Das Protokoll fasst die Best Practices zur Minimierung der mikrobiellen Keimbelastung in einer Reinraumumgebung zusammen und umfasst Strategien wie Umweltüberwachung, Prozessüberwachung und Produktsterilitätsprüfung. Sie ist relevant für Produktions- und Prüfeinrichtungen, die die aktuellen Standards der guten Gewebepraxis und die aktuellen Standards der guten Herstellungspraxis erfüllen müssen.
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Methodenartikel
Mikrobielle Kontroll- und Überwachungsstrategien für Reinraumumgebungen und zelluläre Therapien
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Ein gut validiertes und ganzheitliches Programm, das robuste Kittel-, Reinigungs-, Umweltüberwachungs- und Personalüberwachungsmaßnahmen umfasst, ist entscheidend für die Minimierung der mikrobiellen Keimbelastung in den Produktionsstätten für Zelltherapien und den entsprechenden Testlabors, um sicherzustellen, dass die Einrichtungen in einem Zustand der Kontrolle arbeiten. Die Gewährleistung der Produktsicherheit durch Qualitätskontrollmaßnahmen, wie z. B. Sterilitätstests, ist eine regulatorische Anforderung sowohl für minimal manipulierte (§ 361) als auch für mehr als minimal manipulierte (§ 351) menschliche Zellen, Gewebe und zelluläre und gewebebasierte Produkte (HCT/Ps). In diesem Video bieten wir eine schrittweise Anleitung zur Entwicklung und Integration der besten aseptischen Praktiken für den Betrieb in einer Reinraumumgebung, einschließlich Ankleiden, Reinigen, Bereitstellen von Materialien, Umgebungsüberwachung, Prozessüberwachung und Produktsterilitätsprüfung mit direkter Inokulation, die von der United States Pharmacopeia (USP<71>) und der alternativen Sterilitätstestmethode der National Institutes of Health (NIH) bereitgestellt werden. Dieses Protokoll ist als Referenzleitfaden für Betriebe gedacht, von denen erwartet wird, dass sie die aktuellen guten Gewebepraktiken (cGTP) und die aktuellen guten Herstellungspraktiken (cGMP) erfüllen.
Einleitung
Die Implementierung eines starken mikrobiellen Überwachungsprogramms durch Umweltüberwachung (EM), Prozessüberwachung und Produktsterilitätstests ist eine regulatorische Anforderung für die aktuelle gute Gewebepraxis (cGTP) und die aktuelle gute Herstellungspraxis (cGMP) in Zelltherapielabors1. Darüber hinaus erwartet die US-amerikanische Food and Drug Administration (FDA), dass das Labor, das die Qualitätskontrolle (QC) des Produkts durchführt, auch Einrichtungen und Kontrollen einsetzt, die mit denen vergleichbar sind, die für aseptische Abfüllvorgänge verwendet werden2.
Dieses Protokoll be....
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Protokoll
1. Aseptische Praktiken
- Personalkleidung für einen Reinraumraum
HINWEIS: Dieses Verfahren basiert auf dem anfänglichen Anziehen in einem nicht klassifizierten Raum, gefolgt vom Eintritt in einen Bereich der Internationalen Organisation für Normung (ISO) 8 und dann in einen ISO7-Bereich. Dieses Verfahren ist relevant für Labore, die versuchen, bestehende Räume in eine Reinraumfunktion umzuwandeln. Im Idealfall würden alle anfänglichen Kleider in einem ISO8-klassifizierten Raum (nicht in einem nicht klassifizierten Raum) stattfinden.- Sichere lose Haare. Waschen Sie sich die Hände und ziehen Sie sich ein Peeling an (langärmelige Peeli....
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Ergebnisse
Die erwarteten Ergebnisse sind in Tabelle 1 beschrieben. Die EM-Daten sollten überprüft und mit einer geeigneten Untersuchung und Reaktion auf Maßnahmen, Warnungen oder Abweichungen von ISO-Grenzwerten nachverfolgt werden. Tritt eine Abweichung bei nicht lebensfähigen Partikeln auf, sollte nach ISO 14644-Anhang A, Abschnitt A.5.57 vorgegangen werden. Wenn die Abweichung auf ein sofort erkennbares abnormales Ereignis zurückzuführen ist, sollten die ursprünglichen Probenahmeergebnis.......
