Beurteilung der Activity based Anorexie bei Mäusen

Summary

Mäuse, die einzeln untergebracht mit einem laufenden Rad während Angesichts begrenzter Zugang zu Nahrungsmitteln entwickeln Verringerung der Nahrungsaufnahme und Steigerung der Aktivität auf das Laufrad. Dieses experimentelle Phänomen nennt Activity based Magersucht. Dieses Paradigma bietet ein experimentelles Werkzeug für das Studium der Neurobiologie und Verhaltensweisen zugrunde liegenden Aspekte der Anorexia Nervosa.

Abstract

Nagetiere entwickeln Activity based Anorexie (ABA), wenn eine eingeschränkte Fütterung ausgesetzt und erlaubt den freien Zugang zu einem Laufrad. Diese Bedingungen führen zu einer lebensbedrohlichen Reduktion des Körpergewichts. Jedoch anpassen Nagetiere ausgesetzt, nur eine der folgenden Bedingungen letztlich und normales Körpergewicht wieder herzustellen. Auch wenn erhöhte gekoppelt mit Reduktion im freiwilligen Nahrungsaufnahme laufen erscheinen Paradox ABA Bedingungen, ist ABA Verhalten über zahlreiche Säugetierarten beobachtet.

Das ABA-Paradigma bietet ein Tiermodell für Anorexia Nervosa (AN), eine Essstörung mit schweren Dysregulation des Appetit-Verhaltens. Themen sind einzeln mit freiem Zugang zu einem Laufrad untergebracht. Jeden Tag wird das Thema Nahrung für eine begrenzte Zeit angeboten. Im Verlauf des Experiments nimmt ein Thema Körpergewicht von hoher Aktivität und niedrige Kalorienzufuhr. Die Dauer der Untersuchung hängt von wie lange essen täglich, die Art von Speisen angeboten angeboten wird, die Belastung der Maus, wenn Medikamente getestet werden, und Umweltfaktoren.

Ein Mangel an wirksamen pharmakologischen Behandlungen für einen Patienten, ihre niedrige Lebensqualität, hohe Kosten für die Behandlung und ihre hohe Sterblichkeit zeigen die Dringlichkeit für die weitere Forschung AN. Wir bieten eine Prinzipskizze für die Durchführung von ABA Experimente mit Mäusen, eine Methode, um ein ähnliches Verhalten zu untersuchen, um neue Therapien zu entwickeln. Dieses Protokoll ist optimiert für den Einsatz bei Mäusen Balb/cJ, aber für andere Stämme, große Flexibilität in der Zusammenarbeit mit verschiedenen Fragen, insbesondere in Bezug auf genetische Faktoren von ABA leicht manipuliert werden kann.

Introduction

Seit 1953 wurden die Nagetiere zeigen eine paradoxe Hyperaktivität auf Rädern laufen, wenn sie freien Zugang zu den Rädern gegeben sind, während freiwillige Hypophagia zu unterziehen, bei Verfügbarkeit von Nahrungsmitteln eingeschränkt¹beschrieben. Im Gegensatz dazu fallen Nagetiere nicht schnell des Körpergewichts beim Essen nach einem Zeitplan ohne Laufräder oder wenn untergebracht mit Laufräder angeboten und Essen Ad Libitum^1,2,3. angeboten Die ABA-Modell führt zuverlässig dramatische Rückgänge im Körpergewicht, Hypophagia, Unterkühlung, Verlust der Brunst und erhöhte Stimulation der HPA-Achse⁴. Letztlich führt ABA in den Tod, es sei denn, das Thema aus dem Paradigma⁵entfernt wird. Das ABA-Paradigma bietet Forschern mit einem Tiermodell AN, eine komplexe Essstörung mit schweren Dysregulation der Appetit-Verhalten betrifft ca. 1 von 100 Frauen und ein kleinerer Prozentsatz der Männer⁶. Patienten leiden AN weisen häufig Hyperaktivität, bestehend aus extrem viel Übung und/oder allgemeine Unruhe^7,8. Mit einer Sterblichkeit von ca. 10 % hat AN die höchste Sterblichkeitsrate unter allen psychiatrischen Erkrankungen-⁹. Aktuelle Behandlung AN beschränkt sich auf kognitive Therapien, da gibt es keine zugelassenen pharmakologischen Therapien für Patienten mit^10,11.

