Weniger invasive Technik für nicht-stabilisierte Unterkieferfraktur in Mausmodellen

Zusammenfassung

Dieses Protokoll stellt eine umfassende und effiziente Methode zur Analyse der Unterkieferknochenreparatur dar. Wir beschreiben eine reproduzierbare Technik für die nicht-stabilisierte Unterkieferfraktur im Mausmodell, die es ermöglicht, den Prozess der endochondralen Knochenreparatur mit minimaler Gewebeschädigung und Knochenverlust zu analysieren.

Zusammenfassung

Bei Mäusen können nicht-stabilisierte Frakturen an Unterkieferstellen vorgenommen werden, so dass die Knochenreparatur mit Hilfe eines endochondralen Ossifikationsmodus analysiert werden kann. Um diesen Prozess in vivo so genau wie möglich abzubilden, ist ein standardisiertes Protokoll erforderlich, um übermäßigen Knochenverlust und Weichteilschäden zu vermeiden, insbesondere an der Unterkieferstelle, einer anatomischen Stelle, die durch minimalen Zugang gekennzeichnet ist. Unseres Wissens beschreiben wir zum ersten Mal ein weniger invasives Protokoll der nicht-stabilisierten Unterkieferfraktur bei Mäusen. Erwachsene Mäuse werden mit Isofluran anästhesiert und erhalten eine präoperative Dosis von Buprenorphin durch subkutane Injektion. Es wird ein submandibulärer Zugang durchgeführt, bei dem ein Hautschnitt entlang des unteren Randes des Unterkiefers vorgenommen wird. Der Kaumuskel ist in einer subperiostalen Ebene entlang des Ramus mandibularis mit einem Periostlift angehoben. Eine vertikale und vollständige Fraktur des Ramus wird von der basilären Grenze bis zur koronoiden Kerbe (zwischen Kondylen- und Coronoidfortsätzen) unter Verwendung eines piezoelektrischen Knochenchirurgiegeräts unter Kochsalzlösung, Serumspülung am Basilarand und einer Schere durchgeführt, um die Fraktur des Unterkieferastes zu vervollständigen. Der Hautzugang wird durch Seidennähte verschlossen. Dieses detaillierte Verfahren für nicht stabilisierte Unterkieferfrakturen bietet ein effizientes Verfahren, das einen minimalen Knochenverlust und eine Schädigung des Weichgewebes ermöglicht. Diese Technik gewährleistet erfolgreiche und konsistente Ergebnisse, um den Prozess der endochondralen Knochenreparatur in Mausmodellen genau widerzuspiegeln.

Einleitung

Die Knochenreparatur impliziert sowohl membranöse als auch endochondrale Ossifikationsprozesse, abhängig von der Fraktur oder der Osteotomie-Stabilisierung. Die Knochenreparatur nach stabilisierten Knochenosteotomien oder Frakturen beruht auf einer membranösen Ossifikation, während sich nicht stabilisierte Frakturen oder schlecht stabilisierte Osteotomien nach einem Modus der endochondralen Ossifikation^{verfestigen 1}. Die membranöse Knochenreparatur ist gekennzeichnet durch die Knochenbildung durch direkte Differenzierung von mesenchymalen Zellen in Osteoblasten, während die endochondrale Knochenreparatur die Bildung einer transienten knorpeligen Matrize beinhaltet, die sich in Osteoblasten differenziert, um den Knochenkallus² zu bilden.

Die Knochenreparatur hängt von mehreren Gewebe- und Zellinteraktionen ab. Sie wird auch von ortsspezifischen Faktoren und von der auf den Kallus³ ausgeübten Kraft beeinflusst. Der Unterkieferknochen ist ein beweglicher Knochen, der Kaukräfte unterstützt, die hauptsächlich aus kortikalem Knochen bestehen. Der Prozess der Reparatur des Unterkieferknochens wird von der Stelle und der Richtung der Fraktur beeinflusst. Es ist allgemein bekannt, dass Muskel- und Periostverletzungen die Knochenkonsolidierung sowie einen wichtigen Knochenverlust an der Frakturstelle ^4,5,6 beeinträchtigen können.

Die Analyse der endochondralen Unterkieferknochenreparatur impliziert standardisierte und reproduzierbare Protokolle für wertvolle, unvoreingenommene Vergleiche. In der Literatur berichten nur wenige Autoren über Protokolle für nicht-stabilisierte Unterkieferfrakturen in Mausmodellen ^3,7, und zwar meist mit anteriorer Richtung auf molaren^{Höhe 8}. Durch die Entwicklung dieser Technik wollen wir Muskel- und Periostverletzungen vermeiden und den Knochenverlust an der Frakturstelle begrenzen, um den Prozess der endochondralen Knochenreparatur ohne Störfaktoren bestmöglich zu analysieren. Darüber hinaus bestand der Zweck der Entwicklung einer neuen Technik für Unterkieferfrakturen bei Mäusen darin, postoperative Schmerzen und den Tod von Tieren, die bei solchen Operationen bei Kleintieren häufig auftreten, zu minimieren. Zum ersten Mal beschreiben wir ein weniger invasives Protokoll für nicht-stabilisierte Unterkieferfrakturen auf Ramusebene bei Mäusen. Dieses In-vivo-Protokoll vermeidet übermäßige Muskel- und Periostschäden oder Knochenschwund an der Frakturstelle und trägt dazu bei, das Ausmaß der postoperativen Schmerzen und das Todesrisiko des Tieres zu reduzieren.

Protokoll

Dieses Protokoll folgt den Tierhaltungsrichtlinien des Imagine Institute und wurde von Ethikkommissionen und dem französischen Ministerium validiert (APAFIS 26995).

