnen der Chemikalie angezündet Tiere erscheinen. Somit eignet sich dieses Protokoll für die Herstellung von bequem Tiermodellen der Epilepsie.

Einleitung

Epilepsie ist eine chronische neurologische Erkrankung, die zeichnet sich durch wiederkehrende Anfälle und betrifft etwa 1 % der Menschen. Die zugrunde liegenden Mechanismen der Epileptogenesis und Beschlagnahme Generation bei Epilepsiepatienten können nicht vollständig in den klinischen Studien geklärt werden. Daher ist einem geeigneten Tiermodell zur Erforschung der Epilepsie¹erforderlich.

Eine Vielzahl von Tiermodellen der Epilepsie haben verwendet worden, zu untersuchen, die Physiologie der Epilepsie und Antiepileptika Medikamente^2,3zu identifizieren. Unt....

Protokoll

Animal Care und Use Committee des Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science stimmten alle experimentelle Verfahren. Postnatale 8 - 16 Wochen alten Mäusen empfohlen. Jede Inzucht Belastung ist akzeptabel für das Experiment. C57BL/6 Mäusen sind widerstandsfähiger gegen PTZ, während BALB/c und Swiss Albino-Mäuse für PTZ empfindlicher sind. C57BL/6 wurden in dieser Studie verwendet. Anfälligkeit für PTZ hängt auch vom Alter der Maus. Im Vergleich zu jüngeren Mäusen, sind ältere Mäuse mehr refraktär gegenüber PTZ-³⁵. Die Zahl der Versuchstiere für diese Methode kann variieren, aber mindestens 6-10 Tiere sind für jede Bedingung erforderlich.

Ergebnisse

Wiederholte Injektion von PTZ induziert eine Steigerung im Anfall Schweregrad. Sechs C57BL/6 Mäusen mit PTZ behandelt wurden, und ein weiteres 6 Mäuse mit Kochsalzlösung als Kontrollgruppe behandelt wurden. Die PTZ-Dosis betrug 35 mg/kg und 10 Injektionen verabreicht wurden. Die Beschlagnahme Punktzahl stieg allmählich mit PTZ-Injektionen, während keine Anfälle oder abnormen Verhaltensweisen durch Kochsalzlösung Injektionen (Abbildung 2) hervorgerufen wurden........

Diskussion

Hier präsentieren wir Ihnen eine allgemein zugängliche Protokoll für die Errichtung einer pharmakologischen Tiermodell der Epilepsie. PTZ-vermittelten chemischen anzünden hat eine lange Geschichte und ist ein allgemein anerkanntes Modell für die Untersuchung der Histopathologie und Cellular Pathologie von Epilepsie⁴¹. Das chemische anzünden-Modell der Epilepsie wurde zuvor von Suzdak und Jansen, 1995⁴²geprüft. Pharmakologische Beschlagnahme Induktion, vor allem mit PTZ, ist.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Pentylentetrazol	Sigma-Aldrich	P6500
Natriumchlorid	MANAC	7647-14-5
Maus	CLEA Japan		C57Bl/6NJcl, postnatal 8 Wochen,
männlich Spritze (1mL)	Terumo	SS-01T
Nadel (27G x 3/4") (0,40 x 19 mm)	Terumo	NN-2719S
Waage	Mettler	PE2000	Bei diesem Artikel handelt es sich um ein abgekündigtes Produkt. Fast äquivalent zum FX-2000i mit FXi-12-JA von A& D Unternehmen.
Paraformaldehyd	Sigma-Aldrich	P6148
Natriumhydroxid	Nacalai Tesque	31511-05
Peristatische Pumpe	ATTO	SJ1211
Saccharose	Nacalai Tesque	30404-45
Mikrotom	Yamato	REM-700	Bei diesem Artikel handelt es sich um ein abgekündigtes Produkt. Fast gleichwertig mit REM-710
Mikrotomklinge	Feather	S35
Triton X-100	Sigma-Aldrich	X-100
Anti-Synaptoporin Antikörper	Synaptische Systeme	102 002
Anti-ZnT3 Antikörper	Synaptische Systeme	197 002
Anti-Doublecortin	Santa Cruz	sc-8066	Bei diesem Artikel handelt es sich um ein abgekündigtes Produkt. Wir haben kein gleichwertiges Produkt getestet (sc-271390).
Kontextuelle Angstunterscheidungs-Testapparatur	O'hara
Drei-Kammer-Testapparatur	Muromachi