Picrosirius-Rot-Färbung zur semiquantitativen histopathologischen Bewertung der Kollagenablagerung in Mausmodellen der chronischen Lungen-Allotransplantatabstoßung

Birte Ohm; Julia Thomé; Thierry Christmann; Maike Lind; Yoshito Yamada; Andreas Spörlein; Laura Anna Schneider; Steffen U. Eisenhardt; Wolfgang Jungraithmayr

doi:10.3791/66395

Methodenartikel

Picrosirius-Rot-Färbung zur semiquantitativen histopathologischen Bewertung der Kollagenablagerung in Mausmodellen der chronischen Lungen-Allotransplantatabstoßung

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DOI:

10.3791/66395

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21. März 2025

Birte Ohm^*¹ , Julia Thomé^*² , Thierry Christmann² , Maike Lind² , Yoshito Yamada³ , Andreas Spörlein⁴ , Laura Anna Schneider² , Steffen U. Eisenhardt² , Wolfgang Jungraithmayr¹

¹Department of Thoracic Surgery, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ²Department of Plastic and Hand Surgery, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ³Department of Thoracic Surgery, Kyoto University Hospital, ⁴Department of Otolaryngology, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Die Picrosirius-Rot-Färbung ist eine semiquantitative Methode zur objektiven Beurteilung der Kollagenablagerung beim murinen pulmonalen fibrotischen Remodeling in einer räumlich aufgelösten Weise. Neben der Bewertung der Gesamtkollagenablagerung ermöglicht die Picrosirius-Rot-Färbung die Unterscheidung von Kollagenfasern unterschiedlicher Dicke.

Zusammenfassung

Fibrose ist das pathophysiologische Kennzeichen der chronischen Abstoßung nach Lungentransplantation und die größte Hürde für ein langfristiges Überleben des Empfängers. Für die Untersuchung der chronischen Abstoßung stehen mehrere murine Lungentransplantationsmodelle zur Verfügung. Sie zeigen jedoch heterogene Ergebnisse bezüglich fibrotischer Veränderungen des Transplantats, und das histologische Ausmaß der Fibrose wird meist qualitativ berichtet. Daher kann ein ortsaufgelöster Ansatz, der eine statistische Analyse ermöglicht, bei der Bewertung der Fibrose in diesen Modellen hilfreich sein. In dieser Studie wird die Picrosirius-Rot-Färbung für eine semiquantitative Bewertung der Kollagenorganisation in murinen Lungentransplantaten vorgestellt und mit Standard-Hämatoxylin- und Eosin-, Masson-Trichrome- und Herovici-Färbungen verglichen. Die Färbung wurde an Schnitten aus zwei verschiedenen murinen Transplantationsmodellen durchgeführt, die auf kleineren und großen Histokompatibilitätskomplexen (MHC) basierten. Die Methode wurde für die semiquantitative Analyse der Kollagenorganisation in ganzen Lungenschnitten etabliert. Somit kann es als Werkzeug für murine experimentelle Modelle fibrotischer Lungenerkrankungen dienen.

Einleitung

Die Lungentransplantation ist die definitive therapeutische Option für Patienten, die an einer Lungenerkrankung im Endstadium leiden. Das Langzeitüberleben wird jedoch durch chronische Abstoßungsreaktionen beeinträchtigt, von denen 50 % der Empfänger innerhalb der ersten fünf postoperativen Jahre betroffen^{sind 1}. Der fibrotische Umbau der kleinen Atemwege und des Lungenparenchyms ist das histologische Kennzeichen, das dem fortschreitenden Verlust der Lungenfunktion bei chronischer Abstoßung von Lungentransplantaten zugrunde liegt². Experimentell kann die chronische Abstoßung von Lungenal....