Method Article

Ein Open-Source-Virtual-Reality-System zur Messung des räumlichen Lernens bei kopfgebundenen Mäusen

DOI:

10.3791/64863

March 3rd, 2023

In This Article

Summary

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Hier stellen wir ein vereinfachtes Open-Source-Hardware- und Software-Setup zur Untersuchung des räumlichen Lernens von Mäusen mit Hilfe von Virtual Reality (VR) vor. Dieses System zeigt einer kopfgebundenen Maus, die auf einem Rad läuft, eine virtuelle lineare Spur an, indem es ein Netzwerk von Mikrocontrollern und einen Einplatinencomputer verwendet, auf dem ein einfach zu bedienendes grafisches Python-Softwarepaket ausgeführt wird.

Abstract

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Kopfgebundene Verhaltensexperimente an Mäusen ermöglichen es Neurowissenschaftlern, die Aktivität neuronaler Schaltkreise mit hochauflösenden elektrophysiologischen und optischen Bildgebungswerkzeugen zu beobachten und gleichzeitig einem sich verhaltenden Tier präzise sensorische Reize zu geben. In jüngster Zeit haben Studien an Menschen und Nagetieren mit Virtual-Reality-Umgebungen (VR) gezeigt, dass VR aufgrund der äußerst präzisen Kontrolle von Parametern wie räumlichen und kontextuellen Hinweisen ein wichtiges Werkzeug ist, um die neuronalen Mechanismen aufzudecken, die dem räumlichen Lernen im Hippocampus und im Kortex zugrunde liegen. Das Einrichten virtueller Umgebungen für das räumliche Verhalten von Nagetieren kann jedoch kostspielig sein und erfordert einen umfangreichen Hintergrund in Ingenieurwesen und Computerprogrammierung. Hier stellen wir ein einfaches, aber leistungsfähiges System vor, das auf kostengünstiger, modularer Open-Source-Hard- und Software basiert und es Forschern ermöglicht, räumliches Lernen in kopfgebundenen Mäusen mithilfe einer VR-Umgebung zu untersuchen. Dieses System verwendet gekoppelte Mikrocontroller, um die Fortbewegung zu messen und Verhaltensreize zu liefern, während kopfgebundene Mäuse auf einem Rad in Verbindung mit einer virtuellen linearen Spurumgebung laufen, die von einem grafischen Softwarepaket gerendert wird, das auf einem Einplatinencomputer läuft. Der Schwerpunkt auf verteilter Verarbeitung ermöglicht es den Forschern, flexible, modulare Systeme zu entwickeln, um komplexe räumliche Verhaltensweisen bei Mäusen zu ermitteln und zu messen, um den Zusammenhang zwischen der Aktivität neuronaler Schaltkreise und dem räumlichen Lernen im Gehirn von Säugetieren zu bestimmen.

Introduction

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Räumliche Navigation ist ein ethologisch wichtiges Verhalten, bei dem Tiere die Merkmale neuer Orte in einer kognitiven Karte kodieren, die verwendet wird, um Bereiche möglicher Belohnungen zu finden und potenzielle Gefahrenbereiche zu vermeiden. Die kognitiven Prozesse, die der räumlichen Navigation zugrunde liegen, sind untrennbar mit dem Gedächtnis verbunden und teilen sich ein neuronales Substrat im Hippocampus1 und im Kortex, wo neuronale Schaltkreise in diesen Bereichen eingehende Informationen integrieren und kognitive Karten von Umgebungen und Ereignissen für den späteren Abrufbilden 2. Während die Entdeckung von....

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Protocol

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Alle Verfahren in diesem Protokoll wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee des New York State Psychiatric Institute genehmigt.

HINWEIS: Ein Einplatinencomputer wird verwendet, um eine visuelle VR-Umgebung anzuzeigen, die mit dem Ausführen einer kopfgebundenen Maus auf einem Rad koordiniert ist. Bewegungsinformationen werden als serieller Eingang von einem ESP32-Mikrocontroller empfangen, der einen mit der Radachse gekoppelten Drehgeber liest. Die VR-Umgebung wird mit OpenGL-Hardwarebeschleunigung auf der Raspberry Pi-GPU gerendert, die das pi3d-Python-3D-Paket für Raspberry Pi verwendet. Die gerenderte Umgebung wird dann ....

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Results

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Dieses Open-Source-Virtual-Reality-Verhaltens-Setup ermöglichte es uns, das Leckverhalten als Auslesen des räumlichen Lernens zu quantifizieren, während kopfgebundene Mäuse durch eine virtuelle lineare Spurumgebung navigierten. Sieben C57BL/6-Mäuse beiderlei Geschlechts im Alter von 4 Monaten wurden auf einen eingeschränkten Wasserplan gesetzt und zunächst darauf trainiert, kontinuierlich auf niedrigem Niveau zu lecken, während sie auf dem Rad liefen, um zufällige räumliche Belohnungen zu erhalten ("zufällige Nahrungssuc.......

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Discussion

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Dieses Open-Source-VR-System für Mäuse funktioniert nur, wenn die seriellen Verbindungen zwischen den rotierenden und verhaltensfähigen ESP32-Mikrocontrollern und dem Einplatinencomputer korrekt hergestellt sind (Schritt 2), was mit dem seriellen IDE-Monitor bestätigt werden kann (Schritt 2.4.5). Für erfolgreiche Verhaltensergebnisse aus diesem Protokoll (Schritt 4) müssen die Mäuse an den Apparat gewöhnt sein und sich wohl fühlen, auf dem Rad zu laufen, um flüssige Belohnungen zu erhalten (Schritte 4.3-4.5). Dies erford.......

