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Methodenartikel

Du-Moxibustion in einem Mausmodell der ankylosierenden Spondylitis

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DOI:

10.3791/65586

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27. Oktober 2023

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1School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2School of First Clinical Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 3External Treatment Center, Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine

In diesem Artikel

Zusammenfassung

In dieser Arbeit werden die Operationsverfahren und Vorsichtsmaßnahmen, die während der Du-Moxibustion bei der Behandlung von Morbus Bechterew bei experimentellen Mäusen zu treffen sind, detailliert beschrieben.

Zusammenfassung

Morbus Bechterew (AS) ist eine sich fortschreitende Form der Arthritis, die vor allem das Achsenskelett betrifft. Diese Erkrankung betrifft vor allem die Wirbelsäule und das Iliosakralgelenk. Im späteren Stadium der Erkrankung kann es zu einer Verschmelzung der Wirbelsäule und des Iliosakralgelenks kommen, die zu Wirbelsäulensteifigkeit und Kyphose sowie zu Schwierigkeiten beim Gehen führt, was die Qualität der Arbeit und der Aktivitäten des täglichen Lebens ernsthaft beeinträchtigt und eine schwere Belastung für den Patienten, die Familie und die Gesellschaft darstellt. Der nicht-pharmakotherapeutischen Behandlung von AS wird zunehmend Aufmerksamkeit geschenkt. Moxibustion ist eine uralte therapeutische Technik, die in der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) verwendet wird. Die Du-Moxibustion-Therapie, eine einzigartige und innovative äußerliche Behandlung, die auf der Grundlage der gewöhnlichen Moxibustion entwickelt wurde, hat eine eindeutige therapeutische Wirkung auf AS. Du-Moxibustion kombiniert gekonnt die kompatiblen Techniken der TCM, um Meridiane, Akupunkturpunkte, chinesische Kräutermedizin und Moxibustion zu integrieren. In dieser Arbeit werden die Operationsverfahren und Vorsichtsmaßnahmen, die während der Du-Moxibustion bei Versuchsmäusen zu treffen sind, detailliert beschrieben, um eine experimentelle Grundlage für die Untersuchung des Mechanismus der Du-Moxibustion bei der Behandlung von AS zu schaffen.

Einleitung

Morbus Bechterew (AS) ist eine sich fortschreitende Form der Arthritis, die vor allem das Achsenskelett betrifft. Laut der neuesten epidemiologischen Umfrage leiden ~0,01%-1,8% der Menschen auf der Welt an dieser Erkrankung1, die meisten von ihnen sind junge Männer (das Verhältnis von Männern zu Frauen beträgt ~2-3:1)2. Die Inzidenz von AS in der chinesischen Bevölkerung beträgt 0,2%-0,4%. Diese Erkrankung betrifft vor allem die Wirbelsäule und das Iliosakralgelenk. In den späteren Stadien der Erkrankung kann es zu einer Versteifung der Wirbelsäule und des Iliosakralgelenks kommen, die zu Wirbelsäulensteifigkeit und Kyphose sowie zu Schwierigkeiten beim Gehen führt, was die Qualität der Arbeit und der Aktivitäten des täglichen Lebens ernsthaft beeinträchtigt und eine schwere Belastung für den Patienten, die Familie und die Gesellschaft darstellt1. Derzeit gibt es keine endgültige Lösung für AS, und die angebotenen Behandlungen, sowohl pharmakologische als auch nicht-pharmakologische, konzentrieren sich in erster Linie auf die Linderung von Schmerzen, die Verlangsamung des Fortschreitens der Krankheit und die Verbesserung der Lebensqualität. Da die pharmakotherapeutischen Möglichkeiten in den letzten Jahren sehr begrenzt waren3, wurde der nicht-pharmakotherapeutischen Therapie, die zu einer alternativen Therapie für AS geworden ist, zunehmend Aufmerksamkeit geschenkt. In China bevorzugen Patienten oft eine äußerliche Behandlung, die aus der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) besteht, die geringe Nebenwirkungen und großen Komfort während der Behandlung hat.

