Summary
Dit artikel beschrijft in detail de operatieprocedures en voorzorgsmaatregelen die moeten worden genomen tijdens Du-moxibustie bij de behandeling van spondylitis ankylopoetica bij experimentele muizen.
Abstract
Spondylitis ankylopoetica (AS) is een progressief verergerende en invaliderende vorm van artritis die voornamelijk het axiale skelet aantast. Deze ziekte treft voornamelijk de wervelkolom en het sacro-iliacale gewricht. Fusie van de wervelkolom en het sacro-iliacale gewricht kan optreden in het latere stadium van de ziekte, wat resulteert in stijfheid van de wervelkolom en kyfose, evenals moeite met lopen, wat de kwaliteit van het werk en de dagelijkse activiteiten ernstig aantast en een zware belasting vormt voor de patiënt, het gezin en de samenleving. Er is steeds meer aandacht voor niet-medicamenteuze therapie als alternatieve therapie voor AS. Moxibustie is een oude therapeutische techniek die wordt gebruikt in de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM). Du-moxibustietherapie, een unieke en innovatieve uitwendige behandeling ontwikkeld op basis van gewone moxibustie, heeft een duidelijk therapeutisch effect op AS. Du-moxibustie combineert vakkundig de compatibele technieken van TCM om meridianen, acupunten, Chinese kruidengeneeskunde en moxibustie te integreren. Dit artikel beschrijft de operatieprocedures en voorzorgsmaatregelen die moeten worden genomen tijdens Du-moxibustie in experimentele muizen in detail om een experimentele basis te bieden voor de studie van het mechanisme van Du-moxibustie bij de behandeling van AS.
Introduction
Spondylitis ankylopoetica (AS) is een progressief verergerende en invaliderende vorm van artritis die voornamelijk het axiale skelet aantast. Volgens het laatste epidemiologische onderzoek lijdt ~0,01%-1,8% van de mensen in de wereld aan deze aandoening1, van wie de meesten jonge mannen zijn (man-vrouwverhouding is ~2-3:1)2. De incidentie van AS in de Chinese bevolking is 0,2%-0,4%. Deze ziekte treft voornamelijk de wervelkolom en het sacro-iliacale gewricht. Fusie van de wervelkolom en het sacro-iliacale gewricht kan optreden in de latere stadia van de ziekte, wat resulteert in stijfheid van de wervelkolom en kyfose, evenals moeite met lopen, wat de kwaliteit van het werk en de dagelijkse activiteiten ernstig aantast en een zware belasting vormt voor de patiënt, het gezin en de samenleving1. Momenteel is er geen definitieve oplossing voor AS en de aangeboden behandelingen, zowel farmacologisch als niet-farmacologisch, zijn voornamelijk gericht op het verlichten van pijn, het vertragen van ziekteprogressie en het verbeteren van de kwaliteit van leven. Omdat de farmacotherapeutische mogelijkheden de laatste jarenzeer beperkt zijn 3, is er de laatste jaren steeds meer aandacht besteed aan niet-farmacotherapie, die een alternatieve therapie voor AS is geworden. In China geven patiënten vaak de voorkeur aan een uitwendige behandeling bestaande uit Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM), die kleine bijwerkingen en veel gemak heeft tijdens de behandeling.
Moxibustie is een oude therapeutische techniek die wordt gebruikt in de TCM. Du-moxibustie is een uitwendige behandelingstechniek die bestaat uit "medicinale moxibustie met schuim" op het wervelkolomsegment van de Du-meridiaan. Het wordt voornamelijk gebruikt bij de behandeling van AS en heeft veiligheid en effectiviteit aangetoond. Vergeleken met gewone moxibustie heeft Du-moxibustie de kenmerken van een breed moxibustiegebied, een grote moxakegel, sterke vuurkracht en hoge temperatuur4. Een systematische review en meta-analyse suggereren dat moxibustie een effectieve aanvullende behandeling is voor AS5. Een recente studie bevestigde dat de klinische symptomen en sommige ontstekingsfactoren van AS-patiënten werden verbeterd door moxibustie6. Studies hebben aangetoond dat Du-moxibustie het hersengehalte van β-endorfine kan verhogen en een centraal pijnstillend effect kan uitoefenen7, de expressie van het HLA-B27-gen 8 kan verlagen en het recidiefpercentage van AS kan vertragen. Du-moxibustie heeft ook een verbeterend effect op de progressie van AS door de ontstekingsindex ESR (ESR) en niveaus van C-reactief proteïne (CRP), C-terminaal peptide van type I collageen (CTX-I) en Dickkopf1-eiwit (DKK1) te verlagen9,10.
