Method Article

Eine Ratte Modell der zentralen Ermüdung mit einem modifizierten mehrere Plattform-Methode

DOI:

10.3791/57362

August 14th, 2018

In This Article

Summary

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Hier präsentieren wir ein Protokoll, um einem Rattenmodell der zentralen Ermüdung unter Verwendung der modifizierten vorstellen mehrere Plattform Methode (MMPM).

Abstract

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In diesem Artikel vorgestellt wir einem Rattenmodell der zentralen Ermüdung unter Verwendung der modifizierten mehrere Plattform Methode (MMPM). Feld mehrere Plattform wurde als ein Wassertank mit engen Plattformen auf der Unterseite entworfen. Die Modell-Ratten wurden in den Tank setzen und Stand auf den Plattformen für 14 h (18:00-08:00) pro Tag für 21 Tage, mit einer leeren Kontrollgruppe für Kontrast gesetzt. Am Ende der Modellierung zeigten Ratten in der Modellgruppe ein offensichtlich müde aussehen. Um das Modell zu beurteilen, haben wir mehrere Verhaltens Tests durchgeführt, einschließlich das Freiland testen (OFT), die erhöhte plus Labyrinth (EPM)-Test und die erschöpfende Schwimmtest (ES). Die Ergebnisse zeigten, dass Angst, raumkognition Beeinträchtigung, Armen Muskelleistung und abgelehnte Freiwilligentätigkeit im Modell Ratten präsentiert die Diagnose der zentralen Ermüdung zu bestätigen. Änderungen der zentralen Neurotransmitter überprüft auch das Ergebnis. Abschließend das Modell erfolgreich simuliert zentrale Ermüdung und Zukunftsstudie mit dem Modell kann helfen, den Pathomechanismus der Krankheit zeigen.

Introduction

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Müdigkeit ist einer der wichtigsten Faktoren, die die menschliche Gesundheit1bedrohen. In den vergangenen Jahrzehnten haben verschiedene Untersuchungen bewiesen, dass die Ermüdung peripher ausgelöst, sondern zentral gesteuert und immer begleitet mit emotionaler und kognitiver Störungen ist. Italienischer Physiologe A. Mosso schlug zuerst das Wort zentrale Ermüdung2. Es wird allgemein als begrenzte ehrenamtliche Tätigkeit und Kognition Beeinträchtigung durch Dysfunktion des Impuls-Übertragung in das zentrale Nervensystem (ZNS)3definiert. Verglichen mit peripheren Muskelermüdung, betont die zentrale....

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Protocol

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Alle Tiere wurden nach den Richtlinien von der chinesischen Gesetzgebung über die ethische Verwendung und Pflege von Versuchstieren beibehalten.

1. Pre-Modellierung-Vorbereitung

  1. Labor-Vorbereitung
    1. Führen Sie die UV-Lampe für mindestens 30 min vor dem Experiment.
    2. Die Lab-Temperatur bei 25 ± 3 ° C und die Relative Luftfeuchtigkeit ca. 30 % Steuern.
    3. Das Labor Licht am 06:00 schalten Sie und schalten Sie ihn aus, um 18:00, einen 12 h/12 h Hell/Dunkel-Zyklus zu etablieren.
  2. Mehreren Plattform Kastenkonstruktion
    1. Konstruieren Sie eine undu....

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Results

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Wir beschreiben einem Rattenmodell der zentralen Ermüdung mit MMPM. 24 Wistar-Ratten sind zufällig in der Kontrollgruppe und der Modellgruppe mit 12 Ratten in den einzelnen Gruppen unterteilt. Das Modell Gerät dient als ein Wassertank mit engen Plattformen auf der Unterseite (Abbildung 1). Modell Ratten stehen auf den Plattformen für 14 h pro Tag, inklusive teilweise Schlafzeit, für 21 Tage (Abbildung 2).