AN gilt in der Regel als eine Störung, die in erster Linie Frauen betroffen. Als eine Diagnose, die 10 mal häufiger bei Frauen als bei Männern ist, stehen Probandinnen traditionell im Mittelpunkt in einer¹². Besondere Beachtung sollte jedoch in Männchen aus Studien mit Ausnahme getroffen werden. Während die Diagnose einer bleibt niedriger bei Männern, Muskel Dysmorphien (MD) Voraussetzung ist, das viele Ähnlichkeiten mit AN, in diesem Körper Bild verzerrt wird und Ernährung ist oft ungeordnet. Es gibt Unterstützung für die Vorstellung, dass MD und AN in einer ähnlichen Weise^13,14,15eingestuft werden kann. Dies könnte darauf hindeuten, dass einige Fälle von MD repräsentieren die "männliche Version" AN. Im Rahmen von Tiermodellen haben einige Berichte vorgeschlagen, dass Männer anfälliger als die Weibchen, die ABA-Paradigma. Zum Beispiel eine kürzlich durchgeführte Studie zeigte eine höhere Sterblichkeit und verringerte Nahrungsaufnahme im Vergleich zu Frauen in C57Bl/6 Mäusen¹⁶. Ein Prädiktor für die Anfälligkeit für ABA ist spontane körperliche Aktivität (SPA). Ratten mit höheren oder niedrigeren SPA sind eher im ABA-Paradigma mit männlichen Ratten zeigen eine stärkere Wirkung als Weibchen¹⁷abnehmen. Umgekehrt sind weibliche Nagetiere beobachtet worden, mehr als die Männchen in der Phase der Einschränkung ABA¹⁸ausüben. Darüber hinaus haben Studien mit Mäusen Balb/cJ den gegenteiligen Effekt von C57Bl/6 Mäusen gezeigt, wo weibliche Mäuse haben eine höhere Sterblichkeit und verringerte Nahrungsaufnahme im Vergleich zu Männern (Abbildung 1)⁶. Mit unterschiedlichen Ergebnissen zwischen den Geschlechtern in der ABA-Paradigma und Sensibilisierung der Männer mit ungeordneten Essverhalten, sollten sowohl weibliche als auch männliche Probanden getestet werden.

Abgesehen von Geschlechtsunterschiede in der ABA-Paradigma Alter und Belastung zu berücksichtigen bei der Auswahl der Themen. Heranwachsende Mäusen können genauer AN, modellieren, da AN in der Regel in der Pubertät, ergibt sich, wie bei Ratten und Mäusen^19,20,21,22beobachtet. Stämme, die aktiver als andere auf eine Basislinie Ebene haben eine höhere Rate von Anfälligkeit und Schwere der ABA²³. Stämme bekannt, haben höhere Niveaus der Angst, wie DBA/2 gestiegen Rad laufen Aktivität, was eine schnellere Dropout-Quote in der ABA Paradigma²⁴anzeigen würde. Abhängig von den experimentellen Design kann die Belastung der Wahl angepasst werden, um die Dauer der ABA zu maximieren.

Die ABA-Paradox gilt nicht nur für Mäuse. Andere Säugetiere wie Ratten, haben Hamster, Rennmäuse, Schweine, Streifenhörnchen und Meerschweinchen dieses Phänomen⁶gezeigt. Die Erhaltung des Phänomens ABA über Säugetierarten legt nahe, dass das ABA-Paradigma eine translationale Werkzeug zur Untersuchung der Mechanismen, die Anorexie-ähnliches Verhalten beim Menschen bieten kann. Mäuse sind besonders gut geeignet für die Untersuchung der Mechanismen, die ABA. Mäuse können dicht untergebracht und Generationszeit ist relativ kurz. Mäuse haben eine vollständig sequenzierte Genom, und zahlreiche Inzucht, fremd- und spezielle Stämme, wie Congenics, stehen zur Verfügung. Eine Vielzahl von genetisch manipulierten Linien erzeugt wurden, so dass sie ideal für Studien bewerten genetische Einflüsse auf Erkrankungen wie Jg. je auf die Frage zur hand, Forscher können komplexe neuronalen Schaltkreise und/oder Gen Ausdruck manipulieren Bewertung, Verhalten im ABA-Paradigma möglicherweise Fragen zu genetischen Einfluss, die nicht möglich sind, wenn Menschen zu studieren.

