Summary
Bu yazıda deneysel farelerde ankilozan spondilit tedavisinde Du-yakı sırasında ameliyat prosedürleri ve alınması gereken önlemler ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.
Abstract
Ankilozan spondilit (AS), primer olarak aksiyel iskeleti etkileyen, giderek kötüleşen ve sakat bırakan bir artrit formudur. Bu hastalık esas olarak omurga ve sakroiliak eklemi içerir. Hastalığın ilerleyen dönemlerinde omurga ve sakroiliak eklemin kaynaşması meydana gelebilmekte ve omurga sertliği ve kifozun yanı sıra yürüme güçlüğü ile sonuçlanmakta, bu da iş ve günlük yaşam aktivitelerinin kalitesini ciddi şekilde etkileyerek hastaya, aileye ve topluma ağır bir yük getirmektedir. AS için alternatif bir tedavi olarak farmakoterapiye artan bir ilgi gösterilmiştir. Yakı, Geleneksel Çin Tıbbında (TCM) kullanılan eski bir terapötik tekniktir. Sıradan yakı temelinde geliştirilen benzersiz ve yenilikçi bir dış tedavi olan yakı tedavisi, AS üzerinde kesin bir terapötik etkiye sahiptir. Du-moxibustion, meridyenleri, akupunktur noktalarını, Çin bitkisel tıbbını ve yakıyı entegre etmek için TCM'nin uyumlu tekniklerini ustaca birleştirir. Bu makale, AS tedavisinde Du-yakı mekanizmasının incelenmesi için deneysel bir temel sağlamak amacıyla deneysel farelerde Du-yakı sırasında alınacak operasyon prosedürlerini ve alınacak önlemleri ayrıntılı olarak açıklamaktadır.
Introduction
Ankilozan spondilit (AS), primer olarak aksiyel iskeleti etkileyen, giderek kötüleşen ve sakat bırakan bir artrit formudur. En son epidemiyolojik araştırmaya göre, dünyadaki insanların ~%0,01-%1,8'i bu durumdan muzdariptir1, bunların çoğu genç erkeklerdir (erkek/kadın oranı ~2-3:1'dir)2. Çin popülasyonunda AS insidansı %0.2-%0.4'tür. Bu hastalık esas olarak omurga ve sakroiliak eklemi içerir. Hastalığın ilerleyen dönemlerinde omurga ve sakroiliak eklemin kaynaşması ortaya çıkarak omurga sertliği ve kifozun yanı sıra yürüme güçlüğü ile sonuçlanabilir, bu da iş ve günlük yaşam aktivitelerinin kalitesini ciddi şekilde etkileyerek hastaya, aileye ve topluma ağır bir yük getirir1. Şu anda, AS için kesin bir çözüm yoktur ve hem farmakolojik hem de farmakolojik olmayan sağlanan tedaviler öncelikle ağrıyı hafifletmeye, hastalığın ilerlemesini yavaşlatmaya ve yaşam kalitesini artırmaya odaklanmaktadır. Son yıllarda, farmakoterapötik seçeneklerinçok sınırlı olması nedeniyle3, AS için alternatif bir tedavi haline gelen farmakoterapiye artan bir ilgi gösterilmiştir. Çin'de hastalar genellikle küçük yan etkileri olan ve tedavi sırasında büyük kolaylık sağlayan Geleneksel Çin Tıbbı'ndan (TCM) oluşan harici tedaviyi tercih ederler.
Yakı, TCM'de kullanılan eski bir terapötik tekniktir. Du-yakı, Du meridyeninin omurga segmentinde "köpüklü ilaçlı yakı"dan oluşan harici bir tedavi tekniğidir. Esas olarak AS tedavisinde kullanılır ve güvenlik ve etkinlik göstermiştir. Sıradan yakı ile karşılaştırıldığında, Du-yakı geniş bir yakı alanı, büyük bir moxa konisi, güçlü ateş gücü ve yüksek sıcaklıközelliklerine sahiptir 4. Sistematik bir inceleme ve meta-analiz, yakının AS5 için etkili bir tamamlayıcı tedavi olduğunu göstermektedir. Yakın zamanda yapılan bir çalışma, AS hastalarının klinik semptomlarının ve bazı inflamatuar faktörlerinin yakı6 ile düzeldiğini doğrulamıştır. Çalışmalar, Du-yakının β-endorfinin beyin içeriğini artırabildiğini ve merkezi bir analjezik etki7 uygulayabildiğini, HLA-B27 geninin8 ekspresyonunu aşağı regüle edebildiğini ve AS'nin nüks oranını geciktirdiğini ortaya koymuştur. Du-yakı ayrıca inflamatuar indeks ESR (ESR) ve C-reaktif protein (CRP), tip I kollajenin C-terminal peptidi (CTX-I) ve Dickkopf1 proteini (DKK1) seviyelerini azaltarak AS'nin ilerlemesi üzerinde iyileştirici bir etkiye sahiptir9,10.
