Methodenartikel

Eine einfache und flexible Impfmethode zur genauen Beurteilung von Phänotypen von Arabidopsis und anderen Pflanzen bei Mehltauinfektionen

DOI:

10.3791/62287

⸱

9. März 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Institute for Bioscience and Biotechnology Research, University of Maryland, 2Department of Nutrition and Food Science, University of Maryland College Park, 3Department of Plant Sciences and Landscape Architecture, University of Maryland College Park

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wir präsentieren ein Protokoll zum Aufbau eines einfachen Sporenverteilungssystems, bestehend aus einer Impfbox mit einem ~50 μm Netz und einer transparenten Kunststoffkammer. Damit lassen sich Pflanzen gleichmäßig mit Mehltausporen impfen und so eine genaue und reproduzierbare Beurteilung der Krankheitsphänotypen der untersuchten Pflanzen ermöglichen.

Zusammenfassung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Verringerung von Ernteverlusten aufgrund von Pilzkrankheiten erfordert ein besseres Verständnis der Mechanismen, die die Pflanzenimmunität und die Pilzpathogenese steuern, was wiederum eine genaue Bestimmung der Krankheitsphänotypen von Pflanzen bei Infektion mit einem bestimmten Pilzpathogen erfordert. Eine genaue Krankheitsphänotypisierung mit nicht kultivierbaren biotrophen Pilzpathogenen wie Mehltau ist jedoch nicht einfach zu erreichen und kann ein geschwindigkeitsbegrenzender Schritt eines Forschungsprojekts sein. Hier haben wir ein sicheres, effizientes und einfach zu bedienendes Krankheitsphänotypisierungssystem am Beispiel der Arabidopsis-Mehltau-Interaktion entwickelt. Dieses System besteht hauptsächlich aus drei Komponenten: (i) einer hölzernen Impfbox mit einem abnehmbaren Deckel, der mit einem Edelstahl- oder Nylongeflecht aus ~50 μm Poren zur Beimpfung einer Pflanzenschicht mit Pilzsporen befestigt ist, (ii) einer transparenten Kunststoffkammer mit einer kleinen vorderen Öffnung zur Minimierung des Sporenaustritts bei der Impfung im Inneren, und (iii) eine Sporenentfernungs- und Verteilungsmethode für eine gleichmäßige und wirksame Impfung. Die hier beschriebenen Protokolle umfassen die Schritte und Parameter für die kostengünstige Herstellung der Impfbox und der Kunststoffkammer sowie eine Videodemonstration, wie das System verwendet werden kann, um eine gleichmäßige Impfung mit Mehltausporen zu ermöglichen und dadurch die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Krankheitsphänotypisierung zu verbessern.

Einleitung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Der Echte Mehltau ist eine der häufigsten und wichtigsten Erkrankungen zahlreicher Nahrungs- und Zierpflanzen1. Studien zu Mehltauerkrankungen erfreuen sich großer Beliebtheit, wie über 10.500 Publikationen als Suchergebnis mit dem Stichwort "Echter Mehltau" im Web of Science belegen (Stand November 2020). Tatsächlich wird Echter Mehltau (vertreten durch Blumeria graminis) vom Journal of Molecular Plant Pathology2 als einer der Top 10 Pilzpathogene angesehen. Die Quantifizierung der Krankheitsanfälligkeit ist ein notwendiger Schritt bei der Charakterisierung von Pflanzengenen, die zur Krankheitsresistenz oder -anfälligkeit beitragen, oder bei der funktionellen Identifizierung von Effektor-Kandidatengenen im Echten Mehltau. Die zuverlässige Phänotypisierung von Krankheiten ist jedoch beim Echten Mehltau weitaus schwieriger als bei den meisten anderen pilzlichen Krankheitserregern, zum Teil, weil Sporen von Mehltauarten (wie Golovinomyces cichoracearum UCSC1 basierend auf unseren Laborerfahrungen) im Gegensatz zu Sporen der letzteren nach einem Wassersuspensionsprozess eine verminderte Lebensfähigkeit aufweisen 3,4 . Eine unzureichende und/oder ungleichmäßige Beimpfung von Testpflanzen mit einem bestimmten Mehltau-Erreger kann zu ungenauen Phänotypisierungsergebnissen führen.

