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Soziales Isolationsmodell: Ein nichtinvasives Nagetiermodell für Stress und Angst

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DOI:

10.3791/64567

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11. November 2022

 ,  ,  , 
1Titus Family Department of Clinical Pharmacy, School of Pharmacy, University of Southern California, 2Homer Stryker M.D. School of Medicine, Western Michigan University

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier wird ein durch soziale Isolation (SI) induziertes Angstmausmodell vorgestellt, das Wildtyp-C56BL / 6J-Mäuse verwendet, um Stress und angstähnliches Verhalten mit minimaler Handhabung und ohne invasive Verfahren zu induzieren. Dieses Modell spiegelt moderne Lebensmuster sozialer Isolation wider und ist ideal für die Untersuchung von Angstzuständen und verwandten Störungen.

Zusammenfassung

Angststörungen sind eine der Hauptursachen für Behinderungen in den Vereinigten Staaten (USA). Aktuelle Behandlungen sind nicht immer wirksam und weniger als 50% der Patienten erreichen eine vollständige Remission. Ein entscheidender Schritt bei der Entwicklung eines neuartigen Anxiolytikums ist die Entwicklung und Verwendung eines Tiermodells, wie z. B. Mäuse, um pathologische Veränderungen zu untersuchen und Arzneimittelziele, Wirksamkeit und Sicherheit zu testen. Aktuelle Ansätze umfassen genetische Manipulation, chronische Verabreichung von angstauslösenden Molekülen oder die Verabreichung von Umweltstress. Diese Methoden spiegeln jedoch möglicherweise nicht realistisch die Angst wider, die während des täglichen Lebens induziert wird. Dieses Protokoll beschreibt ein neuartiges Angstmodell, das die absichtlichen oder unbeabsichtigten Muster sozialer Isolation im modernen Leben nachahmt. Das durch soziale Isolation induzierte Angstmodell minimiert wahrgenommene Ablenkungen und Invasivität und verwendet Wildtyp-C57BL/6-Mäuse. In diesem Protokoll werden 6 bis 8 Wochen alte Mäuse (männlich und weiblich) einzeln in undurchsichtigen Käfigen untergebracht, um die äußere Umgebung, wie benachbarte Mäuse, für 4 Wochen visuell zu blockieren. Es werden keine Umweltanreicherungen (wie Spielzeug) bereitgestellt, das Einstreumaterial wird um 50% reduziert, jede Behandlung des Arzneimittels wird als Agarform verabreicht und die Exposition / Handhabung der Mäuse wird minimiert. Sozial isolierte Mäuse, die mit diesem Protokoll erzeugt wurden, zeigen ein größeres angstähnliches Verhalten, Aggression sowie eine verminderte Kognition.

Einleitung

Angststörungen stellen die größte Klasse und Belastung von psychischen Erkrankungen in den Vereinigten Staaten (USA) dar, mit damit verbundenen jährlichen Kosten von mehr als 42 Milliarden US-Dollar 1,2,3. In den letzten Jahren haben Angst und Stress die Prävalenz von Selbstmord und Suizidgedanken um über 16% erhöht4. Patienten mit chronischen Erkrankungen sind besonders anfällig für unbeabsichtigte Nebenwirkungen von psychischer Belastung oder verminderter kognitiver Funktion5. Aktuelle Behandlungen für Angstzustände umfassen Psychotherapie, Medikamente oder eine Kombination aus beidem6. Trotz dieser Krise erreichen jedoch weniger als 50% der Patienten eine vollständige Remission 6,7. Anxiolytika wie Benzodiazepine (BZs) und selektive Serotonin-Wiederaufnahmehemmer (SSRIs) haben erhebliche Nachteile oder erzeugen wenig bis keine unmittelbaren Wirkungen8. Darüber hinaus gibt es einen relativen Mangel an neuartigen Anxiolytika in der Entwicklung, der durch den kostspieligen und zeitaufwändigen Prozess der Arzneimittelentwicklung herausgefordert wird 9,10.