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Disclosures

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Clay Lacefield ist der Gründer und Betreuer von OpenMaze.org, das Designs für die in diesem Protokoll verwendete OMwSmall-Leiterplatte kostenlos zum Download bereitstellt.

Acknowledgements

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Wir bedanken uns bei Noah Pettit vom Harvey-Labor für die Diskussion und die Anregungen bei der Entwicklung des Protokolls in diesem Manuskript. Diese Arbeit wurde durch einen BBRF Young Investigator Award und NIMH 1R21MH122965 (G.F.T.) unterstützt, zusätzlich zu NINDS R56NS128177 (R.H., C.L.) und NIMH R01MH068542 (R.H.).

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
1/4" Durchmesser AluminiumstangeMcMaster-Carr9062K263" Länge für Radachse
1/4"-20 Zylinderschrauben, 3/4" lang (x2)Amazon.comB09ZNMR41Vzur Befestigung von Kopfstützenhaltern an optischen Stiften
2"x7" T-geschlitzte Aluminiumstange (x2)8020.net1020Rad-/Tiermontagerahmen
6" Durchmesser, 3" breiter Acrylzylinder (1/8" dick)Canal Plastics33210090702Laufrad (benutzerdefinierte Breite geschnitten bei canalplastics.com)
8-32 x 1/2" InnensechskantschraubenMcMaster-Carr92196A194Befestigung des Kopfpfostenhalters am optischen Stift 
Verstellbarer Arm (14")Amazon.com B087BZGKSLzum Halten/Einstellen des Leckauslaufs
Analysecode (MATLAB)benutzerdefinierteDatei unter github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Analysis Code
Achsbefestigungsflansch, 1/4" IDPololu1993für die Montage von Rad an Achse
Kugellager (5/8" AD, 1/4" ID, x2)McMaster-Carr57155K324zur Montage der Radachse am Rahmen
Behavior ESP32 CodeCustomWritten Datei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Arduino Code/Behavior Board
Schwarz opak matte Acrylplatten (1/4" dick)Canal Plastics32918353422lasergeschnittene Datei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR Bildschirmmontage
Klare Acrylplatte (1/4" dick)Canal Plastics32920770574Lasercut-Datei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR Radbaugruppe
ESP32 devKitC v4 (x2)Amazon.comB086YS4Z3FMikrocontroller für Verhalten und Drehgeber
ESP32 ShieldOpenMaze.orgOMwSmallBeschreibung bei www.openmaze.org (https://claylacefield.wixsite.com/openmazehome/copy-of-om2shield). ZIP-Gerber-Dateien unter: https://github.com/claylacefield/OpenMaze/tree/master/OM_PCBs
Befestigungselemente und Klammern 8020.net4138, 3382,3280für Radrahmenhalterungen
GoniometerEdmund Optics66-526, 66-527optional für das Verhalten. Feinabstimmungskopf für die Abbildung
HallPassVR Python-Codebenutzerdefiniertegeschriebene Datei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/HallPassVR
Kopfpfostenhalterbenutzerdefiniertes Design3D-Designdatei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR Kopfhalterung / Kopfstütze Klemme
LED-ProjektorTexas InstrumentsDLPDLCR230NPEVModer anderer kleiner LED-Projektor
Lick AuslaufVWR20068-638(oder ~16 G Injektionsschlauch aus Metall)
M 2,5 x 6 StellschraubenMcMaster-Carr92015A097Sicherung des Kopfpfostens
Mattweißes DiffusionspapierAmazon.comSiebmaterial
Kopfstützenkundenspezifisches Design3D-Designdatei an github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR Kopfhalterung / Kopfpfostendesigns
Verschiedene Schläuche und Schlauchadapter (1/16" ID)für den Bau der Wasserleitung
Optisches SteckbrettThorlabsnach Kundenwunsch
Optische Stifte, 1/2" Durchmesser (2x)ThorlabsTR4für die Einrichtung der Kopffixierung
Verarbeitungvon benutzerdefinierterDatei mit github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Processing Code
Raspberry Pi 4Braspberry.com, adafruit.comEinplatinencomputer zum Rendern der HallPassVR-Umgebung.
Rechtwinklige KlemmeThorlabsRA90für die Einrichtung der Kopffixierung
Drehgeber (Quadratur, 256 Schritte)DigiKeyENS1J-B28-L00256Lzur Messung der Raddrehung
Drehgeber ESP32 CodebenutzerdefinierteDatei bei github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Arduino Code/Drehgeber
SCIGRIP 10315 AcrylzementAmazon.com
WellenkupplungMcMaster-Carr9861T426zum Koppeln der Drehgeberwelle mit der Achse
Silberspiegel AcrylplattenCanal Plastics32913817934lasergeschnittene Datei an github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR Siebbaugruppe
MagnetventilParker003-0137-900zur Verabreichung von Wasserbelohnungen
, aus Metall

References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lisman, J., et al. Viewpoints: How the hippocampus contributes to memory, navigation and cognition. Nature Neuroscience. 20 (11), 1434-1447 (2017).
  2. Buzsaki, G., Moser, E. I. Memory, navigation and theta rhythm in the hippocampal-entorhin....

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