Dieser Artikel beschreibt die Protokolle, die verwendet werden, um eine neuartige Impfstoffbereitstellungsplattform, "Polybubbles", zu erstellen, um eine verzögerte Burst-Freisetzung zu ermöglichen. Polyester einschließlich Poly (Milch-Co-Glykolsäure) und Polycaprolacton wurden verwendet, um die Polybubbleen zu bilden und kleine Moleküle und Antigen wurden als Ladung verwendet.
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Methodenartikel
Herstellung einer Nahinfrarot-empfindlichen Core-Shell-Impfstoff-Bereitstellungsplattform
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Impfstoffabgabestrategien, die die Exposition von Fracht gegenüber organischen Lösungsmitteln begrenzen und gleichzeitig neuartige Freisetzungsprofile ermöglichen, sind entscheidend für die Verbesserung der Impfabdeckung weltweit. Hier wird eine neuartige injizierbare, ultraviolett-heilbare und verzögerte Burst-Release-plattform namens Polybubbles eingeführt. Cargo wurde in Polyester-basierte Polybubbles injiziert, die in 10% Carboxymethycellulose-basierter wässriger Lösung gebildet wurden. Dieses Papier enthält Protokolle, um die sphärische Form der Polybubbles beizubehalten und die Ladungsplatzierung und -aufbewahrung zu optimieren, um die Frachtmenge innerhalb der Polybubbles zu maximieren. Um die Sicherheit zu gewährleisten, wurden die chlorierten Lösungsmittelingehalte innerhalb der Polybubbleen mittels Neutronenaktivierungsanalyse analysiert. Release-Studien wurden mit kleinen Molekülen als Ladung innerhalb der Polybubble durchgeführt, um eine verzögerte Burst-Freisetzung zu bestätigen. Um das Potenzial für die On-Demand-Lieferung der Ladung weiter aufzuzeigen, wurden Gold-Nanostäbe in der Polymerhülle gemischt, um eine Nahinfrarot-Laseraktivierung zu ermöglichen.
Einleitung
Begrenzte Impfabdeckung führt zum Tod von 3 Millionen Menschen, die speziell durch durch Impfung vermeidbareKrankheiten1 verursacht werden. Unzureichende Lagerungs- und Transportbedingungen führen zur Verschwendung funktioneller Impfstoffe und tragen so zu einer reduzierten globalen Immunisierung bei. Darüber hinaus führt eine unvollständige Impfung aufgrund der Nichteinhaltung der erforderlichen Impfpläne auch zu einer begrenzten Impfabdeckung, insbesondere in Entwicklungsländern2. Innerhalb des empfohlenen Zeitraums sind mehrere Besuche des medizinischen Personals erforderlich, um Booster-Shots zu erhalten, wodurch der....
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Protokoll
1. Polycaprolacyontriacrylat (PCLTA) Synthese
- 3,2 ml 400 Da Polycaprolacyon (PCL) über Nacht bei 50 °C in einem offenen 200 ml runden Bodenkolben und K2CO3 in einer Glasdurchstechflasche bei 90 °C trocknen.
- Mischen Sie das Triol mit 6,4 ml Dichlormethan (DCM) und 4,246 g Kaliumcarbonat (K2CO3) unter Argon.
- 2,72 ml Acrylylchlorid in 27,2 ml DCM mischen und tropfenweise in das Reaktionsgemisch im Kolben über 5 min geben.
- Bedecken Sie das Reaktionsgemisch mit Aluminiumfolie und lassen Sie es bei Raumtemperatur 24 h unter Argon ungestört.
- Filtern Sie nach 24 h das Reaktionsgemisc....
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Ergebnisse
Polybubbles wurden mit SEM und NAA extensiv charakterisiert. Die Fracht wurde erfolgreich zentriert, um zu einer verzögerten Burst-Freigabe zu führen. Polybubbles wurden auch erfolgreich laseraktiviert, da AuNRs innerhalb der Polybubbles vorliegen.
Polybubble-Charakterisierung
Polybubbleen, die in eine wässrige Lösung ohne CMC injiziert wurden, führten aufgrund ihres Kontakts mit der Unterseite der Glasdurchs.......