Başka bir klinik çalışma, Du-yakının, bağışıklık mekanizmasını dengelemek için düzensiz T hücresi alt kümelerini, Ig'yi ve kompleman C3'ü daha da ayarlayabildiğini gösterdi11. Kemik metabolizması açısından, yakı serum alkalin fosfataz (ALP) ve serum fosforunun (SP) yükselişini inhibe edebilir, serum kalsiyumunu (S-Ca), kemik mineral yoğunluğunu (BMD) ve kemik gücünü artırabilir12. Ayrıca, Du-moxibustion, AS hastalarında yorgunluk semptomlarını hafifletmek için omurga fonksiyonunu birden fazla noktada onarabilir13. Bazı hayvan çalışmaları, AS tedavisinde yakının potansiyel mekanizmasını ortaya koymuştur. Bir çalışma, yakının genel sağlık durumunu önemli ölçüde iyileştirdiğini, pençe kalınlığı seviyelerini azalttığını ve omurganın bağ dokusu örneklerinde IL-1β, PGE2, IL-6 ve TNF-α seviyelerini azalttığını göstermiştir. Metabolik yol analizi, tanımlanan metabolitleri TCA döngüsünün yanı sıra lipit, amino asit, bağırsak florası ve pürin metabolizmasına bağladı14. Başka bir çalışma, yakının pro-inflamatuar sitokinler, IL-1β, TNF-α, IL-17 ve IL-6'nın ekspresyonunu baskıladığını gösterdi; RANKL, RANK, ALP ve OCN'nin mRNA seviyelerini azalttı; ve AS farelerinde histopatolojik özellikleri geliştirdi15.
Bu çalışmalar yakının AS tedavisinde etkili olabileceğini düşündürse de, bu bulguları doğrulamak ve AS'li hastalarda yakı için optimal tedavi protokolünü belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır. Ekibimiz, 35 yılı aşkın bir süredir Çin klinik pratiğinde yaygın olarak yürütülen ve uygulanan geleneksel Çin yakısının temel teorisine ve pratik işleyişine dayalı olarak yakı tedavisini yarattı ve değiştirdi. Yakı ile AS tedavisi ile ilgili az sayıda yüksek kaliteli çalışma olmasına rağmen, AS tedavisindeki endikasyonu kanıtlarla desteklenmiştir. Bununla birlikte, AS'yi Du-yakı ile tedavi etme mekanizması daha fazla çalışmaya değer. Hayvan çalışması, AS tedavisinde Du-yakı mekanizmasını araştırmak için önemli bir yöntemdir. Du-yakının klinik çalışması nispeten olgundur, ancak hayvan deneylerinde mekanizmanın incelenmesinde nadiren kullanılır. Bu yazıda AS deney farelerinin tedavisinde yakı sırasında yapılması gereken işlemler ve alınması gereken önlemler ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm hayvan deneyleri, Shandong Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Deneysel Hayvan Refahı Etik İnceleme Komitesi tarafından onaylanmıştır (No. SDUTCM20230831301).
1. Hayvan hazırlama
- Deney gruplarını ve grup başına hayvan sayısını önceden belirleyin.
- Erkek BALb/c fareleri seçin, onları 22 ± 1 °C sabit sıcaklıkta, %60 ± %5 sabit nemde ve 12 saat günlük döngü ışık ortamında barındırın.
2. AS fare modelinin kurulması
NOT: AS modeli, klasik bir modelleme yöntemiolan kıkırdak proteoglikan (PG) ile indüklenmiştir 16,17,18,19,20,21. BALB / c suş fareleri, tendinit ve spondiliti indüklemek için tekrar tekrar PG ile aşılandı. Bu protokolde kullanılan malzemeler, reaktifler ve aletlerle ilgili ayrıntılar için Malzeme Tablosuna bakın.
- 1,5 mL'lik bir santrifüj tüpüne 200 μL PG ve CFA (veya IFA) çekmek için 200 μL'lik bir pipet kullanın. Santrifüj tüpündeki sıvıyı karıştırmak için hafifçe çalkalayın.
- Santrifüj tüpünü homojenizasyon için doku öğütücüye yerleştirin ve ardından 4 dakika buz üzerinde inkübe edin. Doku öğütücüde aşağıdaki parametreleri ayarlayın: 60 Hz, öğütme 30 s, aralık 10 s toplam 6 döngü.
- 1 mL'lik bir şırınga ile santrifüj tüpünden 0.2 mL emülsifiye PG proteini çıkarın.
- Fareyi sol elinizle tutun ve sabitleyin. Şırınga yerleştirildiğinde karın organlarına zarar vermemek için fareyi sırtüstü pozisyonda tutun, başını kuyruktan daha aşağıda tutun.
- Sağ elinizi kullanarak karnı alkollü bezlerle sterilize edin.
- Şırınga sağ elinizdeyken, iğneyi karnın alt yarısındaki linea alba ventralis'in soluna veya sağına hafifçe sokun.
- İğneyi orta karın çizgisine paralel olarak deri altından 3-5 mm itin ve ardından iğneyi cilde 45° açıyla karın boşluğuna itin.
- Peritona nüfuz edin, iğne tıkacını çekin ve emülsifiye edilmiş PG proteinini yavaşça enjekte edin.
3. Yakı
NOT: Yakı için en önemli üç hammaddeyi önceden hazırlayın (Şekil 1).