Moxibustion ist eine uralte therapeutische Technik, die in der TCM verwendet wird. Du-Moxibustion ist eine äußerliche Behandlungstechnik, die aus einer "medikamentösen Moxibustion mit Schaum" am Wirbelsäulensegment des Du-Meridians besteht. Es wird hauptsächlich bei der Behandlung von AS eingesetzt und hat sich als sicher und wirksam erwiesen. Im Vergleich zur gewöhnlichen Moxibustion hat die Du-Moxibustion die Eigenschaften einer breiten Moxibustionsfläche, eines großen Moxakegels, einer starken Feuerkraft und einer hohen Temperatur4. Eine systematische Übersichtsarbeit und Metaanalyse deuten darauf hin, dass Moxibustion eine wirksame ergänzende Behandlung für AS5 ist. Eine kürzlich durchgeführte Studie bestätigte, dass die klinischen Symptome und einige Entzündungsfaktoren von AS-Patienten durch Moxibustion6 verbessert wurden. Studien haben gezeigt, dass Du-Moxibustion den Gehalt an β-Endorphin im Gehirn erhöhen und eine zentrale analgetische Wirkung ausübenkann 7, die Expression des HLA-B27-Gens 8 herunterreguliert und die Rezidivrate von AS verzögert. Die Du-Moxibustion hat auch eine lindernde Wirkung auf das Fortschreiten der AS, indem sie den Entzündungsindex ESR (BSG) und die Spiegel des C-reaktiven Proteins (CRP), des C-terminalen Peptids des Typ-I-Kollagens (CTX-I) und des Dickkopf1-Proteins (DKK1)9,10 senkt.

Eine weitere klinische Studie zeigte, dass die Du-Moxibustion die gestörten T-Zell-Untergruppen Ig und das Komplement C3 weiter anpassen kann, um den Immunmechanismus auszugleichen11. In Bezug auf den Knochenstoffwechsel kann die Moxibustion den Anstieg der alkalischen Phosphatase (ALP) und des Serumphosphors (S-P) hemmen, das Serumkalzium (S-Ca), die Knochenmineraldichte (BMD) und die Knochenstärke erhöhen12. Darüber hinaus kann die Du-Moxibustion die Wirbelsäulenfunktion an mehreren Stellen reparieren, um Müdigkeitssymptome bei AS-Patienten zu lindern13. Einige Tierstudien haben den potenziellen Mechanismus der Moxibustion bei der Behandlung von AS aufgedeckt. Eine Studie zeigte, dass Moxibustion den allgemeinen Gesundheitszustand signifikant verbesserte, die Dicke der Pfoten reduzierte und die Konzentrationen von IL-1β, PGE2, IL-6 und TNF-α in den Bandgewebeproben der Wirbelsäule verringerte. Die Analyse des Stoffwechselwegs verknüpfte die identifizierten Metaboliten mit dem TCA-Zyklus sowie dem Lipid-, Aminosäure-, Darmflora- und Purinstoffwechsel14. Eine andere Studie zeigte, dass Moxibustion die Expression der entzündungsfördernden Zytokine IL-1β, TNF-α, IL-17 und IL-6 unterdrückte; reduzierte die mRNA-Spiegel von RANKL, RANK, ALPE und OCN; und verbesserte die histopathologischen Merkmale bei AS-Mäusen15.