Ein kritischer Schritt im Arzneimittelentwicklungsprozess ist die Einrichtung und Verwendung eines Tiermodells, wie z. B. Mäuse, um pathologische Veränderungen zu untersuchen und die Sicherheit und Wirksamkeit von Arzneimitteln zu testen11. Aktuelle Ansätze zur Etablierung von Angsttiermodellen umfassen 1) genetische Manipulation, wie das Ausschalten von Serotoninrezeptoren (5-HT1A) oder γ-Aminobuttersäure-A-Rezeptor (GABAAR) α Untereinheiten12; 2) chronisch verabreichende Angstinduzierer wie Corticosteron oder Lipopolysaccharide (LPS)13,14; oder 3) Verabreichung von Umweltstress einschließlich sozialer Niederlage und mütterlicher Trennung15. Diese Methoden spiegeln jedoch möglicherweise nicht realistisch Angstzustände wider, die während des täglichen Lebens induziert werden, und sind daher möglicherweise nicht geeignet, den zugrunde liegenden Mechanismus zu untersuchen oder neuartige Medikamente zu testen.

Mäuse und Ratten sind wie Menschen sehr soziale Wesen16,17,18. Soziale Kontakte und soziale Interaktionen sind für eine optimale Gesundheit des Gehirns unerlässlich und entscheidend für die richtige Neuroentwicklung während der Aufzuchtzeit19. So führt die Trennung der Mutter oder soziale Isolation während der Aufzuchtzeit zu Mäusen, die mehr Angstzustände, Depressionen und Veränderungen der Neurotransmission zeigen20. Darüber hinaus ist Social Grooming oder Allogrooming eine häufige Form der Bindung oder des beruhigenden Verhaltens bei Mäusen und Ratten, die zusammen leben21. Daher ist die Sozialisation ein integraler Bestandteil des Nagetierlebens, und die Isolation wirkt sich negativ auf ihre Gesundheit aus.

In diesem Zusammenhang beschreibt das vorliegende Protokoll ein neuartiges Angstmodell, um die absichtlichen oder unbeabsichtigten Muster sozialer Isolation im modernen Leben nachzuahmen. Dieses Modell der sozialen Isolation (SI) minimiert wahrgenommene Ablenkungen und Invasivität und verwendet erwachsene Wildtyp-C57BL/6-Mäuse und Sprague-Dawley-Ratten (SD). Das hier vorgestellte Protokoll konzentriert sich auf das Angstmäusemodell, das auf unseren veröffentlichten Beweisen basiert, die ein erhöhtes angstähnliches Verhalten, Aggression, verminderte Kognition und erhöhte Neuroinflammation als Folge der sozialen Isolation zeigten22,23,24. Angstähnliches Verhalten wird durch die Tests Elevated Plus Maze (EPM) und Open Field (OF) bestätigt, während die kognitive Funktion durch neuartige Objekterkennungs- (NOR) und neuartige Kontexterkennungstests (NCR) gemessen wird. Dieses Modell ist nützlich für die Untersuchung von Angstzuständen und verwandten Störungen, kann aber auch angepasst oder modifiziert werden, um die natürliche Progression und Entwicklung leichter kognitiver Beeinträchtigungen sowie metabolischer Veränderungen aufgrund von Stress zu untersuchen.

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Protokoll

Alle Tierversuche werden nach den vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der University of Southern California (USC) genehmigten Protokollen durchgeführt, und alle Methoden werden in Übereinstimmung mit den relevanten Richtlinien, Vorschriften und Empfehlungen durchgeführt.

1. Tiere

  1. Holen Sie die Genehmigung der zuständigen Tierpflegeausschüsse für die Studie ein.
  2. Stellen Sie das Vivarium auf einen Dunkel-Hell-12-Stunden-Zyklus mit kontrollierter Temperatur und Luftfeuchtigkeit zwischen 24 ± 2 °C bzw. 50%-60% ein.
  3. Erhalten Sie männliche und/oder weibliche Wildtyp-C57BL/6-Mäuse im Alter von 6-8 Wochen. Nachdem Sie die Tiere nach Geschlecht geschichtet haben, ordnen Sie sie nach dem Zufallsprinzip einer der folgenden Gruppen zu: 1) Gruppenhaus mit Fahrzeugbehandlung; 2) Gruppenhaus mit medikamentöser Behandlung; 3) soziale Isolation mit Fahrzeugbehandlung; oder 4) soziale Isolation mit Drogenbehandlung. Ziel sind mindestens vier Mäuse pro Gruppe und Geschlecht (idealerweise sechs Mäuse pro Gruppe).
  4. Nach der Ankunft der Mäuse gewöhnen Sie sie für mindestens 24 Stunden an das Vivarium. Die Mäuse sollten einzeln untergebracht ankommen.