- Moxa kozalakları hazırlayın. Kadifeyi elinize alın, iki avuç içi zıt yönlere bakacak şekilde kadifeyi bir mil şekline sokmak için bir büküm kuvveti uygulayın (Şekil 2)
- Zencefili küçük parçalar halinde kesin ve bir meyve sıkacağı içinde püre haline getirin (Şekil 3). Zencefil püresini pamuklu gazlı bezden süzün. Bir sonraki adıma hazırlanmak için zencefil suyunu ve zencefil çamurunu zencefil püresinden ayırın.
- 10 gr zencefil çamuru ve 20 mL zencefil suyu hazırlayın ve daha sonra kullanmak üzere kağıt bardaklara koyun.
- 0.1 g TCM tozunu (tarçın tozu, karanfil tozu, notopteryjium tozu, antaridin tozu ve yapay misk karışımı)22 tartın ve bir havanda öğütün.
- Fareleri hayvan anestezi makinesinin anestezi indüksiyon kutusuna yerleştirin ve 2 L / dak akış hızında% 2-3 izofluran ve oksijen karışımı ile uyuşturun.
- Başlangıçta bir irkilme refleksinin yokluğunu gözlemleyerek anestezi derinliğini değerlendirin ve hafif bir ayak parmağı sıkışmasına yanıt olarak bir pedal refleksinin olup olmadığını kontrol ederek cerrahi anestezi seviyesini doğrulayın.
- Fare cerrahi düzlem anestezisine ulaştıktan sonra, kutudan çıkarın ve yüzüstü pozisyonda ameliyat masasına sabitleyin. Farenin ağzını ve burnunu anestezinin çıkışıyla hizalayın.
- Anesteziyi, izofluran ve oksijenin yeniden solunmayan bir devre yoluyla iletildiği anestezik makineye bağlı bir maske aracılığıyla uygulayın. Anesteziyi koruyun ve tüm çalışma prosedürü boyunca fareyi 37 °C'lik bir ısıtma yastığı üzerinde tutun. Kurumayı önlemek için gözlere kayganlaştırıcı sürün.
- Akupunktur noktalarını bulun ve stimülasyon alanını tanımlayın (Şekil 4).
- Farenin arkasındaki ten rengi deri görünene kadar farenin arkasındaki kılları tıraş edin. Epilasyon genişliğinin ~ 1.5 cm olduğundan ve uzunluğun yedinci servikal omurdan kuyruk omuruna kadar olduğundan emin olun (Şekil 5A).
- Hazırlanan zencefil suyunu pamuklu gazlı bezle traş edilen bölgeye uygulayın (Şekil 3).
- TCM tozunu farenin arkasının orta çizgisine bir yazı fırçasıyla eşit şekilde serpin ve dut kağıdıyla örtün (Şekil 5B-D).
- Zencefil çamuru ile 6 cm uzunluğunda, 1,5 cm genişliğinde ve 3 mm kalınlığında trapez bir zencefil sütunu yapın. Zencefil sütununu dut kağıdına sabitleyin (Şekil 5E).
- Zencefil kolonunun orta hattının üzerinde bir oluk açın (Şekil 3) ve moxa konisini zencefil kolonunun üzerine yerleştirin.
- Bir önceki moxa konisi yandıktan sonra yeni bir moxa konisi yerleştirerek moxa konisini yakın. Farenin yanmasını önlemek için zencefil sütununun sertliğini kontrol edin, toplam üç koni yansın (Şekil 5F).
- Moxa kozalaklarının yanmasından sonra zencefili ve TCM tozunu silin ve farenin arkasını temizleyin. Bu noktada anesteziyi durdurun.
- Farenin, yiyecek ve suya sınırsız erişimi olan yeni bir kafeste bilincini yeniden kazanmasına izin verin. Kurtarma işlemine yardımcı olması için kafesi ısıtılmış bir ped üzerine yerleştirin. Yeterli bilinci geri kazanana kadar hayvanı izleyin.
- Fare tamamen iyileştikten sonra, normal yuvasına geri döndürmeden önce düzeltme refleksinin varlığını onaylayın.
NOT: Operasyon sırasında, zayıf nefes almayı önlemek için farelerin zihinsel durumunu izlemek gerekir. Haşlanmayı önleyin, ancak fareleri sıcak tutun ve pençelerin ve kuyruğun morarmasını önleyin.
4. Artrit indeksinin (AI) değerlendirilmesi
- AI puanını üç kez değerlendirin: modellemeden önce, modellemeden sonra ve tedaviden sonra. Değerlendirme standartları aşağıdaki gibidir: 0, kızarıklık veya şişlik yok; 1, birkaç ayak parmağında hafif kızarıklık veya şişlik; 2, çoğu ayak eklemi ve ayak parmağında kızarıklık ve şişlik; 3, ayaklarda ve ayak bileği ekleminin altında ciddi kızarıklık ve şişlik; ve 4, ayaklarda ve ayak bileği ekleminde kızarıklık ve şişlik23.
- Dört pençenin de AI puanlarını maksimum 16 değeriyle hesaplayın.
5. Rotarod testi
NOT: Rotarod testi, farelerin dönen tambur üzerinde geçirdikleri süreyi kaydederek motor koordinasyonunu ve dengesini değerlendirmek için kullanılır. Bu deney, 20 dakikalık aralıklarla ayrılmış üç denemeden oluşuyordu. Resmi test verileri üçüncü denemeden kaydedildi ve ilk ikisi eğitim tatbikatları olarak hizmet etti.