Während diese Studien darauf hindeuten, dass Moxibustion bei der Behandlung von AS wirksam sein könnte, sind weitere Untersuchungen erforderlich, um diese Ergebnisse zu bestätigen und das optimale Behandlungsprotokoll für Moxibustion bei Patienten mit AS zu bestimmen. Unser Team entwickelte und modifizierte die Moxibustionstherapie, die auf der grundlegenden Theorie und praktischen Anwendung der traditionellen chinesischen Moxibustion basiert, die seit über 35 Jahren in der chinesischen klinischen Praxis weit verbreitet ist und angewendet wird. Obwohl es nur wenige qualitativ hochwertige Studien zur Behandlung von AS durch Du-Moxibustion gibt, wurde ihre Indikation bei der Behandlung von AS durch Evidenz gestützt. Der Mechanismus der Behandlung von AS mit Du-Moxibustion ist jedoch weitere Studien wert. Tierversuche sind eine wichtige Methode, um den Mechanismus der Du-Moxibustion bei der Behandlung von AS zu erforschen. Die klinische Anwendung der Du-Moxibustion ist relativ ausgereift, wird aber nur selten zur Untersuchung des Mechanismus im Tierversuch eingesetzt. In dieser Arbeit werden die Funktionsweise und die Vorsichtsmaßnahmen, die während der Du-Moxibustion bei der Behandlung von AS-Versuchsmäusen zu treffen sind, detailliert beschrieben.

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Protokoll

Alle Tierversuche wurden vom Experimental Animal Welfare Ethics Review Committee der Shandong University of Traditional Chinese Medicine genehmigt (Nr. SDUTCM20230831301).

1. Zubereitung von Tieren

  1. Bestimmen Sie im Vorfeld die Versuchsgruppen und die Anzahl der Tiere pro Gruppe.
  2. Wählen Sie männliche BALb/c-Mäuse, halten Sie sie bei einer konstanten Temperatur von 22 ± 1 °C, einer konstanten Luftfeuchtigkeit von 60 ± 5 % und einer 12-stündigen Tageslichtumgebung.

2. Etablierung des AS-Mausmodells

ANMERKUNG: Das AS-Modell wurde mit Knorpelproteoglykan (PG) induziert, was eine klassische Modellierungsmethode ist 16,17,18,19,20,21. Mäuse des BALB/c-Stammes wurden wiederholt mit PG immunisiert, um Tendinitis und Spondylitis zu induzieren. In der Materialtabelle finden Sie Einzelheiten zu den Materialien, Reagenzien und Instrumenten, die in diesem Protokoll verwendet werden.

  1. Verwenden Sie eine 200-μl-Pipette, um 200 μl PG und CFA (oder IFA) in ein 1,5-ml-Zentrifugenröhrchen zu ziehen. Sanftes Schütteln, um die Flüssigkeit im Zentrifugenröhrchen zu mischen.
  2. Das Zentrifugenröhrchen zur Homogenisierung in den Gewebeschleifer geben und dann 4 Minuten auf Eis inkubieren. 5x wiederholen. Stellen Sie in der Gewebeschleifmaschine folgende Parameter ein: 60 Hz, Schleifen 30 s, Intervall 10 s für insgesamt 6 Zyklen.
  3. Extrahieren Sie 0,2 ml emulgiertes PG-Protein mit einer 1-ml-Spritze aus dem Zentrifugenröhrchen.
  4. Greife die Maus und fixiere sie mit der linken Hand. Legen Sie die Maus in Rückenlage und halten Sie den Kopf tiefer als den Schwanz, um eine Schädigung der Bauchorgane beim Einführen der Spritze zu vermeiden.
  5. Sterilisieren Sie den Bauch mit Alkoholtupfern mit der rechten Hand.
  6. Mit der Spritze in der rechten Hand die Nadel subkutan leicht links oder rechts von der Linea alba ventralis in die untere Bauchhälfte einführen.
  7. Schieben Sie die Nadel 3-5 mm subkutan parallel zur Mittelbauchlinie und stoßen Sie dann die Nadel im 45°-Winkel zur Haut in die Bauchhöhle.
  8. Penetrieren Sie das Bauchfell, ziehen Sie den Nadelstopfen zurück und injizieren Sie langsam das emulgierte PG-Protein.

3. Du-Moxibustion

HINWEIS: Bereiten Sie im Voraus die drei wichtigsten Rohstoffe für die Du-Moxibustion vor (Abbildung 1).