Eine Reihe von Impfmethoden wurde für Mehltaustudien berichtet. Dazu gehören (i) das Bürsten von Sporen direkt von infizierten Blättern zu Testpflanzen5, (ii) das Sprühen einer Sporensuspension auf Testpflanzen6, (iii) das Blasen von Sporen mit einem vakuumbetriebenen Absetzturm auf Pflanzen am Boden des Turms7 und (iv) die Sporenabgabe durch kombinatorische Verwendung einer Nylonnetzmembran und schallbasierte Vibration8 . Die Sporenbürsten- (oder Staub-) Methode ist einfach durchzuführen, aber ungleichmäßig in der Natur, so dass sie für die quantitative Bewertung möglicherweise nicht genau ist. Das Sprühen von Sporen ist bequem und gleichmäßig, kann aber, wie oben erwähnt, zu einer schlechten Sporenkeimung führen4. Die beiden letzteren (d.h. iii-iv) sind stark verbesserte Methoden, die eine gleichmäßige Impfung erreichen können; Beide sind jedoch nicht flexibel bei der Anpassung ihrer Impfkapazität in Bezug auf die Anzahl der zu beimpfenden Pflanzen in einem einzigen Ereignis, so dass beide Geräte nicht trivial sind und ihr Betrieb auf Laborbereiche beschränkt ist, in denen eine Vakuum- und / oder Stromquelle vorhanden ist.

Unser Labor beschäftigt sich seit über 20 Jahren mit der Interaktion zwischen Pflanzenund Mehltau 9,10. In den letzten zehn Jahren haben wir eine Reihe von Impfmethoden getestet und kürzlich eine einfache und dennoch effektive Mehltau-Impfmethode entwickelt. Diese netzbasierte Sporenbürstenmethode kann eine gleichmäßige Impfung gewährleisten, ist einfach und skalierbar und sollte daher von jedem Labor, das mit Mehltau arbeitet, leicht übernommen werden.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Protokoll

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Herstellung einer Standard-Impfbox mit einem abnehmbaren oberen Deckel, der mit einem Netz montiert ist

  1. Kaufen Sie eine Rolle 50 μm Nylonmembrangewebe oder 48 μm Edelstahlgewebe (empfohlen) in Geschäften. Stellen Sie sicher, dass Sie genug bestellen, um in mehrere Teile von 14 in x 26 Zoll zu schneiden, um das abgenutzte Netz zu ersetzen.
  2. Kaufen Sie eine 1/4 in x 2 ft x 4 ft mitteldichte Faserplatte oder Sperrholz, und schneiden Sie zwei 24-1/2 in x 10 in Stücken und zwei 12 in x 10 in Stücken, um eine Impfbox herzustellen. Verwenden Sie 8 Eckklemmen zur Unterstützung der vier Seiten.
    HINWEIS: Wenn Sie der breiten Seite des Gehäuses zugewandt sind, ist die linke 12 Zoll x 10 Zoll Seite dauerhaft befestigt und die rechte 12 Zoll x 10 Zoll Seite ist eine abnehmbare Tür, die durch vier Magnetverschlüsse gehalten wird (Abbildung 1A,B).
  3. Platzieren Sie vier 2-Zoll-Eckstreben zwei in jeder Innenecke der linken Seite, einen Zoll von oben und einen Zoll von unten, markieren und bohren Sie ein Loch. Verwenden Sie Schrauben, um die linke kurze Seite dauerhaft an zwei langen Seiten (vorne und hinten) zu befestigen. Der Innenabstand zwischen den beiden Längsseiten sollte 12 Zoll und nicht 11-1/2 Zoll betragen.
  4. Wenn die Eckklemmen noch an Ort und Stelle sind und die richtige Ausrichtung der rechten Tür erfolgt, markieren und bohren Sie die Position der 4 Magnetverschlüsse, um die richtige abnehmbare Tür an Ort und Stelle zu halten. Installieren Sie einen Knopfknopf an der Tür. Die Oberseite der Tür bleibt unter dem oberen Deckel hängen (Abbildung 1A,B).
  5. Um einen abnehmbaren oberen Deckel mit einem Netz herzustellen, schneiden Sie den langen hölzernen quadratischen Dübel in 2 Sätze von 26 Zoll und 12-3/4 Zoll. Kleben und nageln Sie die vier Teile so, dass sie um die Box passen - die Innenmaße des Rahmens sind etwas größer als die Außenmaße der Box, da das Siebnetz an diesem Rahmen befestigt wird.
  6. Schneiden Sie das Bildschirmgitter auf etwas weniger als 14 Zoll x 26 Zoll. Lassen Sie den Bildschirm nicht über den Rahmen hinausragen, um scharfe Kanten zu vermeiden. Haben Sie Hilfe, um den Bildschirm auf dem Rahmen zu dehnen. Halten Sie das Netz mit dem Rahmen durch Klemmen fest (Abbildung 1C), und verwenden Sie eine Heftpistole mit den richtigen Klammern, um den Bildschirm am Rahmen zu befestigen.
  7. Schneiden Sie zwei Sätze kürzerer quadratischer Holzdübel (21 Zoll und 9 Zoll) und verwenden Sie Schrauben, um das Netz mit den 4 kürzeren Stücken des hölzernen Vierkantdübels fest entlang des Rahmens zu schleifen (Abbildung 1C, D).