Een andere klinische studie toonde aan dat Du-moxibustie de ongeordende T-celsubsets, Ig, en complement C3 verder kan aanpassen om het immuunmechanisme in evenwicht te brengen11. In termen van botmetabolisme kan moxibustie de stijging van serumalkalische fosfatase (ALP) en serumfosfor (SP) remmen, serumcalcium (S-Ca), botmineraaldichtheid (BMD) en botsterkteverhogen12. Bovendien kan Du-moxibustie de spinale functie op meerdere punten herstellen om vermoeidheidssymptomen bij AS-patiënten te verlichten13. Sommige dierstudies hebben het mogelijke mechanisme van moxibustie bij de behandeling van AS aan het licht gebracht. Een studie wees uit dat moxibustie de algehele gezondheidstoestand aanzienlijk verbeterde, de niveaus van pootdikte verminderde en de niveaus van IL-1β, PGE2, IL-6 en TNF-α in de ligamentweefselmonsters van de wervelkolom verlaagde. Metabole routeanalyse koppelde de geïdentificeerde metabolieten aan de TCA-cyclus, evenals lipiden, aminozuren, darmflora en purinemetabolisme14. Een andere studie toonde aan dat moxibustie de expressie van pro-inflammatoire cytokines, IL-1β, TNF-α, IL-17 en IL-6, onderdrukte; verlaagde de mRNA-niveaus van RANKL, RANK, ALP en OCN; en verbeterde de histopathologische kenmerken in AS-muizen15.
Hoewel deze studies suggereren dat moxibustie effectief kan zijn bij de behandeling van AS, is er meer onderzoek nodig om deze bevindingen te bevestigen en het optimale behandelingsprotocol voor moxibustie bij patiënten met AS te bepalen. Ons team creëerde en wijzigde de moxibustietherapie op basis van de basistheorie en praktische werking van traditionele Chinese moxibustie, die al meer dan 35 jaar op grote schaal wordt uitgevoerd en toegepast in de Chinese klinische praktijk. Hoewel er weinig studies van hoge kwaliteit zijn over de behandeling van AS door Du-moxibustie, is de indicatie ervan bij de behandeling van AS ondersteund door bewijs. Het mechanisme van de behandeling van AS met Du-moxibustie is echter verdere studie waard. Dierstudie is een belangrijke methode om het mechanisme van Du-moxibustie bij de behandeling van AS te onderzoeken. De klinische werking van Du-moxibustie is relatief volwassen, maar wordt zelden gebruikt in de studie van het mechanisme in dierproeven. Dit artikel beschrijft in detail de werking en voorzorgsmaatregelen die moeten worden genomen tijdens Du-moxibustie bij de behandeling van AS-experimentele muizen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dierproeven zijn goedgekeurd door de Experimental Animal Welfare Ethics Review Committee van de Shandong University of Traditional Chinese Medicine (nr. SDUTCM20230831301).
1. Voorbereiding van dieren
- Bepaal vooraf de proefgroepen en het aantal dieren per groep.
- Kies mannelijke BALb/c-muizen, huisvest ze bij een constante temperatuur van 22 ± 1 °C, een constante luchtvochtigheid van 60 ± 5% en een lichtomgeving van 12 uur per dag.
2. Vaststelling van het AS-muismodel
OPMERKING: Het AS-model werd geïnduceerd met kraakbeenproteoglycaan (PG), wat een klassieke modelleringsmethode is 16,17,18,19,20,21. Muizen van de BALB/c-stam werden herhaaldelijk geïmmuniseerd met PG om tendinitis en spondylitis te induceren. Zie de Materiaaltabel voor details met betrekking tot de materialen, reagentia en instrumenten die in dit protocol worden gebruikt.
- Gebruik een pipet van 200 μl om 200 μl PG en CFA (of IFA) in een centrifugebuisje van 1,5 ml op te zuigen. Schud zachtjes om de vloeistof in de centrifugebuis te mengen.
- Plaats de centrifugebuis in de weefselmolen voor homogenisatie en incubeer vervolgens 4 minuten op ijs. Herhaal 5x. Stel de volgende parameters in de weefselmolen in: 60 Hz, malen 30 s, interval 10 s voor een totaal van 6 cycli.
- Extraheer 0,2 ml geëmulgeerd PG-eiwit uit de centrifugebuis met een spuit van 1 ml.
- Pak de muis vast en bevestig deze met de linkerhand. Leg de muis in rugligging en houd de kop lager dan de staart om schade aan de buikorganen te voorkomen wanneer de spuit wordt ingebracht.
- Steriliseer de buik met alcoholdoekjes met de rechterhand.
- Steek met de spuit in de rechterhand de naald onderhuids iets links of rechts van de linea alba ventralis in de onderste helft van de buik.
- Duw de naald 3-5 mm onderhuids evenwijdig aan de middenbuiklijn en duw de naald vervolgens in de buikholte in een hoek van 45° ten opzichte van de huid.
- Penetreer het buikvlies, trek de naaldplug terug en injecteer langzaam het geëmulgeerde PG-eiwit.
3. Du-moxibustie
OPMERKING: Bereid van tevoren de drie belangrijkste grondstoffen voor Du-moxibustie voor (Figuur 1).