  1. Moxa-Zapfen vorbereiten. Nehmen Sie den Samt in die Hand, wobei zwei Handflächen in entgegengesetzte Richtungen zeigen und eine Drehkraft ausüben, um den Samt in eine Spindelform zu reiben (Abbildung 2)
  2. Den Ingwer in kleine Stücke schneiden und in einem Entsafter pürieren (Abbildung 3). Das Ingwerpüree durch Baumwollgaze filtrieren. Den Ingwersaft und den Ingwerschlamm vom Ingwerküree trennen, um den nächsten Schritt vorzubereiten.
  3. Bereiten Sie 10 g Ingwerschlamm und 20 ml Ingwersaft vor und geben Sie sie zur späteren Verwendung in Pappbecher.
  4. Wiegen Sie 0,1 g TCM-Pulver (eine Mischung aus Zimtpulver, Nelkenpulver, Notopterygiumpulver, Antharidinpulver und künstlichem Moschus)22 ab und mahlen Sie es in einem Mörser.
  5. Legen Sie die Mäuse in die Anästhesie-Induktionsbox des Tieranästhesiegeräts und betäuben Sie sie mit einem Gemisch aus 2-3% Isofluran und Sauerstoff bei einer Durchflussrate von 2 L/min.
  6. Beurteilen Sie die Tiefe der Anästhesie, indem Sie zunächst das Fehlen eines Schreckreflexes beobachten, und überprüfen Sie das Niveau der chirurgischen Anästhesie, indem Sie das Fehlen eines Pedalreflexes als Reaktion auf ein leichtes Einklemmen der Zehen überprüfen.
  7. Nachdem die Maus die chirurgische Anästhesie erreicht hat, nehmen Sie sie aus der Schachtel und fixieren Sie sie in Bauchlage auf dem Operationstisch. Richten Sie Mund und Nase der Maus auf den Auslass des Anästhetikums aus.
  8. Die Anästhesie erfolgt über eine an der Anästhesiemaschine befestigte Maske, durch die Isofluran und Sauerstoff über einen Kreislauf ohne Rückatmung abgegeben werden. Halten Sie die Anästhesie aufrecht und halten Sie die Maus während des gesamten Operationsvorgangs auf einem 37 °C heißen Heizkissen. Tragen Sie Gleitmittel auf die Augen auf, um ein Austrocknen zu verhindern.
  9. Lokalisieren Sie die Akupunkturpunkte und identifizieren Sie den Stimulationsbereich (Abbildung 4).
  10. Rasieren Sie die Haare auf dem Rücken der Maus, bis die fleischfarbene Haut auf dem Rücken der Maus zu sehen ist. Stellen Sie sicher, dass die Breite der Haarentfernung ~1,5 cm beträgt und die Länge vom siebten Halswirbel bis zum Schwanzwirbel reicht (Abbildung 5A).
  11. Tragen Sie den vorbereiteten Ingwersaft mit einer Wattegaze auf die rasierte Stelle auf (Abbildung 3).
  12. Streuen Sie das TCM-Pulver gleichmäßig mit einem Schreibpinsel auf die Mittellinie der Rückseite der Maus und decken Sie es mit Maulbeerpapier ab (Abbildung 5B-D).
  13. Eine trapezförmige Ingwersäule von 6 cm Länge, 1,5 cm Breite und 3 mm Dicke aus Ingwerschlamm herstellen. Befestigen Sie die Ingwersäule auf dem Maulbeerpapier (Abbildung 5E).
  14. Machen Sie eine Rille über der Mittellinie der Ingwersäule (Abbildung 3) und legen Sie den Moxakegel auf die Ingwersäule.
  15. Zünde den Moxakegel an und setze einen neuen Moxakegel auf, nachdem der vorherige ausgebrannt ist. Prüfen Sie die Festigkeit der Ingwersäule, um ein Anbrennen der Maus zu vermeiden, und verbrennen Sie insgesamt drei Zapfen (Abbildung 5F).
  16. Nach dem Abbrennen der Moxa-Zapfen den Ingwer und das TCM-Pulver abwischen und den Rücken der Maus reinigen. Beenden Sie die Anästhesie an dieser Stelle.
  17. Erlauben Sie der Maus, in einem neuen Käfig mit uneingeschränktem Zugang zu Futter und Wasser wieder zu Bewusstsein zu kommen. Stellen Sie den Käfig auf ein beheiztes Pad, um den Erholungsprozess zu unterstützen. Beobachte das Tier, bis es wieder zu Bewusstsein kommt.
  18. Sobald sich die Maus vollständig erholt hat, überprüfen Sie das Vorhandensein des Aufrichtungsreflexes, bevor Sie sie wieder in ihr normales Gehäuse zurückbringen.
    HINWEIS: Während der Operation ist es notwendig, den psychischen Zustand der Mäuse zu überwachen, um eine schwache Atmung zu vermeiden. Vermeiden Sie Verbrühungen, aber halten Sie die Mäuse warm und vermeiden Sie Blutergüsse an Krallen und Schwanz.