2. Herstellung einer Impfkammer

  1. Kaufen Sie durchsichtige Acrylplatten und Hardwareartikel in den entsprechenden Geschäften. Schneiden Sie ein 7 Zoll x 20 in öffnendes Fenster auf der Vorderseite der Box aus, wie in Abbildung 2C gezeigt.
  2. Montieren Sie die linke und rechte Seite, vordere (mit Fenster) und hintere Acrylplatten mit 8 Eckklemmen zu einem Karton, wie in Abbildung 2A dargestellt. Stellen Sie sicher, dass die Innenmaße der Kammer den Abmessungen des Deckblechs entsprechen.
    HINWEIS: Die rechte Seite dient zur Unterstützung und wird nicht an den vorderen oder hinteren Laken befestigt. Es ist absichtlich 1/2 Zoll kürzer als die anderen Blätter. Diese rechte Seite wird zu einer "herunterziehbaren" "Klapptür", die von einem rechtwinkligen Scharnier an der Unterseite und zwei magnetischen Verschlüssen oben gehalten wird, wie in Abbildung 2C, D gezeigt.
  3. Verwenden Sie Eckstreben, um die Paneele miteinander zu befestigen (Abbildung 2B,C). Halten Sie die Klammern an Ort und Stelle, markieren Sie sie mit einem Sharpie-Marker, zentrieren Sie den Stempel und bohren Sie dann das Loch.
    HINWEIS: Das Bohren von Acryl unterscheidet sich vom Bohren von etwas anderem, zwingt nicht, sonst kann die Seite des Lochs gegenüber dem Bohrer reißen. Verwenden Sie Nieten oder Schrauben. Ziehen Sie die Schrauben nicht zu fest an, da sonst das Acryl mit der Zeit reißen kann.
  4. Drehen Sie das Gehäuse auf der Rückseite, entfernen Sie die 4 Eckklemmen und positionieren Sie die obere Folie an ihrem Platz. Markieren und bohren.
  5. Installieren Sie das rechtwinklige Scharnier aus einer 3/4 Zoll Winkelstrebe. Verwenden Sie eine Nylon-Sicherungsmutter als Scharnierstange. Nicht festziehen, lassen Sie einen Spalt, damit sich die Tür auf diesem Scharnier dreht.
  6. Markieren, zentrieren, bohren und befestigen Sie die beiden magnetischen Türmagnete mit #6-32x3/4" Schwenkkopfschrauben. Befestigen Sie dann die Fangplatten mit #6-32x3/8" Flachkopfschrauben, siehe Abbildung 2C,D.