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Diskussion
Es gibt mehrere kritische Bereiche in diesem Protokoll, darunter die Aufrechterhaltung der aseptischen Technik und des unidirektionalen Luftstroms in Reinräumen und den BSCs. Zu den Best Practices gehört das langsame und bewusste Handeln, um Turbulenzen zu minimieren. Aseptische Manipulationen sollten von der Seite des Produkts durchgeführt werden, nicht von oben. Empfohlen werden eine Closed-System-Verarbeitung und die Verwendung von endsterilisierten Rohstoffen. Das Sprechen in kritischen Bereichen und das Anlehnen an .......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären keine Interessenkonflikte.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde durch das Intramurale Forschungsprogramm des National Institutes of Health Clinical Center unterstützt. Der Inhalt liegt in der alleinigen Verantwortung der Autoren und stellt nicht die offizielle Meinung der National Institutes of Health dar.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 20-25°; C Inkubator | Laborpräferenz | ||
| 30-35&Grad; C Inkubator | Laborpräferenz | ||
| Händedesinfektionsmittel | Laborpräferenz | ||
| BacT/ALERT Dual-T-Gerät | BioMerieux Industry | ||
| Bartabdeckung | Laborpräferenz | ||
| Biosicherheitswerkbank (BSC) | Laborpräferenz | ||
| Reinraumschuhe | Laborpräferenz Laborpräferenz | ||
| Fluidthioglykollat-Medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handstaubsauger | Contec | 2665LF | |
| Injektionsnadel | Laborpräferenz | ||
| iFA+ BacT/ALERT-Flasche | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT-Flasche | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetischer Kopf | Laborpräferenz | ||
| Laser-Partikelzähler | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Laborpräferenz | ||
| Nicht steriles Bouffant | Laborpräferenz | ||
| Nicht sterile Handschuhe | Laborpräferenz | ||
| Nicht sterile Schuhüberzieher | Laborpräferenz | ||
| sterile Ärmelüberzüge | Laborpräferenz | ||
| Parafilm | Laborpräferenz | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastiktüte | Laborpräferenz | ||
| Sabouraud Dextrose-Agar mit Lecithinase und Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, bestrahlter |
| Sabouraurd Dextrose-Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, |
| bestrahlte Schutzbrille | Laborpräferenz | ||
| Scrubs (oben und unten) | Laborpräferenz | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Steriler 70%iger Isopropylalkohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Steriles Alkoholtuch | Laborpräferenz | ||
| Steriler Stiefel Bezüge | Kimberly Clark | Cat# variiert je nach Größe | |
| Steriler Overall | Kimberly Clark | Cat# variiert je nach Größe | |
| Sterile Gesichtsmaske | Laborpräferenz | ||
| Sterile Handschuhe | Laborpräferenz | ||
| Sterile | Kapuze Kimberly Clark | Cat# variiert je nach Größe | |
| Sterile fusselarme | Tücher Texwipe | TX3210 | |
| Sterile Mopp-Reinigungspads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile Sleeve-Abdeckungen | Kimberly Clark | 36077 | |
| Steriler Spreizstab | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile Spritze | Laborpräferenz | ||
| Klebrige Matten | Laborpräferenz | ||
| Tryptische Soja-Agar ( TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, bestrahltes |
| tryptisches Soja-Agar mit Lecithinase und Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, bestrahlte |
| tryptische Sojabrühe (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Laborpräferenz | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable Air Sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab Präferenz |
Referenzen
- Cundell, T., Atkins, J. W., Lau, A. F. Sterility testing for hematopoietic stem cells. Journal of Clinical Microbiology. , 10.1128/jcm.01654-22 (2023).
- United States Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Steril....
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Nachdrucke und Genehmigungen