- Fareleri, 4 s 40 üzerinde 300 ila24 rpm arasında sürekli hızlanma altında dönen dönen tamburlara yerleştirin.
- Gecikme süresini ölçün (fare çubuktan düşene kadar geçen süre). Düştüğünde yaralanmayı önlemek için dolgu sağlayın.
6. Açık alan testi (OFT)
NOT: OFT, patolojik davranışı tanımlamayı amaçlayan otonom hareket durumunu değerlendirmek için kullanılır. Aparatı oluşturmak için dört kare açık alan arena (50 cm x 50 cm x 40 cm) bir araya getirildi. Kutunun alt kısmı dokuz eşit kareye bölünmüştür.
- Laboratuvarın arka plan gürültüsünü 65 dB'nin altına kadar kontrol edin.
- Her denemeden önce tüm aparatı %75 etanol ile silin.
- Ortamlarına uyum sağlamaları için tüm fareleri testten 1 saat önce test odasına yerleştirin.
- Fareleri kare açık alan arenalarına koyun ve 10 dakika boyunca keşfetmelerine izin verin.
- 10 dakika boyunca toplam mesafeyi ve hareket hızını kaydedin.
7. Ötenazi ve örnek toplama
- Fareyi anestezi indüksiyon kutusuna yerleştirin ve 2 L/dk akış hızında% 2-3 izofluran ve oksijen karışımı ile uyuşturun. Fare, pedal refleksi eksikliği ile onaylanan derin anestezi durumuna girdiğinde, idame anestezisi için ameliyat masasına aktarın.
- Baskın olmayan elinizle fareyi tutun ve sabitleyin.
- Gözbebeklerinin tıkanmasını ve dışarı çıkmasını sağlamak için göz bölgesine hafifçe bastırın.
- Kılların neden olduğu hemolizi önlemek için farenin bıyıklarını kesmek için makas kullanın.
- Ayak parmağı sıkışmasına yanıt olarak pedal refleksinin olup olmadığını kontrol ederek anestezi derinliğini onaylayın. Göz küresini kavramak için forseps kullanın ve hızlı bir şekilde çıkarın, kanın göz yuvasından bir mikrosantrifüj tüpüne akmasına izin verin.
NOT: Kardiyak ponksiyon gibi alternatif kan alma yöntemleri de kullanılabilir. - Kan damlama hızı yavaşladığında, kan pompalamayı hızlandırmak ve daha fazla kan elde etmek için farenin kalp bölgesine hafifçe bastırın. Ardından, servikal çıkık kullanarak fareyi ötenazi yapın.
- Baskın olmayan elde forseps kullanarak bacağı ayak bileği ekleminin hemen üzerinde tutun. Ardından, makas kullanarak ayak bileği ekleminin hemen üzerindeki bacağı kesin.
8. Histolojik analiz
- Ayak bileği örneklerini 24 saatten fazla %4 paraformaldehit içine daldırın. 1 ay boyunca% 10 EDTA'da (pH = 7.4) kireçten arındırın.
- Numuneleri 2 saat boyunca% 4 paraformaldehit içinde bekletin.
- Ardından, numuneleri artan etanol konsantrasyonları (%70, %80, %90, %100, %100, %100) gradyanına batırın. Her etanol konsantrasyonunu 1 saat bekletin.
- Numuneleri 3 saat ksilen içinde bekletin.
- Ayak bileği örneklerini 7 saat boyunca parafine batırın. Parafin bloklarını 4 °C'lik bir buzdolabında bir kenara koyun.
- Yarı otomatik bir parafin kesitleme makinesi kullanarak parafin bloklarını 6 μm kalınlığa kadar dilimleyin.
- Mum alma işlemini tamamlamak için dilimleri 4 x 5 dakika ksilen içinde bekletin.
- Dilimleri azalan etanol konsantrasyonları (%100, %100, %95, %75) gradyanlarında her biri 2 dakika bekletin. Damıtılmış suda 2 dakika bekletin.
- Dilimleri 10 dakika hematoksilen ile boyayın ve 5 saniye boyunca damıtılmış suyla durulayın.
- Dilimleri farklılaştırma sıvısında 30 saniye bekletin ve 5 saniye damıtılmış suyla durulayın.
- Dilimleri 1 dakika eozin ile boyayın ve 3 dakika damıtılmış su ile durulayın.
- Dilimleri artan etanol konsantrasyonları (%80, %95, %100, %100) gradyanında her biri 1 dakika bekletin. 3 x 3 dakika ksilen içinde bekletin ve dilimlerikapatın 25.
9. Enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA)
- Üreticinin talimatlarına göre ilgili kitleri kullanarak plazmadaki IL-17 ve TNF-α konsantrasyonlarını ölçün.
10. İstatistiksel analiz
- Verileri, ortalamanın (SEM) ortalama ± standart hatası olarak ifade edin.
- Tek yönlü varyans analizi (ANOVA) veya iki yönlü tekrarlanan ölçümler ANOVA ve ardından Bonferroni veya Tamhane T2'nin post hoc testleri ile anlamlılığı belirleyin.