Eine begrenzte Anzahl von Tiermodellen von AN derzeit vorhanden sind. Stress-Modelle induzieren Hypophagia bei Nagetieren mit Schweif einklemmen, Neuheit-induzierte Hypophagia, kalte Schwimmen und Hirnstimulation. Durch Induktion Stress, Hungergefühl Veränderungen in der HPA-Achse was zu reduzierter Körper Gewicht²⁵. Allerdings ist die HPA-Achse auch potent durch ABA, stimuliert die enthält auch zusätzliche Features von AN wie Hyperaktivität. Ein weiteres Modell in Studium AN zu berücksichtigen ist das chronische Essen Einschränkung Modell. Durch die Begrenzung Nahrung auf einen Bereich von 40 bis 60 % der ad libitum, kann man die physiologische Reaktion auf Unterernährung²⁶imitieren. Obwohl diese Methode für die Untersuchung der Auswirkungen der unzureichende Ernährung effektiv ist, ist es nicht reproduzieren ein Kernthema der AN, die ist freiwillig Essen Einschränkung. Im ABA-Paradigma Tiere sind Lebensmittel Zugang für einen Teil des Tages beraubt, aber auch freiwillig Nahrungsaufnahme reduzieren, wenn eine Rad auch vorhanden ist. Genetische Modelle wurden auch verwendet, um die Ätiologie der JG-Forscher untersuchen neurochemische und genetische Faktoren beteiligt AN, wie das Gen BDNF und Neurotransmitter Dopamin und Serotonin²⁷gefunden haben. Die Verwendung von genetischen Modellen ist wichtig zu verstehen, die neuronalen Mechanismen hinter AN. Allerdings Genom Breite Assoziationsstudien für AN haben nicht noch deutliche Treffer ergab, und keine seltene Varianten in AN identifiziert worden. Zukünftige Studien sollten einen genetischen Ansatz mit dem ABA-Modell um ein besseres Verständnis der AN-bezogene Phänotypen kombinieren.

Entwicklung von Tiermodellen für gesamte psychiatrische Erkrankungen ist praktisch unmöglich, aufgrund der Komplexität und Heterogenität von menschlichen Erkrankungen. Allerdings können durch die Modellierung von bestimmter, genau definierter Komponenten einer psychiatrischen Störung, einzigartige Einblicke in die zugrunde liegenden Neurobiologie oder Pathophysiologie einzuholen. Solche biologischen Erkenntnisse können dann verwendet werden, um neuartige Behandlungen zu identifizieren. Das Nagetiere ABA Paradigma bietet daher ein präklinischen Werkzeug für die Erforschung der Mechanismen, die AN-wie Verhalten, das beim Menschen, wie die Auswirkungen der genetischen Manipulationen, Störungen, neuronale Schaltkreise, ethisch nicht studieren kann und die Auswirkungen bestimmter Umweltfaktoren.

Protocol

Alle hier beschriebene Methoden wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) von der University of California, San Diego genehmigt.

(1) Mäuse

1. Wählen Sie die entsprechende Maus-Belastung für die Studie.
2. Kaufen Sie Mäuse von einem Lieferanten oder verstärken Sie eine Linie um geeignete experimentelle Zahlen zu erhalten.
3. Gruppenhaus gekauft Mäuse in der Tierhaltung für mindestens 1 Woche vor Beginn der Studie, um eine reichliche Akklimatisierung Zeitraum zu ermöglichen.
4. Beginnen Sie die Pre-experimentelle Akklimatisierung Phase wenn Mäuse 8 Wochen alt sind.