2. Käfigaufbau

  1. Für Tiere mit sozialer Isolation nehmen Sie einen Standard-Mauskäfig (75 in 2 Bodenfläche) und fügen Sie die Hälfte der Menge an Einstreu und ein 1 in2 Stück Baumwolle (oder gleichwertig) zum Nisten hinzu.
  2. Wickeln Sie die Außenwände der Käfige in undurchsichtige, schwarze Plastiktüten (oder gleichwertig) und sichern Sie sie mit Klebeband. Stellen Sie sicher, dass die Mäuse die Außenumgebung oder die umliegenden Tiere nicht sehen können.
    1. Lassen Sie die Ober- und Unterseite des Käfigs unverpackt, es sei denn, die Mäuse können benachbarte Tiere durch sie hindurch sehen.
    2. Achten Sie beim Einwickeln darauf, dass kein Segment des Beutels von der Innenseite des Käfigs aus zugänglich ist. Dies soll verhindern, dass das Tier den Beutel auseinanderreißt.
    3. Fügen Sie keine Form der Umweltanreicherung wie Spielzeug oder Laufräder hinzu.
  3. Legen Sie die Mäuse vorsichtig und vorsichtig in die vorbereiteten Käfige. Stellen Sie Nahrung und Wasser ad libitum zur Verfügung.
  4. Hauskontrollmäuse in Gruppen von zwei oder drei unter normalen Käfigbedingungen (dh in einem Standard-Mauskäfig [75 in 2 Bodenfläche], eine volle Menge an Bettwäsche, ein 2 in2 Stück Baumwolle oder gleichwertig zum Nisten und keine Verpackung von undurchsichtigen Taschen).
    1. Stellen Sie sicher, dass die in der Gruppe untergebrachten Mäuse miteinander kompatibel sind (d. H. Es gibt keine Kämpfe / Konflikte zwischen ihnen). Wenn ein Konflikt auftritt, entfernen Sie den Angreifer und schließen Sie ihn von der Analyse aus.
    2. Trennen Sie die Unterbringung männlicher und weiblicher Mäuse und halten Sie Abstand zwischen den Männchen und Weibchen, um die Möglichkeit zu vermeiden, die endokrinen Spiegeländerungen weiblicher Mäuse aufgrund ihrer Geruchsfähigkeit zu beeinflussen.

3. Pflege und Behandlung während der sozialen Isolation

  1. Stören Sie die Mäuse während der sozialen Isolation so minimal wie möglich. Führen Sie alle Verfahren und Aktivitäten, wie z. B. Käfigwechsel und Behandlungsverabreichung, während ihrer aktiven Zeit (d. H. Während des Dunkelzyklus) und unter minimalen Lärmbelästigungen durch.
  2. Wechseln Sie die Käfige nur einmal pro Woche während des Dunkelzyklus. Derselbe Plastikbeutel kann entfernt und in neue Käfige umgewickelt werden, es sei denn, es liegt ein erheblicher Schaden vor.
    1. Für Kontrollmäuse (Gruppenmäuse) wechseln Sie die Käfige zweimal pro Woche oder bei Bedarf während des Dunkelzyklus.
  3. Stellen Sie sicher, dass die Mäuse viel Wasser und Nahrung haben, um mindestens 1 Woche zu halten.
  4. Isolieren Sie die Mäuse für mindestens 4 Wochen (oder gruppieren Sie sie), um optimale Ergebnisse zu erzielen.