- Bereid moxa-kegels voor. Neem het fluweel in de hand, met twee handpalmen in tegengestelde richtingen en oefen een draaiende kracht uit om het fluweel in een spoelvorm te wrijven (Figuur 2)
- Snijd de gember in kleine stukjes en pureer deze in een sapcentrifuge (Figuur 3). Filtreer de gemberpuree door katoenen gaasjes. Scheid het gembersap en de gembermodder van de gemberpuree om je voor te bereiden op de volgende stap.
- Bereid 10 g gembermodder en 20 ml gembersap en doe ze in papieren bekers voor later gebruik.
- Weeg 0,1 g TCM-poeder af (een mengsel van kaneelpoeder, kruidnagelpoeder, notopterygiumpoeder, antharidinepoeder en kunstmatige muskus)22 en maal het in een vijzel.
- Plaats de muizen in de anesthesie-inductiebox van het anesthesieapparaat voor dieren en verdoven ze met een mengsel van 2-3% isofluraan en zuurstof met een stroomsnelheid van 2 L/min.
- Beoordeel de diepte van de anesthesie door in eerste instantie de afwezigheid van een schrikreflex te observeren en controleer het niveau van chirurgische anesthesie door te controleren op de afwezigheid van een pedaalreflex als reactie op een zachte teenknijp.
- Nadat de muis de anesthesie van het chirurgische vlak heeft bereikt, haalt u hem uit de doos en bevestigt u hem in buikligging op de operatietafel. Lijn de mond en neus van de muis uit met de uitlaat van het verdovingsmiddel.
- Dien anesthesie toe via een masker dat aan het anesthesieapparaat is bevestigd, waardoor isofluraan en zuurstof worden toegediend via een niet-rebreathing-circuit. Handhaaf de anesthesie en houd de muis op een verwarmingskussen van 37 °C gedurende de gehele operatieprocedure. Breng glijmiddel aan op de ogen om uitdroging te voorkomen.
- Lokaliseer de acupunten en identificeer het stimulatiegebied (Figuur 4).
- Scheer het haar op de rug van de muis totdat de vleeskleurige huid op de rug van de muis zichtbaar is. Zorg ervoor dat de breedte van de ontharing ~1.5 cm is en dat de lengte van de zevende halswervel tot de staartwervel is (Figuur 5A).
- Breng het bereide gembersap met een wattenstaafje aan op het geschoren gebied (Figuur 3).
- Strooi het TCM-poeder gelijkmatig met een schrijfborstel op de middenlijn van de achterkant van de muis en bedek het met moerbeipapier (Figuur 5B-D).
- Maak een trapeziumvormige gemberkolom van 6 cm lang, 1,5 cm breed en 3 mm dik met gembermodder. Bevestig de gemberkolom op het moerbeipapier (Figuur 5E).
- Maak een groef boven de middellijn van de gemberkolom (Figuur 3) en plaats de moxakegel op de gemberkolom.
- Steek de moxakegel aan en plaats een nieuwe moxakegel nadat de vorige is opgebrand. Controleer de stevigheid van de gemberkolom om te voorkomen dat de muis verbrandt, waarbij in totaal drie kegels worden verbrand (Figuur 5F).
- Veeg na het verbranden van de moxa-kegels de gember en het TCM-poeder weg en maak de achterkant van de muis schoon. Stop de anesthesie op dit punt.
- Laat de muis weer bij bewustzijn komen in een nieuwe kooi met onbeperkte toegang tot voedsel en water. Plaats de kooi op een verwarmd kussen om het herstelproces te vergemakkelijken. Houd het dier in de gaten totdat het weer voldoende bij bewustzijn is.
- Zodra de muis volledig is hersteld, bevestigt u de aanwezigheid van de oprichtreflex voordat u deze terugplaatst in zijn normale behuizing.
NOTITIE: Tijdens de operatie is het noodzakelijk om de mentale toestand van de muizen te controleren om een zwakke ademhaling te voorkomen. Voorkom verbranding, maar houd de muizen warm en vermijd kneuzingen van de klauwen en staart.
4. Evaluatie van de artritis-index (AI)
- Evalueer de AI-score drie keer: vóór het modelleren, na het modelleren en na de behandeling. De beoordelingsnormen zijn als volgt: 0, geen roodheid of zwelling; 1, lichte roodheid of zwelling in een paar tenen; 2, roodheid en zwelling in de meeste teengewrichten en tenen; 3, ernstige roodheid en zwelling in de voeten en onder het enkelgewricht; en 4, roodheid en zwelling in voeten en enkelgewricht23.
- Bereken de AI-scores van alle vier de poten, met een maximale waarde van 16.
5. Rotarod-test
NOTITIE: De rotarod-test wordt gebruikt om de motorische coördinatie en het evenwicht te beoordelen door de tijd te registreren die de muizen op de roterende trommel doorbrengen. Dit experiment bestond uit drie proeven, gescheiden door intervallen van 20 minuten. De officiële testgegevens werden geregistreerd van de derde proef, waarbij de eerste twee dienden als trainingsoefeningen.
- Plaats de muizen op roterende trommels die draaien onder continue acceleratie van 4 tot 40 tpm gedurende 300 s24.