3. Beimpfung von Pflanzen in Wohnungen

  1. Bereiten Sie frische Mehltausporen als Inokula vor (z. B. Arabidopsis-Mehltau Golovinomyces cichoracearum UCSC1). Züchten Sie saubere Arabidopsis-immungeschwächte Pad4-1-mutierte Pflanzen 11 in einer Wachstumskammer (22 °C, 65% relative Luftfeuchtigkeit für 6-8 Wochen) und impfen Sie eine oder eine halbe flache Pad4-1-Pflanzen, um ausreichend frische Mehltausporen aufzubauen (Abbildung 3A).
  2. Züchten Sie die Pflanzen zur Bestimmung von Infektionsphänotypen in Standard 11 in x 21 in x 2,5 in Wohnungen.
    HINWEIS: Arabidopsis-Pflanzen , die sechs bis acht Wochen lang unter kurzem Tag (8 h hell, 16 h dunkel; 22 °C) angebaut werden, eignen sich gut für Infektionstests mit Mehltau.
  3. Wenn frische Mehltausporen von infizierten Pflanzen 8-10 Tage nach der Impfung (dpi) verfügbar sind, bewegen Sie eine flache Pflanzenfläche für den Infektionstest in die Impfbox in der Impfkammer (Abbildung 1B,2C).
  4. Schneiden Sie 15-20 stark infizierte Arabidopsis-Blätter (oder 4-6 infizierte Rosetten, je nach Blatt- / Rosettengröße und Impfgrad), lassen Sie die Blätter trocknen, wenn Kondenswasser vorhanden ist.
  5. Nehmen Sie 1-2 Blätter oder eine Rosette mit einer langen Pinzette mit einer Hand und stellen Sie die Blätter auf den Kopf. Führen Sie dann beide Hände durch die Öffnung der Kammer und schlagen Sie vorsichtig mit einer Schere auf den Arm der Pinzette, während Sie die Blätter/Rosette langsam über das Netz bewegen, das an der Impfbox montiert ist (Abbildung 3B). Wiederholen Sie dies, bis alle Blätter oder Rosetten verwendet sind.
    HINWEIS: Reife Sporen lösen sich leicht von Konidiophoren der infizierten Blätter. Versuchen Sie, Sporen auf dem Netz so gleichmäßig wie möglich zu entfernen.
  6. Verwenden Sie einen oder zwei feine Fächerbürsten, um die Sporen vorsichtig durch das Netz zu streichen (Abbildung 3C). Stellen Sie sicher, dass Sie die gesamte Oberfläche des Netzes vier oder mehr Mal in verschiedene Richtungen bürsten, um eine gleichmäßige Verteilung der Sporen auf die Pflanzen im Boden der Impfbox zu maximieren (Abbildung 3D). Tupfen Sie das Netz einige Male vorsichtig mit den Bürsten, um die Sporen abzuschütteln, die im Netz stecken.
  7. Lassen Sie die Sporen für eine halbe Minute ruhen. Ziehen Sie dann die Wohnung mit den geimpften Pflanzen aus der Impfbox heraus. Decken Sie die Wohnung mit einer Kunststoffkuppel ab und legen Sie sie in eine Wachstumskammer (22 °C, 65% relative Luftfeuchtigkeit). Die Phänotypisierung der Krankheit kann bei 5 oder 8 bis 12 dpi 12 durchgeführt werden.

4. Pflanzen mit kleineren Impfboxen beimpfen

HINWEIS: In Fällen, in denen weniger Pflanzen geimpft werden sollen, kann weiterhin die Standard-Impfbox verwendet werden. Stellen Sie sicher, dass Sie die Pflanzen in die Mitte der Box stellen. Entfernen und bürsten Sie Sporen im Bereich des Netzes, das die Pflanzen bedeckt, um sicherzustellen, dass alle Pflanzen geimpft werden, während Inokula gespart wird. Alternativ und vorzugsweise können kleinere Impfboxen verwendet werden (wie unten beschrieben).

  1. Wandeln Sie Kartons in eine Impfbox um. Entfernen Sie einfach die Ober- und Unterseite der Box, kleben Sie die Ecke ab, um sie bei Bedarf festzumachen, und montieren Sie ein 50-μm-Netz in geeigneter Größe durch Kleben oder Heften auf der Oberseite (Abbildung 4A, B).
  2. Bewegen Sie die Wohnung mit den Pflanzen in die Impfkammer, stellen Sie die kleinere Impfbox auf die Wohnung, um die Pflanzen abzudecken.
  3. Sporen wie oben beschrieben entfernen und bürsten.

5. Abgelöste Blätter in Petrischalen impfen

HINWEIS: In Fällen, in denen (i) frische Mehltausporen sehr begrenzt sind und/oder (ii) Pflanzen sauber gehalten werden müssen, während Krankheitsphänotypen und/oder Protein-subzelluläre Lokalisation in infizierten Zellen beurteilt werden müssen, können abgelöste Blätter für Infektionen in MS-Agarplatten verwendet werden.