4. Bewertung des Arthritis-Index (AI)

  1. Bewerten Sie den KI-Score dreimal: vor der Modellierung, nach der Modellierung und nach der Behandlung. Die Beurteilungsmaßstäbe lauten wie folgt: 0, keine Rötung oder Schwellung; 1, leichte Rötung oder Schwellung in einigen Zehen; 2, Rötung und Schwellung in den meisten Zehengelenken und Zehen; 3, schwere Rötung und Schwellung in den Füßen und unterhalb des Sprunggelenks; und 4, Rötung und Schwellung in den Füßen und im Sprunggelenk23.
  2. Berechne die KI-Werte aller vier Pfoten mit einem Maximalwert von 16.

5. Rotarod-Test

HINWEIS: Der Rotarod-Test wird verwendet, um die motorische Koordination und das Gleichgewicht zu beurteilen, indem die Zeit aufgezeichnet wird, die die Mäuse auf der rotierenden Trommel verbringen. Dieses Experiment bestand aus drei Versuchen im Abstand von 20 Minuten. Die offiziellen Testdaten wurden aus dem dritten Versuch aufgezeichnet, wobei die ersten beiden als Trainingsübungen dienten.

  1. Setzen Sie die Mäuse auf rotierende Trommeln, die sich unter kontinuierlicher Beschleunigung von 4 bis 40 U/min über 300 s24 drehen.
  2. Messen Sie die Latenzzeit (die Zeit, bis die Maus von der Stange fällt). Stellen Sie eine Polsterung bereit, um Verletzungen zu vermeiden, wenn es herunterfällt.

6. Freifeldtest (OFT)

HINWEIS: Die OFT wird verwendet, um den Zustand der autonomen Bewegung zu bewerten, mit dem Ziel, pathologisches Verhalten zu identifizieren. Vier quadratische Freifeldarenen (50 cm x 50 cm x 40 cm) wurden zu der Apparatur zusammengefügt. Der Boden der Schachtel war in neun gleiche Quadrate unterteilt.

  1. Kontrollieren Sie die Hintergrundgeräusche des Labors auf unter 65 dB.
  2. Wischen Sie das gesamte Gerät vor jedem Versuch mit 75%igem Ethanol ab.
  3. Platzieren Sie alle Mäuse 1 Stunde vor dem Test im Testraum, damit sie sich an ihre Umgebung anpassen können.
  4. Setzen Sie die Mäuse in die quadratischen Freilandarenen und lassen Sie sie 10 Minuten lang erkunden.
  5. Zeichnen Sie die Gesamtstrecke und die Bewegungsgeschwindigkeit 10 Minuten lang auf.