- Meet de latentietijd (de tijd totdat de muis van de staaf valt). Zorg voor vulling om letsel te voorkomen wanneer het eraf valt.
6. Open veldtest (OFT)
OPMERKING: De OFT wordt gebruikt om de staat van autonome beweging te evalueren, met als doel pathologisch gedrag te identificeren. Vier vierkante open veldarena's (50 cm x 50 cm x 40 cm) werden bij elkaar geplaatst om het apparaat te vormen. De bodem van de doos was verdeeld in negen gelijke vierkanten.
- Beheers het achtergrondgeluid van het laboratorium tot onder de 65 dB.
- Veeg het hele apparaat voor elke proef af met 75% ethanol.
- Plaats alle muizen 1 uur voor de test in de testruimte, zodat ze zich kunnen aanpassen aan hun omgeving.
- Zet de muizen in de vierkante arena's in het open veld en laat ze 10 minuten op verkenning gaan.
- Noteer de totale afstand en bewegingssnelheid gedurende 10 minuten.
7. Euthanasie en monstername
- Plaats de muis in de anesthesie-inductiebox en verdoven deze met een mengsel van 2-3% isofluraan en zuurstof met een stroomsnelheid van 2 l/min. Zodra de muis in een staat van diepe anesthesie komt, bevestigd door een gebrek aan pedaalreflex, brengt u hem over naar de operatietafel voor onderhoudsanesthesie.
- Pak de muis vast en bevestig hem met de niet-dominante hand.
- Druk lichtjes op het gebied rond de ogen om de oogbollen verstopt te maken en uit te steken.
- Gebruik een schaar om de snorharen van de muis te knippen om hemolyse veroorzaakt door haren te voorkomen.
- Bevestig de diepte van de anesthesie door te controleren op de afwezigheid van een pedaalreflex als reactie op een teenknijp. Gebruik een pincet om de oogbol vast te pakken en snel te verwijderen, zodat het bloed vanuit de oogkas in een microcentrifugebuis kan stromen.
OPMERKING: Alternatieve methoden voor bloedafname, zoals hartpunctie, kunnen ook worden gebruikt. - Wanneer de bloeddruppelsnelheid vertraagt, drukt u zachtjes op het hartgebied van de muis om het pompen van het bloed te versnellen en meer bloed te verkrijgen. Euthanaseer vervolgens de muis met behulp van cervicale dislocatie.
- Houd het been net boven het enkelgewricht met een pincet in de niet-dominante hand. Knip vervolgens het been net boven het enkelgewricht af met een schaar.
8. Histologische analyse
- Dompel de enkelmonsters gedurende meer dan 24 uur onder in 4% paraformaldehyde. Ontkalken in 10% EDTA (pH = 7,4) gedurende 1 maand.
- Week de monsters gedurende 2 uur in 4% paraformaldehyde.
- Week de monsters vervolgens in een gradiënt van toenemende ethanolconcentraties (70%, 80%, 90%, 100%, 100%, 100%). Laat elke ethanolconcentratie 1 uur weken.
- Week de monsters gedurende 3 uur in xyleen.
- Dompel de enkelmonsters gedurende 7 uur onder in paraffine. Bewaar paraffineblokjes in een koelkast van 4 °C.
- Snijd paraffineblokken tot een dikte van 6 μm met behulp van een semi-automatische paraffinesnijmachine.
- Week de plakjes 4 x 5 minuten in xyleen om het ontwaxen te voltooien.
- Week de plakjes in een gradiënt van afnemende ethanolconcentraties (100%, 100%, 95%, 75%) gedurende elk 2 minuten. Week 2 minuten in gedestilleerd water.
- Kleur de plakjes gedurende 10 minuten met hematoxyline en spoel ze af met gedestilleerd water gedurende 5 s.
- Week de plakjes 30 s in de differentiatievloeistof en spoel ze 5 s af met gedestilleerd water.
- Kleur de plakjes 1 minuut met eosine en spoel ze 3 minuten af met gedestilleerd water.
- Week de plakjes in een gradiënt van toenemende ethanolconcentraties (80%, 95%, 100%, 100%) gedurende elk 1 minuut. Week 3 x 3 minuten in xyleen en sluit de plakjes25.
9. Enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA)
- Meet de IL-17- en TNF-α concentraties in plasma met behulp van de respectievelijke kits volgens de instructies van de fabrikant.
10. Statistische analyse
- Druk de gegevens uit als gemiddelde ± standaardfout van het gemiddelde (SEM).
- Bepaal de significantie door middel van eenrichtingsvariantieanalyse (ANOVA) of tweerichtingsherhaalde metingen ANOVA, gevolgd door de post-hoctests van Bonferroni of Tamhane T2.