- P < 0.05'in istatistiksel olarak anlamlı olduğunu düşünün.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
PG kaynaklı model fareler, ekstremitelerde ve ayak parmaklarında kızarıklık ve şişme ile karakterize periferik artrit semptomları geliştirdi ve AS'nin tezahürüne çok benzeyen 14. hafta gibi erken bir tarihte yavaş yavaş eksenel artrit geliştirdi. Bu nedenle, son enjeksiyondan22 hafta sonra artrit indeksi (AI) 3 puanın üzerindeyse AS fare modeli başarılı kabul edildi. Farelerin pençeleri şişmiş göründüğünde, Du-moxibustion tedavisi haftada bir kez toplam 3x olarak gerçekleştirildi. Tedaviden sonra, farelere izofluran derin anestezi altında servikal çıkık ile ötenazi yapıldı, kanları alındı ve ayak bilekleri eksize edildi.
Yakının motor koodinasyon ve otonomik hareket üzerine etkileri
Sığır PG kaynaklı AS, Du meridyenindeki Du-yakının motor koordinasyonu üzerindeki etkisini gözlemlemek için bir model olarak benimsenmiştir. Başlangıçta, modelin başarılı olup olmadığını değerlendirmek için eklem şişme skoru kullanıldı ve motor koordinasyon ve otonomik hareket rotarod testi ve OFT kullanılarak değerlendirildi.
Yapay zekanın değerlendirilmesi periferik artritin şiddetini belirledi. Modellemeden sonra, iki yönlü tekrarlanan ölçümler ANOVA, model ve Du-yakı gruplarındaki eklem şişme skorlarının, Du-yakı öncesi kontrol grubundakilere kıyasla anlamlı olarak arttığını ortaya koydu (P < 0.01; Şekil 6A). Yakı tedavisi, Du-yakı sonrası model grubuna kıyasla eklem şişme skorlarını azalttı (P < 0.05; Şekil 6A).
Motor koordinasyon ve dengeyi değerlendirmek için rotarod testi kullanıldı. İki yönlü tekrarlı ölçümler ANOVA, zaman içinde (F = 13.928, P = 0.000 < 0.05) ve zaman ve grubun etkileşim etkileri (F = 12.583, P = 0.000 < 0.05) arasında anlamlı farklılıklar ortaya koymuştur. Modellemeden sonra, kontrol grubunun gecikme süresi modelleme öncesinden farklı değildi. Bununla birlikte, modellemeden sonra, model ve Du-yakı gruplarının gecikme süreleri, kontrol grubundakilere kıyasla anlamlı olarak azalmıştır (P < 0.01; Şekil 6B) ve model grubu ile Du-yakı grubu arasında anlamlı bir fark yoktu (P > 0.05; Şekil 6B). Tedaviden sonra, Du-yakı grubunun gecikme süresi, model grubununkine kıyasla önemli ölçüde arttı (P < 0.05; Şekil 6B). Bu sonuçlar, Du-yakının AS farelerinde motor koordinasyonu iyileştirmede etkili olduğunu göstermiştir.
Otonomik hareketi saptamak için OFT yapıldı. Parametreler yazılım kullanılarak otomatik olarak toplandı ve analiz edildi (Şekil 6C-E); Bu çalışmada esas olarak toplam mesafe ve ortalama hız gözlenmiştir. Modelleme öncesi gruplar arasında toplam mesafe ve ortalama hız açısından anlamlı fark yoktu (P > 0.05; Şekil 6C,D). Modellemeden sonra, toplam mesafe ve ortalama hız, kontrol grubuna kıyasla önemli ölçüde azaldı (P < 0.05; Şekil 6C,D). Tedaviden sonra, Du-yakı grubunun toplam mesafesi ve ortalama hızı, model grubununkilere kıyasla önemli ölçüde arttı (P < 0.05; Şekil 6C,D). Bu sonuçlar, Du-yakının AS farelerinde otonomik hareketi iyileştirmede etkili olduğunu göstermiştir.
Du-yakının ayak bileği eklem patolojisi üzerine etkileri
Ayak bileği eklemindeki patolojik değişiklikleri gözlemlemek için HE boyaması kullanıldı. Kontrol grubunda sinovyum yapısında herhangi bir hasar, sinovyumda tıkanıklık ve belirgin inflamatuar hücre infiltrasyonu ve nekrozu yoktu. Bununla birlikte, model grubunda, inflamatuar hücre infiltrasyonu ve doku ödemine ek olarak eklem boşluğunda sinovyum hiperplazisi ve infiltrasyonu gözlendi. Yapay zeka değerlendirmesi ile birlikte, AS modelinin başarıyla kurulduğu kanıtlandı. Model grubu ile karşılaştırıldığında, Du-yakı grubundaki farelerin sinovyumu daha sağlamdı, interstisyel ödem azaldı ve eklem kıkırdağı nispeten sağlamdı (Şekil 7).
Yakının plazma IL-17 ve TNF-α düzeyleri üzerine etkileri
Plazmada IL-17 ve TNF-α ölçmek için ELISA yapıldı. Model grubunun plazma IL-17 ve TNF-α düzeyleri kontrol grubuna göre anlamlı olarak artmıştı (P < 0.01; Şekil 6F,G). Yakı plazma IL-17 ve TNF-α düzeylerini düşürdü (P < 0.05; Şekil 6F,G).