7. Euthanasie und Probenentnahme

  1. Legen Sie die Maus in die Anästhesie-Induktionsbox und betäuben Sie sie mit einer Mischung aus 2-3% Isofluran und Sauerstoff bei einer Durchflussrate von 2 l/min. Sobald die Maus in einen Zustand tiefer Anästhesie eintritt, der durch einen fehlenden Pedalreflex bestätigt wird, wird sie zur Erhaltungsanästhesie auf den Operationstisch verlegt.
  2. Greife und fixiere die Maus mit der nicht-dominanten Hand.
  3. Drücken Sie leicht auf die Augenpartie, damit die Augäpfel verstopfen und hervortreten.
  4. Verwenden Sie eine Schere, um die Schnurrhaare der Maus zu kürzen, um eine durch Haare verursachte Hämolyse zu verhindern.
  5. Bestätigen Sie die Tiefe der Anästhesie, indem Sie auf das Fehlen eines Pedalreflexes als Reaktion auf ein Einklemmen der Zehen prüfen. Verwenden Sie eine Pinzette, um den Augapfel zu fassen und schnell zu entfernen, so dass das Blut aus der Augenhöhle in ein Mikrozentrifugenröhrchen fließen kann.
    HINWEIS: Alternative Blutentnahmemethoden, wie z. B. eine Herzpunktion, können ebenfalls verwendet werden.
  6. Wenn sich die Bluttropfrate verlangsamt, drücken Sie sanft auf den Herzbereich der Maus, um das Blutpumpen zu beschleunigen und mehr Blut zu erhalten. Euthanasieren Sie die Maus dann mit Hilfe einer zervikalen Luxation.
  7. Halten Sie das Bein mit einer Pinzette in der nicht-dominanten Hand knapp über dem Sprunggelenk. Schneiden Sie dann das Bein knapp über dem Sprunggelenk mit einer Schere ab.

8. Histologische Analyse

  1. Tauchen Sie die Knöchelproben länger als 24 Stunden in 4%iges Paraformaldehyd. 1 Monat lang in 10% EDTA (pH = 7,4) entkalken.
  2. Die Proben werden 2 h lang in 4%igem Paraformaldehyd eingeweicht.
  3. Weichen Sie die Proben dann in einem Gradienten steigender Ethanolkonzentrationen (70 %, 80 %, 90 %, 100 %, 100 %, 100 %) ein. Jede Ethanolkonzentration 1 h lang einweichen.
  4. Die Proben werden 3 h lang in Xylol eingeweicht.
  5. Tauchen Sie die Knöchelproben für 7 Stunden in Paraffin. Paraffinblöcke im Kühlschrank bei 4 °C beiseite stellen.
  6. Schneiden Sie Paraffinblöcke mit einer halbautomatischen Paraffinschneidemaschine auf eine Dicke von 6 μm.
  7. Die Scheiben 4 x 5 min in Xylol einweichen, um das Entwachsen abzuschließen.
  8. Die Scheiben werden jeweils 2 Minuten lang in einem Gradienten abnehmender Ethanolkonzentrationen (100 %, 100 %, 95 %, 75 %) eingeweicht. 2 Min. in destilliertem Wasser einweichen.
  9. Die Scheiben 10 Minuten lang mit Hämatoxylin färben und 5 Sekunden lang mit destilliertem Wasser abspülen.
  10. Die Scheiben 30 s in der Differenzierungsflüssigkeit einweichen und 5 s mit destilliertem Wasser abspülen.
  11. Die Scheiben 1 Minute lang mit Eosin färben und 3 Minuten mit destilliertem Wasser abspülen.
  12. Die Scheiben werden in einem Gradienten steigender Ethanolkonzentrationen (80 %, 95 %, 100 %, 100 %) für jeweils 1 Minute eingeweicht. 3 x 3 min in Xylol einweichen und die Scheiben25 verschließen.

9. Enzymgebundener Immunosorbent-Assay (ELISA)

  1. Messen Sie die IL-17- und TNF-α-Konzentrationen im Plasma mit den entsprechenden Kits gemäß den Anweisungen des Herstellers.

10. Statistische Analyse

  1. Drücken Sie die Daten als Mittelwert ± Standardfehler des Mittelwerts (SEM) aus.
  2. Bestimmen Sie die Signifikanz durch eine unidirektionale Varianzanalyse (ANOVA) oder eine ANOVA, gefolgt von den Post-hoc-Tests von Bonferroni oder Tamhane T2.
  3. Betrachten Sie P < 0,05 als statistisch signifikant.