- Beschouw P < 0,05 als statistisch significant.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
PG-geïnduceerde modelmuizen ontwikkelden symptomen van perifere artritis, gekenmerkt door roodheid en zwelling van de ledematen en tenen, en ontwikkelden geleidelijk axiale artritis al in week 14, wat sterk lijkt op de manifestatie van AS. Daarom werd het AS-muismodel als succesvol beschouwd als de artritis-index (AI) 14 weken na de laatste injectie meer dan 3 punten bedroeg22. Wanneer de poten van de muizen gezwollen leken, werd de Du-moxibustie behandeling eenmaal per week uitgevoerd voor een totaal van 3x. Na de behandeling werden de muizen geëuthanaseerd door cervicale dislocatie onder isofluraan diepe anesthesie, hun bloed werd verzameld en de enkels werden weggesneden.
Effecten van Du-moxibustie op motorische coodnatie en autonome beweging
Boviene PG-geïnduceerde AS werd gebruikt als een model om het effect van Du-moxibustie op de Du-meridiaan op de motorische coördinatie te observeren. Aanvankelijk werd de gewrichtszwellingsscore gebruikt om te beoordelen of het model succesvol was, en motorische coördinatie en autonome beweging werden geëvalueerd met behulp van de rotarod-test en OFT.
Evaluatie van AI bepaalde de ernst van perifere artritis. Na modellering bleek uit ANOVA met herhaalde metingen in twee richtingen dat de gewrichtszwellingsscores in de model- en Du-moxibustiegroepen significant toenamen in vergelijking met die in de controlegroep vóór de Du-moxibustie (P < 0,01; Figuur 6A). Behandeling met Du-moxibustie verminderde de zwellingsscores van de gewrichten in vergelijking met die van de modelgroep na de Du-moxibustie (P < 0,05; Figuur 6A).
De rotarod-test werd gebruikt om de motorische coördinatie en het evenwicht te evalueren. Tweerichtings-ANOVA met herhaalde metingen onthulde significante verschillen in de tijd (F = 13.928, P = 0.000 < 0.05) en interactie-effecten van tijd en groep (F = 12.583, P = 0.000 < 0.05). Na modellering verschilde de latentietijd van de controlegroep niet van die vóór de modellering. Na modellering namen de latentietijden van de model- en Du-moxibustiegroepen echter significant af in vergelijking met die in de controlegroep (P < 0,01; Figuur 6B), en er waren geen significante verschillen tussen de modelgroep en de Du-moxibustiegroep (P > 0,05; Figuur 6B). Na de behandeling nam de latentietijd van de Du-moxibustiegroep significant toe in vergelijking met die van de modelgroep (P < 0,05; Figuur 6B). Deze resultaten gaven aan dat Du-moxibustie effectief was in het verbeteren van de motorische coördinatie bij AS-muizen.
OFT werd uitgevoerd om autonome beweging te detecteren. De parameters werden automatisch verzameld en geanalyseerd met behulp van de software (Figuur 6C-E); De totale afstand en gemiddelde snelheid werden in dit onderzoek voornamelijk waargenomen. Er was geen significant verschil in de totale afstand en gemiddelde snelheid tussen de groepen vóór de modellering (P > 0,05; Figuur 6C,D). Na modellering namen de totale afstand en gemiddelde snelheid significant af in vergelijking met de controlegroep (P < 0,05; Figuur 6C,D). Na de behandeling namen de totale afstand en gemiddelde snelheid van de Du-moxibustiegroep significant toe in vergelijking met die van de modelgroep (P < 0,05; Figuur 6C,D). Deze resultaten gaven aan dat Du-moxibustie effectief was in het verbeteren van autonome beweging bij AS-muizen.
Effecten van Du-moxibustie op de pathologie van het enkelgewricht
HE-kleuring werd gebruikt om de pathologische veranderingen in het enkelgewricht te observeren. In de controlegroep was er geen schade aan de synoviumstructuur, geen congestie in het synovium en geen duidelijke infiltratie en necrose van ontstekingscellen. In de modelgroep werden echter synoviumhyperplasie en infiltratie waargenomen in de gewrichtsholte, naast infiltratie van inflammatoire cellen en weefseloedeem. In combinatie met AI-evaluatie werd bewezen dat het AS-model met succes was vastgesteld. Vergeleken met de modelgroep was het synovium van muizen in de Du-moxibustiegroep meer intact, was het interstitiële oedeem verminderd en was het gewrichtskraakbeen relatief intact (Figuur 7).
Effecten van Du-moxibustie op plasma IL-17- en TNF-α-spiegels
ELISA werd uitgevoerd om IL-17 en TNF-α in het plasma te meten. De plasmaspiegels IL-17 en TNF-α van de modelgroep waren significant verhoogd in vergelijking met die van de controlegroep (P < 0,01; Figuur 6F,G). Du-moxibustie verlaagde de plasmaspiegels IL-17 en TNF-α (P < 0,05; Figuur 6F,G).