Şekil 1: Du-yakı için gerekli hammaddeler. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Bir moxa konisi yapmak. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Zencefil suyu hazırlayın ve yamuk bir zencefil sütunu yapın. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: Farede GV14 ve GV2'nin yeri. (A) Yedinci servikal omurun subspinöz sürecinde bulunan GV14; GV2 hiatus sakral kanalında bulunur. (B) Fare üzerindeki Du yakısının şematik diyagramı. (C) Uyarılmış Du yakı alanı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5: Farede Du-moxibustion operasyon prosedürü. (A) Saçı tıraş edin ve zencefil suyunu yüzüstü pozisyonda farenin üzerine sürün. (B,C) TCM tozunu eşit şekilde serpin. (D) Tozu dut kağıdı ile örtün. (E) Zencefil sütununu dut kağıdına sıkıca sabitleyin. (F) Zencefil sütununa bir moxa konisi koyun; Sonra yakın. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 6: Yakının motor koordinasyon, otonomik hareket ve IL-17 ve TNF-α seviyeleri üzerindeki etkileri. (A) Farelerde eklem şişmesi skorları. (B) Rotarod testindeki gecikme süresi. (C-E) OFT'nin toplam mesafesi, ortalama hızı ve parkur diyagramı. (F) Plazmada IL-17 seviyeleri. (G) Plazmada TNF-α seviyeleri. Değerler ortalama ± SEM (n = 6) olarak ifade edilir. ##Kontrol grubuna karşı P < 0.01, #P < 0.05; $$Model grubuna kıyasla P < 0.01, $P < 0.05. Kısaltmalar: IL = interlökin; TNF = tümör nekroz faktörü; OFT = açık alan testi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 7: Ayak bileği ekleminin HE boyaması. (A) Kontrol grubunda eklem boşluğu inflamatuar infiltrasyon olmaksızın pürüzsüzdü. (B) Model grubunda eklem boşluğunda sinovyum hiperplazisi ve infiltrasyon gözlendi. (C) Du-moxibustion grubunda, farelerin eklem boşluğu pürüzsüzdü ve ödem hafifledi. Ölçek çubukları = 200 μm. Kısaltma: HE = hematoksilen-eozin. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
AS klinik olarak sırt, bel ve eklem şişliği ağrısı olarak kendini gösterir ve ağır vakalarda omurga deformitesi ve eklem sertliği oluşabilir26. Erken tanı ve tedavi, AS'li hastaların yaşam kalitesini artırabilir, özürlülük oranlarını azaltabilir ve prognozlarını iyileştirebilir. Geleneksel Çin tıbbına (TCM) göre, AS'nin böbrekte ve Du meridyeninde Yang eksikliğinin yanı sıra dahili olarak soğuk kötülüğün birikmesinden kaynaklandığına inanılmaktadır. TCM, meridyenler kavramına dayanan yakının vücudun yüzeyini ısıtan Qi üretebileceği görüşündedir. Bu Qi daha sonra meridyenler ve akupunktur noktaları boyunca aşağı doğru hareket eder. Huangdi'nin İç Kanonu'nda (çok klasik ve önemli bir TCM şaheseri), "hastalıklı Du meridyeninin tedavi edildiği" kaydedilmiştir. AS, Du meridyeninde yer aldığından, Du meridyeninin uyarılması terapötik bir nokta olarak kullanılır. Du meridyeni, Yang Qi'nin zirveye ulaştığı Yang kanallarının okyanusu olarak kabul edilir. Du meridyenindeki yakı, Yang qi'yi tamamlayabilir, Du meridyeninin etkisini aktive edebilir ve böbrek Yang'ın ısınma etkisini ayarlayabilir, yani Batı tıbbının bağışıklık düzenleme işlevini artırabilir.
Batı tıbbı açısından omurilik, sinirsel bilginin iletilmesinde önemli bir rol oynar. Du yakı, omurilik sinir köklerinin giriş ve çıkışına etki eden, nörotransmiterlerin düzenlenmesi yoluyla sinir sisteminin işlevini ve düzenleyici mekanizmasını etkileyebilir. 1990'larda, Du-yakının sıçanların hipotalamusundaki β-endorfin içeriğini arttırdığı ve böylece merkezi bir analjezik etkiye sahip olduğu gösterilmiştir7. Ek olarak, entezit, şiddetli olduğunda eklem ve vücut hareketini etkileyebilen, kalıcı ağrı ve kas sertliği ile karakterize AS'nin yaygın bir komplikasyonudur. Klinik olarak doğrulanmış bir TCM tedavi yöntemi olan Du-yakı, iltihabı etkili bir şekilde hafifletebilir, doku onarımını teşvik edebilir ve AS tedavisinde enteziti iyileştirebilir.
Spesifik olarak, akupunktur ve yakının etkileri temel olarak aşağıdaki yönlere yansır. İlk olarak, kan dolaşımını ve iltihabın emilimini teşvik ederler. Du-yakı, ısınma etkisi ile omurgayı çevreleyen dokularda kan dolaşımını ve metabolizmayı uyarır ve inflamasyonun emilimini ve doku onarımını destekler, böylece tendon eki iltihabının inflamasyon derecesini ve ağrısını azaltır. İkincisi, kas ve bağ gerginliğini artırırlar. Du-yakının stimülasyon etkisi, omurga çevresindeki kas gerginliğini iyileştirebilir, sertleşmiş yumuşak dokuları gevşetebilir, omurga eklemlerinin aktivitesini teşvik edebilir ve kas gerginliği ve bağ gerilmesinin neden olduğu ağrı ve sertliği azaltabilir. Özetle, Du-yakı, yardımcı bir tedavi olarak, omurga bölgesine etki ederek vücudun sinir, bağışıklık ve dolaşım sistemlerinin aktivitelerini kapsamlı bir şekilde düzenleyebilir ve vücudu bir bütün olarak daha dengeli hale getirebilir.
