Ein Protokoll der degenerativen Tenocyte von Menschen zu erwerben

Soo-Hong Han; Hyung Kyung Kim; Jong-Ho Ahn; Dong Hyeon Lee; Minjung Baek; Geunhee Ye; Joong-Myung Lee; Kyunghoon Min; Chihoon Oh; Soonchul Lee

doi:10.3791/57634

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Methodenartikel

Ein Protokoll der degenerativen Tenocyte von Menschen zu erwerben

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DOI:

10.3791/57634

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9. Juni 2018

Soo-Hong Han^*¹ , Hyung Kyung Kim^*² , Jong-Ho Ahn^*¹ , Dong Hyeon Lee³ , Minjung Baek¹ , Geunhee Ye¹ , Joong-Myung Lee¹ , Kyunghoon Min⁴ , Chihoon Oh¹ , Soonchul Lee¹

¹Department of Orthopaedic Surgery, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine, ²Department of Pathology, Kyung Hee University Hospital at Gangdong, Kyung Hee University School of Medicine, ³Department of Physiology, CHA University School of Medicine, ⁴Department of Rehabilitation, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

In-vitro- Verwendung von degenerativen Tenocytes ist wichtig, wenn die Wirksamkeit der neuartigen Behandlung auf sehnenerkrankung untersucht. Jedoch verwenden die meisten Studien nur das Tiermodell oder eine gesunde Tenocyte. Wir schlagen das folgende Protokoll um menschlichen degenerativen Tenocytes während der Operation zu isolieren.

Zusammenfassung

Sehnenerkrankung, eine schmerzhafte Erkrankung, die in Reaktion auf Degeneration der Sehne, entwickelt ist auf dem Vormarsch in der entwickelten Welt aufgrund steigender körperlicher Aktivität und längere Lebenserwartung. Trotz seiner zunehmenden Verbreitung die zugrunde liegende Pathogenese ist noch unklar, und die Behandlung ist in der Regel symptomatisch. Vor kurzem wurden zahlreiche therapeutische Optionen, einschließlich Wachstumsfaktoren, Stammzellen und Gentherapie, untersucht, in der Hoffnung auf Verbesserung der heilenden Potenz der degenerativen Sehne. Die meisten dieser Studien wurden jedoch nur auf Tiermodellen oder gesunde menschliche Tenocytes durchgeführt. Obwohl einige Studien mit pathologischen Tenocytes nach bestem Wissen und gewissen gibt es derzeit kein Protokoll beschreibt, wie menschlichen degenerativen Tenocytes zu erhalten. Das Ziel dieser Studie ist es, ein Standardprotokoll für den Erwerb der menschlichen degenerativen Tenocytes beschreiben. Zunächst war die Sehne Gewebe während der Operation eines Patienten mit seitlichen Epicondylitis geerntet. Dann wurden die Beinstrecker Carpi Radialis Brevis Sehne entsprechend zu strukturellen Veränderungen, die zum Zeitpunkt der Operation beobachtet Biopsie Proben entnommen. Aller dem geernteten sehnen erschien stumpf, grau, brüchig, und ödematös, was sie visuell unterscheidbar von den gesunden machte. Tenocytes wurden kultiviert und für Experimente verwendet. Unterdessen wurden die Hälfte der geernteten Gewebe histologisch untersucht, und es zeigte sich, dass sie die gleichen Hauptmerkmale der sehnenerkrankung (Angiofibroblastic Dysplasie oder Hyperplasie) geteilt. Eine Sekundäranalyse von Immunocytochemistry bestätigt, dass die kultivierten Zellen Tenocytes mit der Mehrheit der Zellen mit positiven Flecken für Mohawk und Tenomodulin Proteine. Die Eigenschaften der degenerativen Natur des Tenocytes wurden dann durch einen Vergleich der Zellen mit dem gesund-Steuerelement mit einer Verbreitung Assay oder qRT-PCR bestimmt. Die degenerativen Tenocyte angezeigt eine höhere Vermehrungsrate und ähnliche Gen Expressionsmuster von sehnenerkrankung, die vorherigen Berichte abgestimmt. Alles in allem könnte dieses neue Protokoll ein nützliches Werkzeug für zukünftige Studien der sehnenerkrankung bieten.

Einleitung

Sehnenerkrankung ist eine chronische, degenerative, Muskel-Skelett-Erkrankung, die in verschiedenen Teilen des Körpers entwickelt. Vor kurzem, ist die Zahl der Fälle von sehnenerkrankung in der entwickelten Welt aufgrund der zunehmenden Teilnahme an Freizeitsport und gestiegene Lebenserwartung¹^,²stark gestiegen. Die Ursache der sehnenerkrankung gilt als multifaktoriell und diese Ursachen sind Ischämie, Sauerstoff freie Radikale Verletzungen, ein Ungleichgewicht zwischen Vasokonstriktor und gefäßerweiternde innervierungen, internen Mikro-Tränen und Änderungen an Neuro-Verordnung³ ^,....