Figuur 1: De grondstoffen die nodig zijn voor Du-moxibustie. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Het maken van een moxa kegel. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Bereid gemberwater en maak een trapeziumvormige gemberkolom. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4: Locatie van GV14 en GV2 in muizen. (A) GV14 gelokaliseerd op de processus subspinosus van de zevende halswervel; GV2 gelegen in het hiaat sacrale kanaal. (B) Schematisch diagram van de Du moxibustie op de muis. (C) Gestimuleerd gebied van Du moxibustie. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 5: Werkingsprocedure van Du-moxibustie bij muizen. (A) Scheer het haar en smeer het gembersap op de muis in buikligging. (B,C) Strooi TCM-poeder gelijkmatig. (D) Bedek het poeder met moerbeipapier. (E) Bevestig de gemberkolom stevig op het moerbeipapier. (F) Plaats een moxakegel op de gemberkolom; Steek het dan aan. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 6: Effecten van Du-moxibustie op motorische coördinatie, autonome beweging en IL-17- en TNF-α-niveaus. (A) De gewrichtszwellingsscores bij muizen. (B) De latentietijd in de rotarod-test. (C-E) Totale afstand, gemiddelde snelheid en spoorschema van OFT. (F) IL-17-spiegels in plasma. (G) TNF-α niveaus in plasma. De waarden worden uitgedrukt als het gemiddelde ± SEM (n = 6). ##P < 0,01, #P < 0,05 versus de controlegroep; $$P < 0,01, $P < 0,05 ten opzichte van de modelgroep. Afkortingen: IL = interleukine; TNF = tumornecrosefactor; OFT = open veldtest. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 7: HE-kleuring van het enkelgewricht. (A) De gewrichtsholte was glad zonder inflammatoire infiltratie in de controlegroep. (B) In de modelgroep werden synoviumhyperplasie en infiltratie waargenomen in de gewrichtsholte. (C) In de Du-moxibustiegroep was de gewrichtsholte van muizen glad en werd oedeem verlicht. Schaalbalken = 200 μm. Afkorting: HE = hematoxyline-eosine. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
AS manifesteert zich klinisch als pijn in de rug, lumbale en gewrichtszwelling, en misvorming van de wervelkolom en gewrichtsstijfheid kunnen in ernstige gevallen optreden26. Vroege diagnose en behandeling kunnen de kwaliteit van leven verbeteren, het aantal invaliditeiten verminderen en de prognoses van patiënten met AS verbeteren. Volgens de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) wordt aangenomen dat AS wordt veroorzaakt door een tekort aan Yang in de nieren en de Du-meridiaan, evenals een opeenhoping van inwendig koud kwaad. TCM is van mening dat moxibustie, gebaseerd op het concept van meridianen, Qi kan genereren die het lichaamsoppervlak verwarmt. Deze Qi reist vervolgens naar beneden langs de meridianen en acupunten. In The Inner Canon of Huangdi (een zeer klassiek en belangrijk TCM-meesterwerk) wordt opgetekend dat "de zieke Du-meridiaan wordt behandeld". Omdat AS zich in de Du-meridiaan bevindt, wordt het stimuleren van de Du-meridiaan gebruikt als therapeutisch punt. De Du-meridiaan wordt beschouwd als de oceaan van Yang-kanalen waar Yang Qi zijn hoogtepunt bereikt. Moxibustie op de Du-meridiaan kan Yang qi aanvullen, het effect van de Du-meridiaan activeren en het verwarmende effect van nier-Yang aanpassen, dat wil zeggen de immuunregulatiefunctie van de westerse geneeskunde verbeteren.
Vanuit het perspectief van de westerse geneeskunde speelt het ruggenmerg een belangrijke rol bij het overbrengen van neurale informatie. Du moxibustie, dat inwerkt op de in- en uitgang van spinale zenuwwortels, kan de functie en het regulerende mechanisme van het zenuwstelsel beïnvloeden door de regulatie van neurotransmitters. In de jaren 1990 werd aangetoond dat Du-moxibustie het gehalte aan β-endorfines in de hypothalamus van ratten verhoogde, waardoor het een centraal pijnstillendeffect had7. Bovendien is enthesitis een veel voorkomende complicatie van AS, gekenmerkt door aanhoudende pijn en spierstijfheid, die bij ernstige aandoeningen de bewegingen van gewrichten en lichamen kunnen beïnvloeden. Als een TCM-behandelmethode die klinisch is gevalideerd, kan Du-moxibustie effectief ontstekingen verlichten, weefselherstel bevorderen en enthesitis verbeteren bij de behandeling van AS.
Met name de effecten van acupunctuur en moxibustie komen vooral tot uiting in de volgende aspecten. Ten eerste bevorderen ze de bloedcirculatie en de absorptie van ontstekingen. Du-moxibustie stimuleert de bloedcirculatie en het metabolisme in de weefsels rond de wervelkolom door het verwarmende effect en bevordert de opname van ontstekingen en weefselherstel, waardoor de mate van ontsteking en pijn van peesaanhechtingsontsteking wordt verminderd. Ten tweede verbeteren ze de spier- en ligamentspanning. Het stimulerende effect van Du-moxibustie kan de spierspanning rond de wervelkolom verbeteren, de verharde zachte weefsels ontspannen, de activiteit van de wervelkolomgewrichten bevorderen en de pijn en stijfheid verminderen die worden veroorzaakt door spierspanning en het uitrekken van ligamenten. Samenvattend kan Du-moxibustie, als aanvullende therapie, de activiteiten van het zenuwstelsel, het immuunsysteem en de bloedsomloop van het lichaam uitgebreid reguleren door in te werken op het ruggenmerggebied, waardoor het lichaam als geheel evenwichtiger wordt.