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Discussion

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Die MMPM ist ursprünglich für Schlaf Entzug9. Ratten sind in einen Wassertank mit Plattformen auf der Unterseite fest ins Leben gerufen. Angetrieben durch die instinktive Angst vor dem Wasser, Ratten auf den Plattformen stehen bleiben und keinen Schlaf auftritt. Die Studie zeigt, dass verschiedene Stunden Schlafentzug zu verschiedenen Veränderungen der Ratte Verhalten und Stimmung, einschließlich Anerkennung Beeinträchtigung10, negative Emotionen11un.......

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Disclosures

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Die Autoren haben nichts preisgeben.

Acknowledgements

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Diese Arbeit wurde von Natural Science Foundation of Beijing (No.7162124) und Xin-Ao-Stiftung für die Peking-Universität der chinesischen Medizin unterstützt.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Schlafentzugswassertanks mit mehreren Plattformen, es wird vom neuroimmunologischen Labor der Universität für Chinesische Medizin110 cm x 60 cm x 40 cm bereitgestellt. An der Unterseite befinden sich 15 kleine Plattformen aus Kunststoff. Die kleine Plattform hat einen Durchmesser von 6,5 cm und eine Höhe von 8 cm
Wistar-RattenBeijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology CompanyLizenznummer SYXK (Beijing) 2016-0011Verwenden Sie 32 gesunde männliche Ratten von Wistar, 8 Wochen alt (200-210 g)
Agilent 1100LC HochleistungsflüssigkeitschromatographAgilent  G1379A, G1311A, G1313A , G1316A   G1379A, G1311A Typ chromatographische Pumpe, G1313A automatischer Probenehmer, G1316A Säulentemperaturbox
DECADE II SDC Elektrochemischer Detektor NiederländischesUnternehmenGlaskohlenstoffelektrode, Ag/AgCl-Referenzelektrode, Workstations (Clarity CHS)
Biofuge Stratos Hochgeschwindigkeits-KältezentrifugeHERAEUS
VCX130 Ultraschall-FrakturierungsinstrumentSONICS
ACS-ZEAS elektronische WaageEntwicklung der Phos-Technologie, Peking.Das Gewicht der Wiegeratten kann auf 0,1 g genau sein.
FieldBox Customization, es wird vom neuroimmunologischen Labor der Beijing University of Chinese MedicineHolzkiste aus offenem Feld   100 cm x 100 cm x 40 cm, Innenwand und Boden als grau bereitgestellt. Der Boden ist in 25 flächengleiche Quadrate unterteilt, von denen jedes 20 cm x 20 cm groß ist, und die 16 Gitter entlang der Außenwand sind die äußeren, und die anderen 9 Gitter sind zentral. Die Kamera wird über dem Mittelstreifen montiert.
Elevated Plus-LabyrinthBeijing zhongshi dechuang technology development co., LTD.Die offenen und geschlossenen Arme des Kreuzes bestehen aus 30 cm x 5 cm x 15 cm, und der mittlere Bereich ist 5 cm x 5 cm groß, wobei über der Mitte eine Kamera angebracht und 45 cm hoch ist.
Ratten-Schwimmeimer.Zhenhua Biological Instrument Equipment Co., LTD. Anhui, China.Das Volumen der Kunststofftrommel beträgt 70 cm x 30 cm x 110 cm, die zum Schwimmen bei Ratten verwendet wird.
ThermometerShiya Instrument Co., LTD., Changzhou, China.Steuern Sie die Wassertemperatur
Kleine WasserpumpeXincheng Technology Co., LTD., Chengdu, China.Wird für Wassertank und Schwimmverhalten verwendet.
Ethovition3.0 Verhaltenssoftware.Nuldus, NiederlandeMessanalyse von Videos zum Verhalten von Ratten.
Anpassung des in Peking ANTEC Open

References

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  1. Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study. Neuroscience. 261, 60-67 (2014).
  2. Dalsgaard, M. K., Secher, N. H.

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Central Fatigue ModelMultiple Platform MethodRat Model ConstructionOpen Field TestElevated Plus MazeExhaustive Swimming TestNeurotransmitter AnalysisSleep Deprivation ProtocolBehavioral AssessmentWater Tank Setup

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