Partielles heterotopes Hinterbeinein Transplantationsmodell bei Ratten

Summary

Dieser Artikel stellt ein partielles heterotopes osteomyokutanes Lappentransplantationsprotokoll bei Ratten und seine möglichen Ergebnisse in der mittelfristigen Nachbeobachtung vor.

Abstract

Vaskularisierte kompositative Allotransplantationen (VCA) stellen die fortschrittlichste Rekonstruktionsoption für Patienten ohne autologe Operationsmöglichkeiten nach einem komplexen Gewebedefekt dar. Gesichts- und Handtransplantationen haben das Leben entstellter Patienten verändert und ihnen ein neues ästhetisches und funktionelles soziales Organ gegeben. Trotz vielversprechender Ergebnisse ist VCA aufgrund lebenslanger Immunsuppressionskomorbiditäten und infektiöser Komplikationen immer noch unterdurchschnittlich. Die Ratte ist ein ideales Tiermodell für In-vivo-Studien, die immunologische Wege und Transplantatabstoßungsmechanismen untersuchen. Ratten werden auch häufig in neuartigen Techniken zur Konservierung von Kompositgewebetransplantaten eingesetzt, einschließlich Perfusions- und Kryokonservierungsstudien. Modelle, die für VCA bei Ratten verwendet werden, müssen reproduzierbar, zuverlässig und effizient mit geringer postoperativer Morbidität und Mortalität sein. Heterotope Gliedmaßentransplantationsverfahren erfüllen diese Kriterien und sind einfacher durchzuführen als orthotope Gliedmaßentransplantationen. Die Beherrschung mikrochirurgischer Nagetiermodelle erfordert solide Erfahrung in der Mikrochirurgie und Tierpflege. Hierin wird ein zuverlässiges und reproduzierbares Modell der partiellen heterotopen osteomyokutanen Lappentransplantation bei Ratten, die postoperativen Ergebnisse und die Mittel zur Vorbeugung potenzieller Komplikationen berichtet.

Introduction

In den letzten zwei Jahrzehnten hat sich VCA zu einer revolutionären Behandlung für Patienten entwickelt, die schwere Entstellungen erleiden, einschließlich^Gesichts-1-und Oberschenkelamputationen^2,Penis³und anderer komplexer Gewebedefekte^4,5. Die Folgen einer lebenslangen Immunsuppression behindern jedoch immer noch eine breitere Anwendung dieser komplexen rekonstruktiven Operationen. Grundlagenforschung ist entscheidend, um Anti-Ablehnungsstrategien zu verbessern. Die Erhöhung der VCA-Konservierungszeit ist auch wichtig, um die Transplant....

Protocol

Alle Tiere erhielten eine humane Pflege gemäß dem NIH-Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren. Das Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC-Protokoll 2017N000184) und das Animal Care and Use Review Office (ACURO) genehmigten alle Tierprotokolle. Inzucht männliche Lewis-Ratten (250-400 g) wurden für alle Experimente verwendet.

1. Chirurgie

1. Betäuben Sie die Lewis-Ratten mit Isofluran-Inhalation. Induzieren Sie die Anästhesie mit 5% Isofluran in der Induktionskammer und halten Sie die Anästhesie mit 1,5-3% Isofluran-Inhalation durch einen Atemkegel aufrecht.
2. Tragen Sie Augengleitmittel vor der Oper....

Results

In dieser Einzeloperatorenstudie wurden 30 syngene heterotope partielle Gliedmaßentransplantationen durchgeführt. Erfolg wurde am postoperativen Tag 21 als das Fehlen von VCA-Versagen oder Komplikationen, die Eine Euthanasie erfordern, definiert. Die normale Entwicklung des Transplantats ist in Abbildung 3 dargestellt. Die mittlere Dauer für die partielle Gliedmaßenbeschaffung und den Transplantateintritt beim Empfänger beträgt 35 bzw. 105 Minuten; die mittlere Ischämiezeit betrug 105 min. W.......

Discussion

Orthotopische Gliedmaßentransplantationsmodelle bei Nagetieren wurden in der Literatur^15,16,17beschrieben ; Sie erfordern jedoch eine Nervenreparatur, Muskelanhaftung und eine perfekte Osteosynthese des Femurs, was ein sehr schwieriger Schritt sein kann. Diese Modelle sind auch mit einer höheren Morbiditäts- und Mortalitätsrate bei Nagetieren^{verbunden 14,}insbesondere in der kurzfristigen Nachbeobachtung, .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
24 GA Angiokatheter	BD Insyte Autoguard	381412
4-0 Naht Schwarzes monofiles, nicht resorbierbares Nahtmaterial	Ethicon	1667	Wird verwendet, um das E-Halsband an den Nacken zu nähen
4-0 Nahtmaterial Coated Vicryl Plus Antibacterial	Ethicon	VCP496
Adson Gewebezange, 11 cm, 1 x 2 Zähne mit Bindeplattform	ASSI	ASSI.
Bipolare Schnüre	ASSI	228000C
Schwarz Polyamid Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c	AROSurgical	T04A10N07-13	Wird verwendet, um die mikrovaskulären Anastomosen
Buprenorphin HCl	Pharmaceutical, Inc	durchzuführen 42023-179-01
Dilatationszange	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	18131-12
Präparierschere 15 cm, runder Griff 8 mm Durchmesser, gerade schlanke konische Klinge 7 mm, Lipshultz Muster	ASSI	ASSI.
Doppelte Mikroklemmen 5,5 x 1,5 mm	Feinwerkzeuge (FST)	18040-22
Elizabethanischer Kragen	Braintree Scientific	EC-R1
Pinzette 13,5 cm lang, flacher Griff, 9 mm breit Gerade Spitzen 0,1 mm Durchmesser (x2)	ASSI	ASSI. JFL31
Halsey Micro Needle Holder	Fine Science Tools (FST)	12500-12
Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 Einheiten/mL	BD PosiFlush	306424
Isofluran	Patterson Veterinary	14043-704-06
Juweliere Bipolare Pinzette Antihaft 11 cm, gerade spitze Spitze, 0,25 mm Spitzendurchmesser	ASSI	ASSI.
Lone Star Elastic Stays	CooperSurgical	3314-8G	Wird verwendet, um das Leistenband für die Dissektion von Femurgefäßen zurückzuziehen
Lone Star Selbsthaltende Retraktoren	CooperSurgical	3301G
Micro-Mosquito Hemostats	Fine Science Tools (FST)	13010-12	Wird verwendet, um das Leistenfettpolster distal
zurückzuziehenNadelhalter, 15 cm runder Griff, 8 mm Durchmesser, superfein gebogene Backe 0,2 mm Spitzendurchmesser, ohne Verschluss	ASSI	ASSI. B1582
Nylon-Nahtmaterial Schwarz Monofilament 8-0, 6,5 mm 3/8c	Ethilon	2808G	Wird zur Ligatur von Kollateralästen an den Femurgefäßen
verwendet Offset Bone Nippers	Fine Science Tools (FST)	16101-10
S& T Gefäßklemmen 5,5 x 1,5 mm	Fine-Science-Werkzeuge (FST)	00398-02
Walton-Schere	Fine-Science-Werkzeuge (FST)	14077-09