Ontsteking is de belangrijkste manifestatie van AS27. TNF-α is een multi-effector cytokine en ontstekingsfactor die wordt geproduceerd onder stimulatie van mononucleaire macrofagen28. De activiteit van ALP en collageensynthese kan worden geremd door TNF-α, wat resulteert in botverlies en kraakbeenvernietiging29. In de afgelopen jaren hebben studies aangetoond dat IL-17 een belangrijke rol speelt in de pathogenese van AS, wat volledig is aangetoond in een review30. IL-17 kan direct inwerken op osteoblasten, de expressie van nucleaire transcriptiefactor-κB (NF-κB) receptoractivatorligand (RANKL) bevorderen en de robuuste generatie van osteoclasten bevorderen. Tegelijkertijd beïnvloedt IL-17 ook mesenchymale stamcellen (MSC's), waardoor hun proliferatie wordt geïnduceerd en hun differentiatie in osteoblasten wordt bevorderd31. Kenna32 et al. ontdekten dat het niveau van IL-17 in het perifere bloed van AS-patiënten bijna twee keer zo hoog was in vergelijking met gezonde controles. De studie suggereert dat IL-17-antagonisten een nieuwe optie kunnen zijn voor AS-patiënten die niet goed reageren op TNF-α-antagonisten33. Een klinische studie toonde aan dat een doseringsregime van IL-17-antagonisten superieur was aan een placebo voor het verbeteren van radiografische tekenen en symptomen van axiale spondyloartritis bij patiënten34. De resultaten van deze studie toonden aan dat de plasmaspiegels van TNF-α en IL-17 in de modelgroep significant hoger waren dan die in de controlegroep, en dat de plasmaspiegels van TNF-α en IL-17 significant waren gedaald na behandeling met Du-moxibustie.
Du-moxibustietherapie maakt vakkundig gebruik van de compatibele technieken van TCM om meridianen, acupunten, Chinese kruidengeneeskunde en moxibustie te integreren. De grondstoffen van Du-moxibustietherapie omvatten voornamelijk moxa-fluweel, gember en TCM-poeder. Vanuit het perspectief van TCM heeft moxa-fluweel, een verwerkt product van bijvoet, de functie om collateralen te activeren, kou te verdrijven en pijn te verlichten. Gember speelt een rol bij het verlichten van uitwendige symptomen en het verdrijven van verkoudheid. Modern onderzoek toont ook aan dat gember ontstekingsremmende en pijnstillende eigenschappen heeft35. Door de huid vóór de behandeling af te vegen met gembersap, worden de poriën geopend en wordt de transdermale permeatie bevorderd36, naast het helpen hechten van het TCM-poeder aan de huid. De trapeziumvormige gemberkolom is stevig aan de achterkant bevestigd om een stevige basis te bieden voor de moxa-kegel. Na het verbranden van moxakegels werken de effecten van vuurkracht, gember en TCM-poeder samen op de Du-meridiaan. Met het oog op de pathogenese van Yang-deficiëntie bij deze ziekte, werkt Du-moxibustie rechtstreeks in op de plaats van de ziekte, verwarmt de meridianen, verspreidt koude, vult Yang Qi en essentie aan, bevordert de bloedcirculatie en balanceert Yin en Yang om de wortel van de ziekte te behandelen.
Bij het uitvoeren van Du-moxibustie moet rekening worden gehouden met verschillende details. Ten eerste is de operatieplaats van Du-moxibustie gefixeerd, van het Dazhui-punt (GV14) tot het Yaoshu-punt (GV2) (anatomisch van de 7eprocessus spinosus cervicale wervelkolom tot de staartwervel, inclusief de hele wervelkolom), wat consistent is met de incidentieplaats van AS (Figuur 4). Ten tweede zijn de vochtigheid en dikte van gember belangrijk. Het overtollige gembersap moet eruit worden geperst nadat de gember tot gembermodder is verwerkt, zodat de gembermodder niet korrelig aanvoelt en de dikte geschikt is om in de trapeziumvormige gemberkolom te worden verwerkt. Hoge luchtvochtigheid en vocht in de gembermodder kunnen gemakkelijk de penetratie van moxibustievuur belemmeren en de hoeveelheid moxibustiestimulatie verminderen. Als de gembergrondstof te droog is en de deeltjes te groot, is het moeilijk om de trapeziumvormige gemberkolom te maken, wat leidt tot snelle hittepenetratie en verbranding van de huid. Ten derde moet rekening worden gehouden met de grootte en stevigheid van de moxakegel. Moxa-kegels die worden gebruikt voor moxibustie bij muizen zijn ~4 cm lang en 0,5 cm in diameter en moeten strak zijn op het moment van bereiding. Een test voor de dichtheid is wanneer de kegel niet ontrafelt, zelfs niet nadat hij op een oppervlak is gevallen. Als de moxa-kegel niet compact genoeg is, zal dit leiden tot een vermindering van de hoeveelheid moxa-fluweel, een kortere brandtijd en een vermindering van de vuurkracht. Ten vierde, bij het aansteken van de moxa-kegel, moeten de kop, het midden en de staart van de moxa-kegel worden aangestoken met fijne wierook om de moxa-kegel langzaam te laten branden om het voedende effect van eb en vloed te bereiken. Ten vijfde is muskus een belangrijk ingrediënt in het medicinale poeder van moxibustie. De tweede dag na moxibustie zouden er kristalheldere blaren als kleine parels op de Du-meridiaan moeten zijn.