(2) Gehäuse

1. Wählen Sie Käfige, die groß genug, um eine UN-behindert Laufrad, Lebensmittel-Behälter und eine Flasche Wasser enthalten sind.
2. Regeln der Raumtemperatur und Luftfeuchtigkeit, die Hypothese getestet zu ergänzen.
   Hinweis: Höhere Temperaturen verringert sich die Entwicklung von ABA²⁸.

(3) Laufräder

1. Wählen Sie Räder mit drahtloser Kommunikation vermeiden mögliche Ablenkungen und Verstrickungen innerhalb des Käfigs, siehe die Tabelle der Materialien für ein Beispiel.

4. Wasser in Flaschen

1. Wählen Sie eine Flasche Wasser, die nicht für den Raum mit dem Laufrad oder Lebensmittel-Behälter im Hause Käfig antreten.
2. Wenn medikamentöse Behandlung im Trinkwasser zur Verfügung, Klebeband die Flasche eine lichtempfindliche Umfeld zu schaffen.

5. Essen

1. Wählen Sie eine fettarme Chow für die Hypothese getestet (z.B.Envigo Nagetier Diät 8604) geeignet.
   Hinweis: Eine Ernährung mit hohem Fett-und Zuckergehalt können den Ausbau der ABA²⁹verringert.
2. Verwenden Sie ein kleines Glas, Chow, ca. 65 cm im Durchmesser X 50 cm in der Höhe bereitzustellen.
   Hinweis: Eine automatische Zuführung kann statt einem Glas verwendet werden das Stress wird reduziert durch die Begrenzung der Ermittler Störungen. Dies ist möglicherweise am vorteilhaftesten, wenn ABA Studien mit Medikament Manipulationen durchführen.

(6) Pre-experimentelle Akklimatisierung Phase

1. Richten Sie die Versuchsfläche durch die Wahl einer Käfig-Racks in der Nähe von Laptop und Rad-Naben. Dadurch werden Probleme mit der Datenübertragung begrenzt.
2. Schalten Sie den Laptop und Wireless-Hubs.
3. Öffnen Sie die Rad-Management-Software auf dem Laptop.
   1. Schauen Sie sich die Software um sicherzustellen, dass beide Naben aktiv sind.
   2. Öffnen Sie "Extras" und wählen Sie "Löschen Räder." Wiederholen Sie diesen Schritt 5 Mal.
   3. Schließen Sie die Software, dann öffnen Sie es erneut.
4. Platz 3 AAA-Batterien in den Akku von einem Radstand.
   1. Verbinden Sie die Drähte am Akku-Pack mit der Hardware der Radstand. Diese werden getrennt vor dem Gebrauch. Schließen Sie den Akku in den Radstand.
5. Überprüfen Sie, dass die Software auf dem Radstand sorgen mit der ID "1" unter den entsprechenden drahtlosen Hub aufgeführt ist. Wenn die Basis nicht als ID "1" aufgeführt ist, Haken Sie den Akku heraus, und starte bei Schritt 6.2.
6. Ändern Sie die Rad-ID von "1" mit der Maus-ID unter der Spalte "Name".
7. Halten Sie das Laufrad-Basis auf den Boden des Käfigs mit Klebeband um Stabilität zu gewährleisten. Lassen Sie jedes Band festhalten, nicht zu, da Mäuse auf exponierten Band kauen werden.
8. Wählen Sie eine laufende radschüssel ohne eine korrodierte magnetischen Stück.
9. Platzieren Sie das Rad auf der Unterlage und drehen Sie das Rad, um Abstand zu Käfig Wände und Gitter zu überprüfen.
10. Drehen Sie die Disk eine bestimmte Anzahl von Drehungen um sicherzustellen, dass das Rad läuft Software richtig Umdrehungen zählt.
11. Verhindern Sie, dass Teile des Chow Verlorenheit in der Bettwäsche oder immer nass von der Unterseite des die Gläschen auf den Boden, Weg von dem Laufrad und die Flasche Wasser Kanal-taping.
    Hinweis: Nasse Chow erhöht Nahrungsaufnahme im Vergleich zum Chow³⁰trocknen.
12. Legen Sie 5 Stücke von Chow in das Glas.
    Hinweis: Der Chow während der Pre-experimentelle Phase zur Verfügung Ad Libitum ist und muss nicht unbedingt sein gewogen. Exposition gegenüber Laufräder in der Zeit der Akklimatisierung kann ABA^21,31intensivieren.
13. Eine volle Flasche Wasser in den Käfig und Wasser Ad Libitum.
14. Wiederholen Sie, bis alle Käfige ein drahtlos verbundenen Laufrad, Nahrung und Wasser haben.
15. Legen Sie individuell Mäuse in ihren geeigneten Käfigen.
16. Das Rad, die Verwaltung von Software gehen Sie auf "Datei" und klicken Sie auf "start Übernahme."
17. Sehen Sie das Softwareupdate Radumdrehungen sicherzustellen sind gezählt wird und das System funktioniert gut.
18. Akklimatisieren Sie Mäuse, die experimentelle Wohnverhältnisse für insgesamt 2 Tage.
19. Bewerten Sie Mäuse in dieser Phase um sicherzustellen, dass sie gesund genug, um das ABA-Experiment zu behandeln sind.
20. Käfige für jede Überschwemmung von Wasserflaschen täglich zu überprüfen. Wenn Flaschen überflutet haben, ersetzen Sie die alten Käfig mit einem neuen Käfig und wiederholen Sie die notwendigen Schritte, um Räder und Lebensmittel an den Käfig ohne Störungen zu halten.
21. Überprüfen Sie am 2. Tag Käfige für Lebensmittel-Ebenen. Wenn Essen ist niedrig, füllen Sie mit 2 Stück von Chow. Tun Sie dies ohne die Mäuse zu stören.
    Hinweis: Wenn während der Pre-experimentelle Akklimatisierung Phase jede Maus Hypophagia stellt oder untergewichtig ist, entfernen Sie die Maus aus der Studie.