4. Agar-Medikament / Behandlungsvorbereitung - eine nichtinvasive medikamentöse Behandlung

  1. Wenn Behandlungen (z. B. untersuchte Medikamente) in die Studie einbezogen werden, verabreichen Sie die Behandlung idealerweise mit so wenig Handhabung wie möglich unter Verwendung von Agarformen. Wege wie Injektion und Mundsonde verursachen zusätzlichen Stress für die Mäuse, der zu einem Störfaktor der Angst werden kann.
  2. Passen Sie den Zeitpunkt und die Häufigkeit der Behandlung basierend auf der Art des verwendeten Arzneimittels an.
    HINWEIS: In dieser Studie wurden 2 mg/kg Dihydromyricetin (DHM, [(2R,3R)-3,5,7-trihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-2,3-dihydrochromen-4-on]) als Behandlung verwendet. DHM wurde täglich in einer Einzeldosis während der Dunkelphase der letzten 2 Wochen der Isolationsphase (oder Gruppenhaus) verabreicht.
  3. Um die Behandlung vorzubereiten, fügen Sie 3% (w / v) Agar in entionisiertem (DI) Wasser hinzu und erhitzen Sie es auf ~ 90 ° C, um sich aufzulösen. Die Lösung wird sprudeln. Verschütten oder Überkochen verhindern.
    HINWEIS: Erhitzen Sie die Lösung in einem Glaskolben in kurzen Abständen von 10 s Mikrowelle.
    ACHTUNG: Die Glaswaren werden heiß sein. Tragen Sie beim Umgang mit der Lösung eine geeignete persönliche Schutzausrüstung (PSA).
  4. Schwenken Sie die Lösung und sorgen Sie optisch für eine homogene Lösung.
    HINWEIS: Die Lösung sollte durchscheinend und hellgelb bis hellbraun gefärbt sein.
  5. Während die Lösung noch warm ist, fügen Sie 5% (w / v) Saccharose und die gewünschte Dosis der Behandlung hinzu. Fügen Sie nur Saccharose hinzu und fügen Sie der Fahrzeugsteuerung nicht die Behandlung von Interesse hinzu.
  6. Schwenken Sie die Lösung und sorgen Sie optisch für eine homogene Lösung. Dann gießen Sie die Lösung in eine Form und lassen Sie sie bei Raumtemperatur abkühlen, um zu erstarren. Wenn die Behandlung lichtempfindlich ist, achten Sie darauf, sie vor Licht zu schützen.
    HINWEIS: Die Lösung sollte leicht viskos sein.
  7. Nach dem Erstarren den Agar in Würfel von 0,5 cm x 0,5 cm x 0,5 cm schneiden und bis zur Verabreichung bei 4 °C lagern.
  8. Um die Behandlung zu verabreichen, legen Sie einen einzelnen Würfel auf ein kleines Wiegeboot. Während der Dunkelphase des Hell-Dunkel-Zyklus das Agarwaagenboot ruhig und vorsichtig in einzelne Käfige legen, ohne die Maus zu berühren. Lassen Sie die Maus das Agar verzehren.
    HINWEIS: Mäuse benötigen normalerweise 15-45 Minuten, um das Agar vollständig zu verzehren.
  9. Bestätigen Sie den vollständigen Verbrauch des Agars und entfernen Sie dann vorsichtig das Wiegeboot aus dem Käfig. Wiederholen Sie diesen Vorgang nach Bedarf.
  10. Bereiten Sie Agarwürfel wöchentlich zu, um frisch zu bleiben und Verunreinigungen zu vermeiden.

