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Methodenartikel

Ein Kontrast von drei Impftechniken, die verwendet werden, um die Rasse von unbekanntem Fusarium oxysporum f.sp. Niveum Isoliert

3.4K Aufrufe

DOI:

10.3791/63181

28. Oktober 2021

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Die Behandlung der Fusariumwelke der Wassermelone erfordert die Kenntnis der vorhandenen Erregerrassen. Hier beschreiben wir die Root-Dip-, befallenen Kernaussaat- und modifizierten Tray-Dip-Impfmethoden, um ihre Wirksamkeit bei der Rassentypisierung des pathogenen Pilzes Fusarium oxysporum f. sp niveum (Fon) nachzuweisen.

Zusammenfassung

Die Fusariumwelke der Wassermelone (Citrullus lanatus), verursacht durch Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon), ist im Südosten der USA, insbesondere in Florida, wieder zu einem wichtigen Produktionsdruck geworden. Der Einsatz integrierter Schädlingsbekämpfungsstrategien, wie z. B. rassenspezifische resistente Sorten, erfordert Informationen über die Vielfalt und Populationsdichte des Erregers auf den Feldern der Erzeuger. Trotz einiger Fortschritte bei der Entwicklung molekulardiagnostischer Instrumente zur Identifizierung von Pathogenisolaten erfordert die Rassenbestimmung häufig Bioassay-Ansätze.

Die Rassentypisierung wurde durch Wurzel-Dip-Impfung, befallene Kernaussaatmethode und die modifizierte Tray-Dip-Methode mit jedem der vier Wassermelonendifferentiale (Black Diamond, Charleston Grey, Calhoun Grey, Plant Introduction 296341-FR) durchgeführt. Isolate erhalten durch Berechnung der Krankheitsinzidenz fünf Wochen nach der Impfung eine Rassenbezeichnung. Wenn weniger als 33% der Pflanzen für eine bestimmte Sorte symptomatisch waren, wurden sie als resistent eingestuft. Diejenigen Sorten mit einer Inzidenz von mehr als 33% wurden als anfällig angesehen. Dieses Papier beschreibt drei verschiedene Methoden der Impfung zur Bestimmung von Rasse, Wurzel-Dip, befallenem Kern und modifizierter Tray-Dip-Impfung, deren Anwendungen je nach experimentellem Design variieren.

Einleitung

Die bodenbürtigen Pilze, aus denen der Fusarium oxysporum species complex (FOSC) besteht, sind wirkungsvolle hemibiotrophe Pflanzenpathogene, die bei einer Vielzahl von Kulturen schwere Krankheiten und Ertragsverluste verursachen können1. Die durch F. oxysporum f. sp. niveum (Fon) verursachte Fusariumwelke der Wassermelone hat in den letzten Jahrzehnten weltweit an Umfang, Häufigkeit und Schweregrad zugenommen 2,3. Bei Sämlingen ähneln die Symptome der Fusariumwelke oft einer Dämpfung. Bei älteren Pflanzen wird das Laub grau, chlorotisch und nekrotis....

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Protokoll

1. Bestimmung der Rasse durch Root-Dip-Methode (RDM)

  1. Vorbereitung der Versuchsumgebung
    1. Da die Symptomexpression stark von den Umweltbedingungen abhängt, halten Sie Pflanzen in einem kontrollierten Bereich. Überwachen Sie die relative Luftfeuchtigkeit, Temperatur, Photoperiode und Lichtintensität (Abbildung 1).
      1. Stellen Sie die Temperatur auf 26-28 ° C, die relative Luftfeuchtigkeit auf 50-75% ein und stellen Sie eine Photoperiode von 16 Stunden ein, um ein angemessenes Pflanzenwachstum und eine angemessene Pflanzengesundheit zu gewährleisten.
        HINWEIS: Um Hypoxie, Welken des Sämlings und / oder ....

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Ergebnisse

Diese Experimente helfen, die relative Resistenz von häufig angebauten Sorten zu definieren (Tabelle 1). Diese Informationen können dann verwendet werden, um Managementempfehlungen basierend auf lokalen Fon-Populationen zu leiten. Mit anderen Worten, wenn bekannt ist, dass Rasse 0 oder 1 in einem kommerziellen Feld vorhanden ist, kann der Landwirt geneigt sein, eine "resistente" Sorte wie Calhoun Gray, Sunsugar oder gleichwertig anzubauen. Die Ergebnisse der Bioassays unter Verwendung aller Methoden zeig.......