Enflamasyon, AS27'nin ana belirtisidir. TNF-α, mononükleer makrofajların28 uyarılması altında üretilen çok etkili bir sitokin ve inflamatuar faktördür. ALP aktivitesi ve kollajen sentezi TNF-α tarafından inhibe edilebilir, bu da kemik kaybına ve kıkırdak yıkımına neden olabilir29. Son yıllarda, çalışmalar IL-17'nin AS patogenezinde önemli bir rol oynadığını bulmuştur ve bu bir incelemede tam olarak gösterilmiştir30. IL-17 doğrudan osteoblastlar üzerinde etkili olabilir, nükleer transkripsiyon faktörü-κB (NF-κB) reseptör aktivatör ligandının (RANKL) ekspresyonunu teşvik edebilir ve sağlam osteoklast oluşumunu teşvik edebilir. Aynı zamanda, IL-17 mezenkimal kök hücreleri (MSC'ler) de etkiler, proliferasyonlarını indükler ve osteoblastlara farklılaşmalarını teşvik eder31. Kenna32 ve ark. AS hastalarının periferik kanındaki IL-17 düzeyinin sağlıklı kontrollere kıyasla neredeyse iki kat arttığını bulmuşlardır. Çalışma, IL-17 antagonistlerinin, TNF-α antagonistlerine iyi yanıt vermeyen AS hastaları için yeni bir seçenek olabileceğini düşündürmektedir33. Klinik bir çalışma, IL-17 antagonistlerinin dozlama rejiminin, hastalarda radyografik aksiyal spondiloartrit belirti ve semptomlarını iyileştirmek için plasebodan daha üstün olduğunu göstermiştir34. Bu çalışmanın sonuçları, model grubundaki TNF-α ve IL-17 plazma düzeylerinin kontrol grubundakilere göre anlamlı olarak yüksek olduğunu ve TNF-α ve IL-17 plazma düzeylerinin yakı tedavisinden sonra önemli ölçüde azaldığını göstermiştir.
Du-yakı terapisi, meridyenleri, akupunktur noktalarını, Çin bitkisel tıbbını ve yakıyı entegre etmek için TCM'nin uyumlu tekniklerini ustaca kullanır. Yakı tedavisinin hammaddeleri esas olarak moxa kadife, zencefil ve TCM tozunu içeriyordu. TCM açısından bakıldığında, pelin işlenmiş bir ürünü olan moxa kadife, teminatları aktive etme, soğuğu giderme ve ağrıyı hafifletme işlevine sahiptir. Zencefil, dış semptomların giderilmesinde ve soğuk algınlığının giderilmesinde rol oynar. Modern araştırmalar ayrıca zencefilin anti-inflamatuar ve analjezik özelliklere sahip olduğunu göstermektedir35. Tedaviden önce cildi zencefil suyuyla silmek, gözeneklerin açılmasına ve transdermal geçirgenliğindesteklenmesine yardımcı olur 36, TCM tozunun cilde yapışmasına yardımcı olmanın yanı sıra. Trapez zencefil sütunu, moxa konisi için sağlam bir taban sağlamak üzere arkaya sıkıca sabitlenmiştir. Moxa konisi yakıldıktan sonra, ateş gücü, zencefil ve TCM tozunun etkileri Du meridyeni üzerinde birlikte çalışır. Bu hastalıkta Yang eksikliğinin patogenezi göz önüne alındığında, Du-yakı doğrudan hastalık bölgesine etki eder, meridyenleri ısıtır, soğuğu dağıtır, Yang Qi ve özü takviye eder, kan dolaşımını teşvik eder ve hastalığın kökenini tedavi etmek için Yin ve Yang'ı dengeler.
Du-yakı yapılırken, birkaç ayrıntı dikkate alınmalıdır. İlk olarak, Du-yakı operasyon bölgesi, Dazhui noktasından (GV14) Yaoshu noktasına (GV2) (anatomik olarak 7. servikal omurga spinöz sürecinden, tüm omurga dahil olmak üzere kuyruk omuruna kadar) sabitlenir ve bu da AS insidans bölgesi ile uyumludur (Şekil 4). İkincisi, zencefilin nemi ve kalınlığı önemlidir. Zencefil zencefil çamuruna işlendikten sonra fazla zencefil suyu sıkılmalıdır, böylece zencefil çamurunun tanecikli bir his bırakmaması ve kalınlığının yamuk zencefil sütununa yapılması uygundur. Zencefil çamurundaki yüksek nem ve nem, yakı ateşinin nüfuz etmesini kolayca engelleyebilir ve yakı stimülasyon miktarını azaltabilir. Zencefil hammaddesi çok kuruysa ve parçacıklar çok büyükse, trapez zencefil kolonunu yapmak zordur, bu da cildin hızlı ısı penetrasyonuna ve haşlanmasına neden olur. Üçüncüsü, moxa konisinin boyutu ve sertliği dikkate alınmalıdır. Farelerde yakı için kullanılan Moxa konileri ~4 cm uzunluğunda ve 0,5 cm çapındadır ve hazırlama sırasında sıkı olmalıdır. Sızdırmazlık testi, koninin bir yüzeye düşürüldükten sonra bile çözülmemesidir. Moxa konisi yeterince kompakt değilse, moxa kadife miktarında bir azalmaya, daha kısa yanma süresine ve ateş gücünde bir azalmaya yol açacaktır. Dördüncüsü, moxa konisini tutuştururken, moxa konisinin başı, ortası ve kuyruğu, gelgit ve akışın besleyici etkisini elde etmek için moxa konisinin yavaşça yanmasını sağlamak için ince tütsü ile yakılmalıdır. Beşincisi, misk, yakının tıbbi tozunda önemli bir bileşendir. Yakıdan sonraki ikinci gün, Du meridyeninde küçük inciler gibi kristal berraklığında kabarcıklar olmalıdır.