(7) experimentelle Baseline-Phase - Tag 1

1. Wählen Sie "Ende" und dann "start Übernahme" in der Rad-Management-Software.
2. 9 g Chow in einem kleinen Kunststoffbecher auf einer Skala mit 0,00 g Empfindlichkeit abmessen. Das exakte Gewicht aufnehmen.
3. Sanft zu entfernen und die Maus in eine große Kunststoffbecher auf einer Skala mit 0.0 g Empfindlichkeit wiegen. Rekord Gewicht.
   Hinweis: Es ist entscheidend für den Stress der Mäuse beim Umgang zu begrenzen, also geduldig zu behandeln.
4. Entsorgen Sie alle Akklimatisierung Essen.
5. Suche Bettwäsche für alle Lebensmittel, die aus dem Glas und entsorgen, sowie beseitigen.
6. Lassen Sie die Flasche Wasser, aber sicherstellen Sie, dass es ausreichend gefüllt ist.
7. Sauber schmutzig Laufräder mit 70 % Isopropanol und Papierhandtücher.
8. Wenn Reinigung notwendig war, nachdem die Isopropanol trocknet, zurückkehren Sie die Maus zu seinem Käfig und ersetzen Sie den Käfig auf dem Gestell.
9. Wiederholen Sie diese Schritte, bis jede Maus gewogen wird und 9 g von Lebensmitteln ist ausgemessen und in Käfigen gelegt.

