Allogene Hauttransplantation ist ein Standard-Modell zum Testen Host T-Zell-Antworten auf MHC-disparate Spender-Antigene. Dieses Video-Artikel bietet eine visuelle Anleitung für jeden Schritt bei der Durchführung einer BALB/c--> C57BL / 6 Hauttransplantat beteiligt.
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In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Als einer der härtesten und am wenigsten technisch anspruchsvollen Modellen ist Hauttransplantation eine standardisierte Methode, um Test-Host T-Zell-Antworten auf MHC-disparate Spender-Antigene. Das Ziel dieses Video-Artikels ist es, den Betrachter mit einer Schritt-für-Schritt-visuelle Demonstration der Hauttransplantation am Mausmodell liefern. ; 2) vorzubereiten Empfänger für die Transplantation, 3) Hauttransplantat; 4) Bandage entfernt und Überwachung Abstoßung des Transplantats; 5) hilfreiche Hinweise 1) Ernte Spenderhaut: Das Protokoll ist in 5 Hauptkomponenten unterteilt. Sobald beherrschen, sollte das Verfahren selbst zu nehmen <10 min zu erfüllen.
Protokoll
Vor Beginn des Experiments:
- Erhalten IACUC Genehmigung
- Sterilisieren Instrumente und Q-Tipps
I. Ernte Spendergewebe
- Euthanize Spender Maus (in Übereinstimmung mit Institution SOP)
- Nasses Haar zurück von der Basis des Ohres mit Alkohol
- Ernte Spenderhaut indem Ohr ab an der Basis
- Legen Gewebe in der Platte auf Eis
- Split Ohr: pinch ventralen und dorsalen Seiten des Gewebes an der Basis der Ohren mit Ratten-Zahn-Zange; vorsichtig auseinander ziehen Gewebe; float dorsal Gewebe, innere Oberfläche nach unten, in PBS auf Eis; verwerfen kollagenen ventralen Klappe
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Diskussion
Wie in diesem Video-Beitrag gezeigt hat, ist die Hauttransplantationsmodell eine schnelle und einfache Methode zur Überwachung von allogenen T-Zell-Antworten. Allogene Hauttransplantation hat eine breite Palette von Anwendungen und hat Assay wurde die Effizienz einer Vielzahl von Immunsuppressiva und Toleranzinduktion Protokollen, sowie zur Untersuchung der biologischen Wirkungen der verschiedenen blockierende Antikörper eingesetzt.
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Offenlegungen
Die Autoren haben keine Offenlegungen vorzunehmen.
Danksagungen
NIH Immunologie Training Grant T32 AI 60573 (KRG) und NIH GM 41514 (MDC)
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Feine Pinzette (gekrümmt) | Sigma-Aldrich | F4142 | |
| Rattenzahn-Pinzette (1x2 Zähne, gerade) | Fine Science Tools | 11053-10 | n=2 |
| Strabismus-Schere (stumpfe Spitze) | Fine Science Tools | 14074-11 | |
| Augenbrauen-Pinzette (gekrümmt) | Fine Science Tools | 11065-07 | |
| Federschere (abgewinkelt) | Fine Science Tools | 15006-09 | |
| Halsey-Mikronadelhalter | Fine Science Tools | 12500-12 | |
| 10-cm-Platten | Corning | 430167 | |
| PBS | Cellgro | 21-040-CV | |
| Bupernex (Buprenorphinhydrochlorid) | Reckitt Benckiser | 517201 | |
| Insulinspritzen (29 Ga) | Monoject | 8881 600145 | |
| Q-tips | Solon Manufacturing Company | 362 | |
| Einklingen-Rasierklingen (#9) | Smith & Nephew Inc. | 67-0238 | |
| Seiden-Nahtmaterial (2-0; PS-2) | Ethicon Inc. | 583H |
Nachdrucke und Genehmigungen