5. Verhaltensanalyse

  1. Führen Sie Verhaltenstests 24 Stunden nach dem letzten Tag der 4-wöchigen (oder mehr) Isolationszeit durch. Führen Sie Tests während der Dunkelphase unter indirekter roter Beleuchtung durch und zeichnen Sie sie mit einer Videokamera auf.
  2. Ordnen Sie mindestens drei Personen an, die eine manuelle Offline-Bewertung auf doppelblinde Weise durchführen, um Verzerrungen und Fehler zu minimieren.
  3. Erhöhtes Plus-Labyrinth (EPM)
    1. Bereiten Sie das EPM-Gerät vor. Die in diesem Protokoll verwendete Vorrichtung wurde kommerziell erworben (siehe Materialtabelle) und aus undurchsichtigem Kunststoff mit zwei offenen Armen und zwei geschlossenen Armen (je 33 cm x 5 cm, offene Arme senkrecht zu den geschlossenen Armen) mit einer Mittelplattform von 5 cm x 5 cm hergestellt. Heben Sie das Gerät 50 cm über den Boden.
    2. Legen Sie das Tier auf die Mitte des Apparates, mit Blick auf einen offenen Arm. Lassen Sie das Tier 5 Minuten lang erkunden und zeichnen Sie seine Aktivität mit einer Videokamera auf.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    3. Bewerten Sie das Verhalten der Mäuse offline basierend auf der Zeit, die Sie in offenen Armen, geschlossenen Armen und der mittleren Plattform mit einer Stoppuhr verbringen. Starten Sie die Stoppuhr, wenn die Maus mindestens drei Pfoten in den jeweiligen Arm oder die Plattform legt.
  4. Test im offenen Feld (OF)
    1. Bereiten Sie das OF-Gerät vor. Die in diesem Protokoll verwendete Vorrichtung (siehe Materialtabelle) bestand aus opakem Kunststoff mit den Maßen 50 cm x 50 cm x 38 cm (Länge x Breite x Höhe).
    2. Zeichne quadratische Raster (je 10 cm x 10 cm) auf dem Feld für insgesamt 25 Raster.
    3. Stellen Sie das Tier in die Mitte des Feldes und lassen Sie es für 10 Minuten erkunden. Zeichnen Sie ihre Aktivitäten auf einer Videokamera auf.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie die gesamte Oberfläche gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    4. Bewerten Sie das Verhalten der Mäuse offline basierend auf der Zeit, die in der zentralen Zone verbracht wurde, der Zeit, die in den Ecken verbracht wurde, der insgesamt zurückgelegten Strecke und der Häufigkeit, mit der die Maus aufgezogen wurde.
      1. Verwenden Sie eine Stoppuhr, um die in der Mitte oder Ecke verbrachte Zeit aufzuzeichnen. Starten Sie die Stoppuhr, wenn die Maus mindestens drei Pfoten in den jeweiligen Bereich legt.
      2. Verwenden Sie einen Zähler, um die zurückgelegte Strecke und die Häufigkeit der Aufzucht aufzuzeichnen. Zählen Sie die Anzahl der Quadrate, die die Maus betritt (wenn die Maus mindestens drei Pfoten in das Quadrat legt). Zählen Sie die Aufzucht, wenn die Maus deutlich auf den Hinterpfoten steht. Zählen Sie nicht, wenn die Maus aufsteht und sich an die Wände lehnt oder wenn sie aufsteht, um sich zu pflegen.
  5. NOR-Test (Novel Object Recognition)
    1. Führen Sie diesen Test über 3 Tage durch. Bereiten Sie an Tag 1 ein Freilandgerät von 50 cm x 50 cm x 38 cm (Länge x Breite x Höhe) vor. Stellen Sie das Tier in die Mitte des offenen Feldes und lassen Sie es für 5 min gewöhnen. Setzen Sie das Tier dann wieder in seinen Heimatkäfig.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    2. Bereiten Sie an Tag 2 den gleichen Freilandapparat vor und platzieren Sie zwei identische Objekte, z. B. einen kleinen Würfel. Platzieren Sie sie symmetrisch etwa 20 cm auseinander. Stellen Sie das Tier in die Mitte des Geräts und lassen Sie es 5 Minuten lang erkunden. Setzen Sie das Tier dann wieder in seinen Heimatkäfig.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    3. Bereiten Sie an Tag 3 den gleichen Freilandapparat und eines der Objekte aus Tag 2 (d.h. einen kleinen Würfel) vor, der als vertrautes Objekt fungiert. Platzieren Sie ein anderes, unähnliches neuartiges Objekt, wie z.B. eine Holzpyramide, symmetrisch zu dem bekannten Objekt in einem Abstand von etwa 20 cm. Lassen Sie das Tier 3 Minuten lang erkunden und zeichnen Sie seine Aktivität mit einer Videokamera auf.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    4. Bewerten Sie das Verhalten der Mäuse offline basierend auf der Zeit, die Sie mit der Erforschung des vertrauten Objekts und des neuartigen Objekts verbracht haben. Berechnen Sie den Objekterkennungsindex (ORI%), wobei figure-protocol-1tf und tn die Zeiten der Erforschung der bekannten bzw. neuartigen Objekte darstellen.
  6. Neuartiger Kontexterkennungstest (NCR)
    1. Führen Sie diesen Test über 2 Tage durch. Bereiten Sie zwei deutlich geformte offene Felder und zwei Paare von deutlich geformten Objekten vor. Die OF-Apparatur kann als einer der Kontexte (offenes Feld) verwendet werden. Der andere Kontext sollte von ähnlicher Größe, aber unterschiedlicher Form sein, z. B. ein rundes offenes Feld.
    2. Platzieren Sie an Tag 1 ein Paar identischer Objekte (d. H. Zwei Würfel) im quadratischen Kontext und das andere Paar identischer Objekte (d. H. Zwei Pyramiden) im runden Kontext. Objekte sollten symmetrisch 15-20 cm voneinander entfernt platziert werden.
    3. Stellen Sie das Tier in die Mitte und lassen Sie es für 5 Minuten in einem Kontext erkunden. Wiederholen Sie dies im anderen Kontext. Dann setzen Sie das Tier zurück in seinen Heimatkäfig.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    4. Tauschen Sie an Tag 2 eines der Objekte aus einem Kontext mit dem anderen aus (d. H. Platzieren Sie einen Würfel und eine Pyramide im quadratischen Kontext und einen Würfel und eine Pyramide im runden Kontext).
    5. Stellen Sie das Tier in die Mitte und lassen Sie es für 3 Minuten erkunden. Zeichnen Sie ihre Aktivitäten auf einer Videokamera auf. Die Tiere müssen nicht in beiden Kontexten erfasst werden.
      1. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Tier, indem Sie alle Oberflächen gründlich mit Desinfektionsmittel (70% Ethylalkohol) abwischen. Stellen Sie sicher, dass der gesamte Nagetierkot abgewischt wird.
    6. Bewerten Sie das Verhalten der Mäuse offline basierend auf der Zeit, die Sie für die Untersuchung der verschiedenen Objekte aufgewendet haben. Berechnen Sie den Erkennungsindex (RI%) als den Anteil der Zeit, die für die Untersuchung des neuartigen "aus dem Kontext gerissenen" Objekts (d. h. der Pyramide im quadratischen Kontext) im Vergleich zum bekannten "kontextbezogenen" Objekt (d. h. dem Würfel im quadratischen Kontext) aufgewendet wird. figure-protocol-2.