8. experimentelle Baseline Phase - 2-7 Tage

1. Zurück zu der Tierhaltung zur gleichen Zeit jeden Tag. Nicht in die Messungen von mehr als oder weniger als 10 min variieren.
2. 9 g Chow in einem kleinen Kunststoffbecher auf einer Skala mit 0,00 g Empfindlichkeit abmessen. Das exakte Gewicht aufnehmen.
3. Sanft zu entfernen und die Maus in eine große Kunststoffbecher auf einer Skala mit 0.0 g Empfindlichkeit wiegen. Rekord Gewicht.
4. Ziehen Sie die Gläschen aus dem Käfig und das Essen in einen kleinen Becher auf der Skala von 0,00 g dump.
   1. Wenn Kot und Einstreu in die Gläschen mit der Nahrung sind, wählen Sie alle Einstreu und Kot. Verwenden Sie ein kleines Sieb, um pulverförmige Lebensmittel in die Waage Becherglas zu reiben. Entfernen Sie Fäkalien bevor Sie dies tun, mit einer Pinzette (falls erforderlich).
      Hinweis: Bettwäsche wird nicht in kleinere Stücke, die durch das Sieb passen sich auflösen.
   2. Suchen Sie Speisereste in den Käfig und fügen sie Sie das Becherglas abgewogen werden. Notieren Sie die Menge der Nahrung bleiben.
      Hinweis: Wenn die Bettwäsche und Käfig durchsucht werden müssen, empfiehlt es sich, dies zu tun, während die Maus in den wiegen Becher oder Transfer-Käfig, Stress zu reduzieren ist.
   3. Entsorgen Sie alle Lebensmittel.
5. Glas reinigen und wieder in den Käfig legen. Band zu ersetzen, wenn nötig.
6. Legen Sie die zuvor gemessene 9 g des neuen Futters in das Glas.
7. Trocken Sie sauber verschmutzt, Laufräder mit 70 % Isopropanol, dann die Räder. Ein Käfig in einer Zeit zu tun und nicht versehentlich Räder vertauschen.
8. Beenden Sie und starten Sie Erwerb im Rad Programm jeden zweiten Tag laufen.
9. Wiederholen Sie diese Schritte bis zum Beginn der Phase Einschränkung.

9. experimentelle Einschränkung Phase - Tag 1

1. Beenden Sie und starten Sie Übernahme in die Rad-Management-Software.
2. Wiegen Sie Mäuse, alte und neue Futter pro Basis-Protokoll.
3. Räder nicht jetzt reinigen. Dies kann Mäuse ihre begrenzten Fütterung Zeitraum abzulenken.
4. Zugriff auf neue Nahrung, 9 g von Chow, 6h. Rekord ist das Zeit-Essen angeboten.
   Hinweis: Die Zeit, in der Licht-Zyklus, den Nahrung zur Verfügung steht wird die Entwicklung von ABA auswirken. Da Mäuse normalerweise während der Licht-Zyklus schlafen, verschärft den Zugang zu Nahrung während dieser Zeit der Entwicklung von ABA, da Mäuse zu diesem Zeitpunkt nicht in der Regel die Mehrheit ihrer täglichen Nahrung verbrauchen. Im Gegensatz dazu werden Mäuse essen Zugang während des dunklen Zyklus gegeben ABA langsamer entwickeln³². Anpassung der Dauer des Zugriffs der Nahrung führt zu mehr oder kürzere überleben Zeiten (Abbildung 2). Essen vorausschauende Aktivität (FAA) ist Hyperaktivität, die auftritt, unmittelbar vor dem Essen^32,33,34angeboten wird. FAA kann die Entwicklung von ABA, beeinträchtigen, da sich gezeigt hat, dass die Verweigerung des Rades laufen Zugang während der FAA ABA Verhalten³²mildert.
   1. Entfernen Sie essen genau 6 h später für jede Maus und Maßnahmen Sie die Menge bleiben. Rekord ist das Zeit-essen entfernt.
5. Reinigen Sie Räder, bei Bedarf zu, und versuchen Sie, dies zu tun, ohne immer hinter auf Lebensmittel aus nachfolgenden Käfigen ziehen.
6. Wiegen Sie Lebensmittel und berechnen Sie die Differenz in der Nahrung, die Menge der Nahrung gegessen per Mausklick bestimmen.
7. Berechnen Sie das ausfallende Gewicht für jede Maus.
   Hinweis: Ausfallende Gewicht ist eine Maus aus dem Experiment entfernt werden muss, wenn sie 75 % seiner letzten Messung Grundlinie Körpergewicht erreicht. Zum Beispiel, wenn eine Maus zu Beginn der Phase Einschränkung 20 g wiegt wenn es 15 g erreicht muss es das Experiment entzogen werden.
8. Bewahren Sie eine Kopie der Aussteiger Gewichte auf die Hand in der Tierhaltung.
   Hinweis: Experimente, die Bewertung der Erholung von ABA können versucht werden; Essen ist entweder ad libitum oder Räder sind gesperrt, um den Prozess zu studieren, durch den Mäusen zu einem gesunden Körper Gewicht³⁴wieder.