  1. Machen Sie eine Mini-Impfbox, die nur geringfügig größer als eine Petrischale ist.
  2. Bereiten Sie 1/2-Stärke Murashige und Skoog (MS) mittelgroße Agarplatten (1,5%) vor. Fügen Sie Thiabendazol (40 mg / L) hinzu, um bei Bedarf Schimmelpilzkontamination zu reduzieren. Lagern Sie die Teller bis zum Gebrauch bei 4 °C im Kühlschrank.
  3. Schneiden Sie ein oder zwei vollständig expandierte Blätter von der Basis des Blattstiels für jede einzelne zu testende Pflanze. Führen Sie den Blattstiel der abgelösten Blätter in einem Winkel von ~30° in Agarmedium ein.
    HINWEIS: Jede Platte kann 20-40 Blätter enthalten, abhängig von der Größe der Blätter und der verwendeten Platte (Abbildung 4C).
  4. Beimpfen Sie die Blätter in der Impfkammer wie oben beschrieben. Bewegen Sie die Platte mit dem Deckel in eine Wachstumskammer.
  5. Schneiden Sie einen kleinen Abschnitt eines Blattes und überprüfen Sie die subzelluläre Lokalisation von Proteinen zu bestimmten Zeitpunkten.
  6. Zur Beurteilung der Infektionsphänotypen werden die Blätter mit 4 oder 5 dpi auf eine frische aseptische MS-Agar-Platte übertragen. Schneiden Sie die Basis des Blattstiels ab, bevor Sie die Blätter in das frische Agarmedium einführen. Beurteilen Sie die Krankheitsphänotypen bei 8 oder 9 dpi.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier stellen wir eine neue Mehltau-Sporen-Impfmethode vor, die einfach herzustellen, zu bedienen und einzustellen ist. Abbildung 1 zeigt die Montage der Standard-Impfbox mit Schwerpunkt auf der Marke des abnehmbaren Deckels, der mit einem 50-μm-Membrannetz montiert ist. Abbildung 2 zeigt den Aufbau der Impfkammer. Abbildung 3 zeigt die wichtigsten Schritte des Impfprozesses mit diesem System. Abbildung 4

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Unsere Meshed-Box-basierte Impfmethode hat mehrere Vorteile gegenüber anderen Impfmethoden. Erstens kann es eine gleichmäßige Verteilung der Sporen erreichen, wenn es richtig betrieben wird, wie in Abbildung 5 gezeigt. Zweitens kann die Verwendung von ~ 50 μm Mesh sowie die Sporenentfernung durch sanftes Schütteln infizierter Blätter die Pflanzeninfektion durch Thripse oder andere pflanzeninfizierende Insekten, die in Quellpflanzen vorhanden sind, reduzieren. Drittens kann die Verwendung von...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Offenlegungen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Arbeit wurde von der National Science Foundation (IOS-1901566) an S. Xiao unterstützt. Die Autoren danken F. Coker und C. Hooks für die Wartung der Pflanzenwachstumsanlage und Jorge Zamora für die technische Hilfe bei der Herstellung der Impfbox und der Kammer.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
  48 & Mikro; M Gittersieb aus Edelstahl; Größe: 24" x 48"  AmazonNAFür die Herstellung des Deckels einer Impfbox
#6-32 x ¾ " Maschinenschrauben, Unterlegscheiben und Muttern Home DepotNAZur Herstellung einer Impfkammer
#6-32 Kontermutter aus verzinktem Nylon (4er-Pack)Home DepotNAZur Herstellung einer Impfkammer
#6-32x3/8" Phillips Flachkopf-Maschinenschrauben, Unterlegscheiben und Muttern Home DepotNAZur Sicherung von Magnet-Türfangplatten
#8-32x1/2" Maschinenschrauben, Unterlegscheiben und MutternHome DepotNAZur Befestigung von Eckstreben und Türscharnier
0,250 dicke, klare, extrudierte Acrylfolienplatte;   Größe: 17 ½ " X 20"Professionelle KunststoffeSACR.250CEFZur Herstellung einer Impfkammer
mit einer Dicke von 0,250 mm klarer extrudierter Acrylfolie mit Folie; Größe: 18" x 20"    Professionelle Kunststoffe  SACR.250CEFZur Herstellung einer Impfkammer
mit einer Dicke von 0,250 mm aus klarer, extrudierter Acrylfolie; Größe: 18" x 30"  Professional PlasticsSACR.250CEFZur Herstellung einer Impfkammer
mit einer Dicke von 0,250 Dicke aus klarer, extrudierter Acrylfolie; Größe: 20" x 29 ½ "Professional PlasticsSACR.250CEFZur Herstellung einer Impfkammer
1-5/8" Schranktür Magnetverschluss weißHome DepotModell #P110-WZur Herstellung einer Impfkammer
2" Stahl verzinkte Eckstrebe (8er-Pack)Home Depot  Modell #13611 Zur Herstellung einer Impfbox & -kammer
3" EckklemmeHarbor Freight ToolsSKU 63653, 1852, 60589Zur Herstellung von Impfkammern
3/4"   Stahl verzinkte Eckstrebe (4er-Pack)Home DepotModell #13542Zur Herstellung einer Impfbox & -kammer
4-7/8" verzinkte leichte TürgriffeHome DepotModell #15184Zur Herstellung einer Impfbox
Feiner Lüftermixer BürstenMichaels StoreM10472846 Zur Inokulation
Kelleher 3/4" x 3/4" x 36" Holz Vierkantdübel Home DepotNAZur Herstellung des Deckels einer Impfdose
Mitteldichte Faserplatten (1/4" x 2' x 4');  Home DepotModell# 1508104Für die Herstellung einer Impfbox
Runde Glasdeckgläser mit einem 500 & Mikro; m gridibidi USA Inc.10816Zur Bestimmung der Sporendichte