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Diskussion

Drei Methoden der Rassentypisierung wurden vorgestellt. Jede dieser Methoden eignet sich am besten für bestimmte Fragestellungen und experimentelle Bedingungen. Die befallene Kernimpfmethode (Bodenbefall) ist vielleicht einfacher und unkomplizierter, was sie besonders nützlich für die Beurteilung der Pathogenitätmacht 30. Die Verwendung dieser Methode für einfaches Renntypisieren ist sehr effektiv. Die Anwendung der Methode zur Bestimmung der Resistenz einer bestimmten Sorte könnte jedoch eine Her.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Danksagungen

Wir möchten Dr. Ali und dem Plant Molecular Diagnostic Laboratory sowie Dr. Pingsheng Ji von der University of Georgia danken, deren Leitung und Unterstützung zur Etablierung unseres Fon-Programms beigetragen haben.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
100% Fuller" s ErdeSigma-AldrichF200-5KG
1 L Glas ErlenmeyerkolbenPYREX4980-1L
15 mL FalkenröhrchenFisher Scientific14-959-49B
50 mL MesszylinderLaborsicherheitsversorgung41121805
50 mL Eppendorf Konische RöhrchenFisher Scientific05-413-921
AluminiumfolienverpackungReynolds Wrap720
BleachWalmart587192290
BunsenbrennerFisher Scientific03-391-301
CaCO3sigma-Aldrich239216
ZellaufstreuerFisher Scientific08-100-11
CheeseclothLions Services, Inc8305-01-125-0725
Klare KunststoffschalenVisions Wave999RP6CLSS~15 cm Durchmesser
Klare Vinylschläuche für PilzbeutelklemmenPilzzubehör6" für kleine Tasche, 8" für mittlere Tasche, 10" für große
Tasche WattebällchenFisherbrand22-456-885Steriles
EthanolFisher ChemicalA4094100%, dann mit Wasser kombinieren, um 70% für den Gebrauch herzustellen
LeuchtstoffröhrenleuchtenMaxLumeModell T52800 K Farbtemperatur, 24'' oder 48'' langer
granulierter AgarVWR International90000-786
HandsprühflascheFähigkeit Ein24122002~ 0,95 L
HämazytometerFisher Scientific02-671-55AZweikammer-Hämazytometer
LabortablettsFisher Scientific15-236-2A
Große, verschließbare PlastiktütenZiploc43080538 cm x 38 cm
Mister / GießkanneBar5FB10H22
Pilzbeutel ClampPilzzubehör6" für kleine Tasche, 8" für mittlere Tasche, 10" für große
Tasche NitrilhandschuheFisher Scientific19-130-1597D
Organic Rye BerriesShroom Versorgung0,5 Gallonen oder 25 lb Beutel
P1000 Pipette und SpitzenFisher Scientific14-388-100
PetrischalenFisherbrandFB0875713Rund, 100 mm Durchmesser, 15 mm Höhe
PflanzsubstratJolly GardenerPro-Line C/B
KunststoffkrugBrandTechUX06008501 L oder größer
Pflanztöpfe aus KunststoffNeo/SCI01-1177~15 cm Durchmesser und ~10 cm Höhe
Autoklavensicherer KunststoffbehälterThermoScientific UX06010223 L
Kartoffel-Dextrose-Agar-Medium mit viertelfester StärkeCole-ParmerUX1420028Verwenden Sie Pulver in Kombination mit der Rezeptur für die QPDA
Scientific Waage, gemessen in gOhaus30208458Jede präzise Waage, die 200 g aufnehmen und messen kann, funktioniert Größe
#4 KorkbohrungCole-ParmerNC9585352
kleiner PilzzuchtbeutelPilzzubehör0,5 Mikron Filter, kommt auch in mittleren und großen Größen
ErdkelleWalmart563876946
Styroporplatten (6 x 12 Zellen)SpeedlingModell TR72A
Styroporplatten (8 x 16 Zellen)SpeedlingModel TR128A
Spritze (5 oder 10 mL)Fisher Scientific14-829-19C
TimerWalmartTM-01
V8 Original 100% GemüsesaftWalmart564638212
VortexFisher Scientific02-215-418
Wassermelonenkern - Black DiamondWillhite Seed Inc17
Wassermelonensamen - Calhoun GrayHolmes Seed Company4440
Wassermelonensamen - Charleston GrayBonnie Plants7.15339E+11
Wassermelonensamen - PI 296341-FRKontakt AutorenKontaktieren Sie die Autoren
Weizenkerne (Maxie var.) (optional)Alachua County Feed & Samen

Referenzen

  1. Edel-Hermann, V., Lecomte, C. Current status of Fusarium oxysporum formae speciales and races. Phytopathology. 109 (4), 512-530 (2019).
  2. Everts, K. L., Himmelstein, J. C. Fusarium wilt of watermelon: Towards sustainable management of a re-emerging plant dise....

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Fusarium-WelkeWassermelonenkrankheitRassenbestimmungWurzeltauchmethodebefallene KernmethodeTabletttauchmethodePathogenisolatKrankheitsinzidenzresistente Kultursorten