10. experimentelle Einschränkung Phase - 2-14 Tage

1. Wiederholen Sie alle Schritte der Messung in der Einschränkung Tag1-Protokoll. Rad-Erwerb nicht neu.
2. Wenn eine Maus erreicht drop Gewicht (75 % seines Körpergewichts Baseline), entfernen Sie das Rad und Essen Glas aus dem Käfig und bieten ausreichend Nahrung auf dem Boden des Käfigs, dann fahren Sie mit den anderen Mäusen. Sobald alle Käfige, teilgenommen haben, einschläfern Sie alle Mäuse, die Fallgewicht erreicht haben.
3. Lassen Sie das Rad für jede Maus für die Dauer des Experiments.
4. Überprüfen Sie jede Maus täglich für Verletzungen. Falls erforderlich, clip beschädigte Zehennägel, Wunden, etc. Ask Tierbetreuung Personal um Rat zu behandeln, wenn Sie unsicher sind, wie es weitergehen soll mit einer Verletzung.

11. Beendigung der Studiums

1. Die Studie dauerte 14 Tage, wiegen Sie alle Mäuse am Tag 15. Einschränkung Tag 1 Gewicht gilt eine Grundlinie Gewicht.
   Hinweis: Die Länge der Studie kann geändert werden, um die Hypothese getestet zu beheben. Längere Dauer Essen Zugang können verwendet werden, um die Studie zu verlängern.
2. Einschläfern Sie Mäuse wie nötig.
3. Nehmen Sie schmutzige Ausrüstung zu entsprechenden Zimmer.
4. Endet Rad Graf Erwerb am Tag 15 bis 10 volle Tage Daten zur Verfügung stellen.
5. Schalten Sie drahtlose Radnaben.
6. Extrahieren von Daten.
7. Analysieren von Daten.

Results

Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF), ein Protein, das trägt zur Regulierung der Fütterung sowie Beibehaltung des Gewichts, wird im Serum von Patienten mit einer³⁵reduziert. Dieses Experiment bewertet die Auswirkungen der geplanten Fütterung, laufende Rad Zugang oder beides auf BDNF Ausdruck innerhalb des Hippocampus (HPC), ventrale Haubengebiet (VTA), Nucleus Accumbens (NAc) und medialen präfrontalen Kortex (mPFC). Ausdruck der neuronalen Zelle Adhäsionsmolekü...

Discussion

Die ABA-Experiment kann von Experimentatoren, verschiedene Stämme, Alter, Medikamente und verschiedene andere Variablen des Lagers Jg. in Geist genetische Variabilität zu testen modifiziert werden, Anpassungen an das Laufrad oder Essen Zugangsfrist würde erhöhen oder verringern Sie den Schweregrad der Symptome und Dropout-Rate. Dies kann dazu dienen, erhöhen oder verringern Sie die Länge des Experiments, abhängig von der experimentellen Frage von Interesse.

Genaue Messung der Nahrungsaufnahme ...

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Wireless Low Profile Laufräder, Naben, Software	Med Associates	ENV-047
Standard Teklad Nagetier Chow	Envigo	8604
8 Wochen alte Mäuse	Jackson Laboratories	Balb/cJ	Stamm, der in unserer Studie verwendet wurde - Kann andere Stämme zur Beurteilung verwenden ABA
Scout Pro Scale 200 g	Ohaus	SPE202	Wird zum Wiegen von Mäusen
verwendet Scout Pro Scale 400 g	Ohaus	SPE402	Zum Wiegen von Lebensmitteln