Referenzen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Huckelhoven, R., Panstruga, R. Cell bi ology of the plant-powdery mildew interaction. Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 738-746 (2011).
  2. Dean, R., et al. The top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology. Molecular Plant Pathology. 13 (4), 414-430 (2012).
  3. Sakurai, H., Hirata, K. Some observations on the relation between the penetration hypha and haustorium of barley powdery mildew and host cell. V. Influence of water spray on the pathogen and host tissue. Annual Phytopathology Society of Japan. 24, 239-245 (1959).
  4. Shomari, S. H., Kennedy, R. Survival of Oidium anacardii on cashew (Anacardium occidentale) in southern Tanzania. Plant Pathology. 48 (4), 505-513 (1999).
  5. Sitterly, W. R. Powdery Mildews. Spencer, D. M. , Academic Press. 369(1978).
  6. Reuveni, M., Agapov, V., Reuveni, R. Induction of systemic resistance to powdery mildew and growth increase in cucumber by phosphates. Biological Agriculture & Horticulture. 9 (4), 305-315 (1993).
  7. Reifschneider, F. J. B., Boiteux, L. S. A vacuum-operated settling tower for inoculation of powdery mildew fungi. Phytopathology. 78 (11), 1463-1465 (1988).
  8. Chowdhury, A., Bremer, G. B., Salt, D. W., Miller, P., Ford, M. G. A novel method of delivering Blumeria graminis f. sp hordei spores for laboratory experiments. Crop Protection. 22 (7), 917-922 (2003).
  9. Xiao, S., et al. Broad-spectrum mildew resistance in Arabidopsis thaliana mediated by RPW8. Science. 291 (5501), 118-120 (2001).
  10. Xiao, S., Ellwood, S., Findlay, K., Oliver, R. P., Turner, J. G. Characterization of three loci controlling resistance of Arabidopsis thaliana accession Ms-0 to two powdery mildew diseases. The Plant Journal. 12 (4), 757-768 (1997).
  11. Reuber, T. L., et al. Correlation of defense gene induction defects with powdery mildew susceptibility in Arabidopsis enhanced disease susceptibility mutants. The Plant Journal. 16 (4), 473-485 (1998).
  12. Xiao, S., et al. The atypical resistance gene, RPW8, recruits components of basal defence for powdery mildew resistance in Arabidopsis. The Plant Journal. 42 (1), 95-110 (2005).

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Genehmigung beantragen, um den Text oder die Abbildungen dieses JoVE-Artikels zu verwenden

Genehmigung beantragen

Schlagwörter

Krankheitsph notypisierungSporeninokulationArabidopsis InfektionInokulationsboxNetz InokulationPflanzenimmunit tfungale PathogeneseIsolation epidermaler Zellen

Verwandte Artikel