Çok sayıda klinik çalışma, AS 4,5,6 tedavisinde Du-yakının kesin etkinliğini doğrulamıştır. Bununla birlikte, hayvan deneylerinde etki mekanizması üzerine yapılan araştırmalar yavaş ilerlemektedir. Araştırma ve yenilik sayesinde, Du-moxibustion operasyonunda uzun yıllara dayanan deneyim, fare deneylerinde kullanımını araştırmamıza yol açtı. Bu yazıda, deney farelerinde AS tedavisinde Du-yakı ile ilgili çalışma prosedürleri ve önlemler ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Ek olarak, AS farelerinde yakının motor koordinasyon ve TNF-α ve IL-17 plazma seviyeleri üzerindeki etkisi gözlenmiştir. Bu çalışma, AS tedavisinde Du-yakı mekanizmasının incelenmesi için en temel deneysel temeli sağlamıştır. Bu çalışmanın hala bazı sınırlamaları vardır. Örneğin, gelecekteki çalışmalarda, en etkili kombinasyon şemalarını elde etmek için plasebo yakı, doz, aralık ve tedavi süresi gibi farklı parametrelerin değerlendirilmesine dikkat edeceğiz. Daha sonraki çalışmalarda, tedavi sonuçlarını daha sezgisel bir şekilde değerlendirmek için görüntüleme yöntemleri kullanılabilir.
Yakı tedavisinin uygulama beklentisi umut vericidir. Vali Gemisi olarak bilinen Du meridyeni, vücuttaki Qi ve kan akışını düzenlemede çok önemli bir rol oynar. Geleneksel bir Çin terapisi olan yakı, meridyenleri uyarmak ve vücudun kendi kendini iyileştirme mekanizmasını desteklemek için pelin belirli akupunktur noktalarında yakılmasını içerir. Akupunktur ile karşılaştırıldığında, Du-yakı, konfor özelliklerine ve güçlü ve geniş bir etki yelpazesine sahip olan vücut yüzeyine etki eden çeşitli tekniklerin bir kombinasyonudur. Ayrıca, Du-yakı terapisi, Du meridyeninin yolunu hedef alan sırt ve omurga bölgesine odaklanır. Vücudun bağışıklık sistemini güçlendirebilir, kan dolaşımını iyileştirebilir ve çeşitli fiziksel ve zihinsel koşulları hafifletebilir. Terapi, kas-iskelet sistemi bozuklukları, nörolojik durumlar, jinekolojik bozukluklar ve ruh sağlığı sorunları gibi hastalıkların tedavisinde etkinliğini göstermiştir. Araştırma ve teknolojideki ilerlemelerle, Du-yakı tedavisinin uygulanmasının daha da genişlemesi bekleniyor. Gelecekteki çalışmalar, ağrı yönetimi, stres azaltma, sindirim bozuklukları ve solunum rahatsızlıkları gibi alanlardaki potansiyelini keşfedebilir. Geleneksel bilgi ve modern bilimsel anlayışın birleşimi, Du-yakı tedavisinin ana akım sağlık uygulamalarına daha iyi entegrasyonuna yol açabilir. Sonuç olarak, Du-yakı tedavisi, çeşitli sağlık alanlarına uygulanmasında ve entegrasyonunda büyük umut vaat etmektedir. Daha fazla araştırma, klinik deneyler ve geleneksel Çin tıbbı pratisyenleri ile modern sağlık uzmanları arasındaki işbirliği, tam potansiyelini ortaya çıkarmak için çok önemlidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Acknowledgments
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Genel Programı (No.82174491) ve Qilu Geleneksel Çin Tıbbı Okulu Akademik Okul Kalıtım Projesi (No. Lu Weihan [2020]132). Shandong Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Laboratuvar Hayvanları Merkezi'ne bize deneysel koşullar sağladığı için teşekkür ederiz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
References
- Sieper, J., Poddubnyy, D.
- Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
- Sari, İ, Öztürk, M. A., Akkoç, N.
- Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
- Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
- Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
- Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
- Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
- Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
- Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
- Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
- Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
- Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
- Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
- Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
- Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
- Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
- Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
- Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
- Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
- Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
- Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
- Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
- Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
- Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
- Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
- Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
- Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
- Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
- Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
- Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
- van der, H. D., et al. COAST-V study group. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
- Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
- Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).