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Diskussion
Aktuelle Technologien und Herausforderungen
Emulsionsbasierte Mikro- und Nanopartikel wurden häufig als Träger von Arzneimittelzufuhrenthalten verwendet. Obwohl die Freisetzungskinetik der Ladung von diesen Geräten ausgiebig untersucht wurde, war die Steuerung der Burst-Release-Kinetik eine große Herausforderung11. Die Vielseitigkeit und Funktionalität von Fracht ist auch bei Emulsionssystemen eingeschränkt, da die Ladung übermäßig wässrigen und organischen Lösungsmitteln ausge.......
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Offenlegungen
Autoren haben nichts zu verraten.
Danksagungen
Wir danken Dr. Bryan E. Tomlin, der dem Elementaranalyselabor der TAMU angeschlossen ist und bei der Neutronenaktivierungsanalyse (NAA) geholfen hat.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 1-Stufen-Ultra-Tetramethylbezidin (TMB)-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Substratlösung | Thermo scientific | 34028 | |
| 2-Hydroxy-2-methylpropiophenon | TCI AMERICA | H0991 | |
| 450 nm Stopplösung für TMB-Substrat | Abcam | ab17152 | |
| Acryloylchlorid | Sigma Aldrich | A24109-100G | |
| Acriflavin | Chem-Impex International | 22916 | |
| wasserfreier Ethylether | Fisher Chemical | E138-500 | |
| Anti-HIV1 gp120 Antikörper, konjugiert mit Meerrettichperoxidase (HRP) | |||
| Fisher BioReagents | BP9700100 | ||
| BSA-CF488 Farbstoffkonjugate | Invitrogen | A13100 | |
| Bromsalicylsäure | Acros Organics | AC162142500 | |
| Carboxymethylcellulose (CMC) | Millipore Sigma | 80502-040 | |
| Centrimoniumbromid (CTAB) | MP Biomedicals | ICN19400480 | |
| Chloroform | Fisher Chemical | C2984 | |
| Beschichtungspuffer | Abcam | ab210899 | |
| Dichlormethan (DCM) | Sigma Aldrich | 270997-1L | |
| Diethylether | Fisher Chemical | E1384 | |
| Dodeacyl Amin | Acros Organics | AC117665000 | |
| Doxorubicin | Hydrochlorid Fisher BioReagents | BP251610 | |
| L-Ascorbinsäure | Acros Organics | A61 100 | |
| Legato 100 Spritzenpumpe | KD Scientific | 14 831 212 | |
| mPEG | Thiol Laysan Bio | NC0702454 | |
| fettfreie Trockenmilch | Andwin Scientific | NC9022655 | |
| Kaliumcarbonat | Acros Organics | AC424081000 | |
| Phosphat Kochsalzlösung Puffer | Fisher BioReagents | BP3991 | |
| (Poly(caprolacton) | Sigma Aldrich | 440744-250G | |
| (Poly(Caprolacton) Triol | Acros Organics | AC190730250 | |
| Poly (Milchsäure-Co-Glykolsäure) Diacrylat | CMTec | 280050 | |
| Kaliumcarbonat | Acros Organics | AC424081000 | |
| Rekombinantes HIV1 gp120 + gp41 Protein | Abcam | ab49054 | |
| Silbernitrat | Acros Organics | S181 25 | |
| Natrium Borhydrid | Fisher Chemical | S678 10 | |
| Tetrachloraursäure | Fisher Chemical | G54 1 | |
| Trehalose | Acros Organics | NC9022655 | |
| Triethylamin | Acros Organics | AC157910010 |
Referenzen
- World Health Organization. Global Immunization: Worldwide Disease Incidence. , Children's Hospital of Philadelphia. https://www.chop.edu/centers-programs/vaccine-education-center/global-immunization/diseases-and-vaccines-world-view (2018).
- Paul, A., Bera, M., Gupta, P., Singh, N. D. P. o-Hydroxycinnamate for sequential photouncaging of two different functional groups and its application in releasing c....
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Nachdrucke und Genehmigungen