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Ergebnisse

Alle repräsentativen Ergebnisse und Zahlen wurden aus unseren aktuellen Veröffentlichungen22,23 modifiziert. Um die Auswirkungen sozialer Isolation auf Angst und exploratives Verhalten zu bewerten, wurden EPM- und OF-Tests 24 Stunden nach dem Enddatum der 4-wöchigen sozialen Isolationsphase durchgeführt. Sozial isolierte Mäuse verbrachten signifikant weniger Zeit im offenen Arm (1,28 ± 0,17 min) als die Kontrolle (2,31 ± 0,27 min) und eine signifikant längere Zei...

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Diskussion

Zu den kritischen Schritten des Protokolls gehören die ordnungsgemäße Einrichtung der sozialen Isolationskäfige (d. H. Umwickeln von undurchsichtigen Beuteln und Reduzierung der Menge an Einstreu), die Minimierung der Handhabung und Störung von Mäusen während der gesamten Isolationszeit und die Sicherstellung, dass die Mäuse das Agar vollständig mit Drogen erhalten und konsumieren. Es ist wichtig, dass der Vivarium- oder Gehäusezustand auf einer konstanten Temperatur und Luftfeuchtigkeit gehalten wird und extern...

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Offenlegungen

Die Autoren erklären keine Interessenkonflikte.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde finanziert durch das National Institute of Health Stipendium AA17991 (an J.L.), Carefree Biotechnology Foundation (an J.L.), University of Southern California (USC), USC Graduate School Travel/Research Award (an S.W.) Saudi Arabia Cultural Mission Scholarship (an A.A.O.) und Army Health Professions Scholarship Program (an A.S.S.).

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Schwarze PlastiktütenOffice Depot79193224" x 32"
Elevated Plus MazeSD InstrumentsNASchwarze Farbe
Open Field GehäuseSD InstrumentsNA WeißeFarbe
Select AgarInvitrogen30391-023
Quadratische Baumwolle zum Nisten (Nestlet)Ancare CorporationNC9365966Teilen Sie ein quadratisches Stück von 2" in 4 Stücke, um ein quadratisches Stück von 1" für die Isolationsgruppe
SaccharoseSigmaS1888-1KG
WägeschiffchenSIgmaHS1420AKleines, quadratisches weißes Polystyrol
zu erhalten

Referenzen

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Schlagwörter

Angstmodell bei Nagernnicht invasives Stressmodellangst hnliches Verhaltenkognitive Beeintr chtigungC57BL 6 M useEinzelhaltungUnterbringung in lichtundurchl ssigen K figenOpen Field TestObjekterkennungstest Novel Object Recognition

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