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Ergebnisse

PG-induzierte Modellmäuse entwickelten Symptome einer peripheren Arthritis, die durch Rötung und Schwellung der Extremitäten und Zehen gekennzeichnet ist, und entwickelten bereits in Woche 14 allmählich eine axiale Arthritis, die der Manifestation von AS sehr ähnlich ist. Daher wurde das AS-Mausmodell als erfolgreich angesehen, wenn der Arthritis-Index (AI) 14 Wochen nach der letzten Injektion über 3 Punkten lag22. Wenn die Pfoten der Mäuse geschwollen erschienen, wurde die Du-Moxibustion-Behandlu...

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Diskussion

AS äußert sich klinisch als Rücken-, Lenden- und Gelenkschwellungsschmerzen, und in schweren Fällen können Wirbelsäulendeformitäten und Gelenksteifigkeit auftreten26. Eine frühzeitige Diagnose und Behandlung kann die Lebensqualität verbessern, die Behinderungsraten senken und die Prognosen von Patienten mit AS verbessern. Nach der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) wird angenommen, dass AS durch einen Mangel an Yang in der Niere und im Du-Meridian sowie durch eine Ansammlung von kaltem Übel...

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Offenlegungen

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte zu deklarieren.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde unterstützt durch das General Program der National Natural Science Foundation of China (Nr. 82174491) und das Qilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project (No. Lu Weihan [2020]132). Vielen Dank an das Laboratory Animal Center der Shandong University of Traditional Chinese Medicine für die Bereitstellung von Versuchsbedingungen.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
10% EDTAShanghai Macklin Biochemical Co., Ltd., Shanghai, China
Alkohol PadsHYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
AnästhesiemaschineMedizinische Versorgung & Dienstleistungen INT. LTD, Keighley, Vereinigtes Königreich
ZentrifugenröhrchenAxygen, Corning, NewYork, UAS
vervollständigen Frech's Adjuvans (CFA)aladdin,Shanghai, ChinaF393378
WattebauschHenan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
BaumwollgazeHenan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
SchneidebrettSelbstvorbereitung
Decorin aus RindergelenkknorpelSigma-Aldrich, MO, USAD8428
EnthaarungscremeVeet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
elektronische WaageShanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd., Shanghai, China
Eppendorf RöhreAxygen, Corning, NewYork, UAS
AugenschmiermittelBeijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Peking, China
IngwerSelbstvorbereitung
GraphPad Prism 7 SoftwareGraphPad Software, Boston, USA
HaarschneiderSuper Human Group CO LTD, Jinhua, China
HeizkissenShenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
unvollständig Freund' s Adjuvans (IFA)aladdin, Shanghai, ChinaF393371
Injektion  SpritzeShandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
IsofluranShenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, ChinaR510-22-10
RäucherstäbchenShijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD., Shijiazhuang, China
EntsafterBraun (Shanghai) Co., Ltd., Shanghai, China
MesserSelbstpräparationsfeuerzeug
Zhejiang Tiger-Feuerzeug Co. LTD
MörserLuoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Maus IL-17 ELISA Kitabsin, Shanghai, Chinaabs520009-96T
Maus  TNF-α ELISA-KitWuhan  Sanying, Wuhan, ChinaKE10002
MaulbeerpapierYishui County Mulinsang Paper Co., LTD, Linyi, China
OFTXinruan, Shanghai, ChinaXR-XZ301
PappbecherSelbstvorbereitung
PipettenOXFORD BIO INSTRUMENTS INC., Oxford, UK
raffinierte Moxa SamtSelbstpräparation
rotarodXinruan, Shanghai, ChinaXR-6C
scientz-48L kryogene Gewebeschleifmaschine mit hohem DurchsatzNingbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
SchereShandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
halbautomatische Paraffin-TrennmaschineLeica Camera AG, Watznach, Deutschland
SPSS 25.0 softwareInternational Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM Pulverzur Selbstzubereitung
Biosharp, Labgic, Peking, China
SchreibpinselYishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
Tipps

Referenzen

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