Een groot aantal klinische studies heeft de definitieve werkzaamheid van Du-moxibustie bij de behandeling van AS 4,5,6 bevestigd. Het onderzoek naar het werkingsmechanisme ervan bij dierproeven vordert echter langzaam. Door middel van onderzoek en innovatie heeft jarenlange ervaring met de werking van Du-moxibustie ons ertoe gebracht het gebruik ervan in muizenexperimenten te onderzoeken. Dit artikel beschrijft in detail de werkingsprocedures en voorzorgsmaatregelen van Du-moxibustie bij de behandeling van AS bij experimentele muizen. Daarnaast werd het effect van moxibustie op de motorische coördinatie en de plasmaspiegels van TNF-α en IL-17 bij AS-muizen waargenomen. Deze studie vormde de meest elementaire experimentele basis voor de studie van het mechanisme van Du-moxibustie bij de behandeling van AS. Er zijn nog enkele beperkingen aan deze studie. In toekomstige studies zullen we bijvoorbeeld aandacht besteden aan de evaluatie van verschillende parameters zoals placebo-moxibustie, dosis, bereik en behandelingstijd om de meest effectieve combinatieschema's te verkrijgen. In latere studies kunnen beeldvormingsmethoden worden gebruikt om de behandelingsresultaten op een meer intuïtieve manier te evalueren.
Het toepassingsperspectief van Du-moxibustietherapie is veelbelovend. De Du-meridiaan, bekend als het Governor Vessel, speelt een cruciale rol bij het reguleren van de stroom van Qi en bloed door het lichaam. Moxibustie, een traditionele Chinese therapie, omvat het verbranden van bijvoet op specifieke acupunten om de meridianen te stimuleren en het zelfgenezende mechanisme van het lichaam te bevorderen. In vergelijking met acupunctuur is Du-moxibustie een combinatie van verschillende technieken die inwerken op het lichaamsoppervlak, dat de kenmerken heeft van comfort en een sterk en breed werkingsbereik. Bovendien richt Du-moxibustietherapie zich op de rug en de wervelkolom, gericht op de route van de Du-meridiaan. Het kan het immuunsysteem van het lichaam versterken, de bloedcirculatie verbeteren en verschillende fysieke en mentale aandoeningen verlichten. De therapie heeft zijn effectiviteit bewezen bij de behandeling van ziekten zoals musculoskeletale aandoeningen, neurologische aandoeningen, gynaecologische aandoeningen en psychische problemen. Met de vooruitgang in onderzoek en technologie zal de toepassing van Du-moxibustietherapie naar verwachting verder worden uitgebreid. Toekomstige studies kunnen het potentieel ervan onderzoeken op gebieden zoals pijnbestrijding, stressvermindering, spijsverteringsstoornissen en aandoeningen van de luchtwegen. De combinatie van traditionele kennis en moderne wetenschappelijke inzichten zou kunnen leiden tot een betere integratie van Du-moxibustietherapie in de reguliere gezondheidszorg. Kortom, Du-moxibustietherapie is veelbelovend in zijn toepassing en integratie in verschillende gebieden van de gezondheidszorg. Verder onderzoek, klinische proeven en samenwerking tussen beoefenaars van traditionele Chinese geneeskunde en moderne beroepsbeoefenaren in de gezondheidszorg zijn essentieel om het volledige potentieel ervan te ontsluiten.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door het algemene programma van de National Natural Science Foundation of China (nr. 82174491) en het Qilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project (nr. Lu Weihan [2020]132). Met dank aan het Laboratory Animal Center van de Shandong University of Traditional Chinese Medicine voor het bieden van experimentele omstandigheden.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
References
- Sieper, J., Poddubnyy, D.
- Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
- Sari, İ, Öztürk, M. A., Akkoç, N.
- Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
- Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
- Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
- Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
- Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
- Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
- Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
- Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
- Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
- Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
- Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
- Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
- Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
- Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
- Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
- Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
- Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
- Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
- Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
- Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
- Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
- Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
- Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
- Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
- Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
- Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
- Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
- Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
- van der, H. D., et al. COAST-V study group. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
- Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
- Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).