1. Tiere

1. Bestimmen Sie die Anzahl der Tiere pro Gruppe. Wir empfehlen 12 Tiere pro Gruppe. Bestimmen Sie das Geschlecht und das Alter von Mäusen. Dieses Protokoll ist für 6 Wochen alte C57BL/6J-Mäuse (männlich oder weiblich) angepasst.
2. Geben Sie den Tieren, mindestens 1 Woche vor dem Eingriff, Nahrungsergänzungsmittelgel zur Akklimatisierung.

2. Chirurgischer Eingriff

1. Bereiten Sie das benötigte Material vor. Autoklavieren Sie die Instrumente: Schere, Nadeltreiber, Pinzette, Einsatz und Handstück des piezoelektrischen Knochenchirurgiegeräts und Aufzug. Bereiten Sie sterile Handschuhe, Seidennähte (4/0), Rasierer, Baumwollgaze, 10%ige Povidon-Jod-Lösung, Heiztisch, Isofluran und die Schnauzenmaske für die Isofluran-Inhalation vor.
2. Bereiten Sie Buprenorphin in einer Dosis von 0,1 mg/kg zu, verdünnt in sterilem injizierbarem physiologischem Serum. Verabreichen Sie Buprenorphin durch subkutane Injektion mit einer 25-G-Nadel 30 Minuten vor der Operation.
3. Bereiten Sie die Heizplatte (37 °C) vor, legen Sie eine Schaumstoffstütze darauf und fixieren Sie die Schnauzenmaske mit kleinen Nadeln oder Klebeband.
4. Platzieren Sie die Maus zur Induktion in den Isoflurantank mit Isoflurandiffusion (4%). Testen Sie die Anästhesietiefe, indem Sie eine Zehenklemme durchführen. Bei ausreichender Induktion ist ein Mangel an Pedalreflex zu beobachten.
5. Legen Sie die betäubte Maus auf den Rücken auf die Heizplatte, die mit einem sterilen Feld bedeckt ist, das während des gesamten Eingriffs bei 37 °C gehalten wird. Positionieren Sie die Maske auf der Schnauze, um kontinuierlich Isofluran zu inhalieren (Erhaltungstherapie bei 2,5%). Fixieren Sie die Extremitäten der Maus mit Klebeband.
6. Tragen Sie beidseitig Augengleitmittel auf, um Augentrockenheit zu verhindern, die durch Vollnarkose verursacht wird. Rasieren Sie das Unterkieferhaar, tragen Sie sterile Handschuhe und desinfizieren Sie die Haut mit mehreren Wischbewegungen aus 10%iger Povidon-Jod-Lösung und Alkohol.
7. Führen Sie den submandibulären kutanen Zugang wie unten beschrieben durch.
   1. Führen Sie mit einer Mikroschere einen Hautschnitt vom Unterkieferwinkel bis zum 1/3 posterior - 2/3 anterioren Übergang des horizontalen Astes des Unterkiefers durch.
   2. Präparieren Sie das Unterhautgewebe, um den Kaumuskel freizulegen.
8. Lösen Sie die Ansatzpunkte des Kaumuskels mit Hilfe eines Periostlifts vom unteren Rand des Unterkiefers.
9. Heben Sie den Kaumuskel in einer subperiostalen Ebene entlang des Unterkieferastes mit dem Aufzug an.
10. Anlegen einer kleinen Osteotomie (3 mm Länge) am unteren Rand des Unterkiefers mit dem piezoelektrischen Knochenchirurgiegerät unter Kochsalzlösung im Serum (maximal 10 ml/min) am unteren Rand des Unterkiefers, anterior zum Unterkieferwinkel, im hinteren Teil der Konkavität (Abbildung 1, Abbildung 2).
11. Lokalisieren Sie den hinteren Rand des Unterkiefers und der Coronoidkerbe (mit der Mikroschere oder der Pinzette) und vervollständigen Sie die Fraktur mit einer kleinen geraden Schere, die entlang des Unterkieferastes eingeführt wird, um zusätzliche Kaumuskelöffnungen und Verletzungen zu vermeiden. Um die korrekte Ausrichtung der Fraktur zu ermöglichen, platzieren Sie die Schere senkrecht zum unteren Rand des Unterkiefers.
12. Vergewissern Sie sich, dass die Fraktur vollständig ist: Die vollständige Beweglichkeit zwischen den beiden Knochensegmenten sollte während der weichen Mobilisierung der 2 Segmente mit einer Pinzette beobachtet werden.
13. Schließen Sie den Hautzugang mit Seidennähten (4/0) mit getrennten Nähten. Im Periost ist keine Naht erforderlich.
    HINWEIS: Alternativ kann der Hautzugang mit anderen nicht adsorbierbaren Nähten (z. B. Polypropylen-Nähten) vernäht werden.
14. Führen Sie kopfseitige Röntgenaufnahmen durch, um die Richtung der Fraktur zu bestätigen (Abbildung 3).
    1. Setzen Sie die Maus wieder in den Isofluran-Tank für eine kurze Reinduktion, bevor Sie die Röntgenaufnahmen durchführen. Platzieren Sie dann die Maus in der Verlängerung auf der lateralen Seite, wobei sich der Kopf für die Röntgenanalyse leicht in der Überstreckung befindet.
    2. Im Falle einer Fraktur, die zu anterior auf Höhe eines Unterkiefermolaren platziert wurde, oder wenn die Fraktur den Unterkieferwinkel ablöst (Abbildung 4), ist eine abnormale Zunahme des Volumens des Knochenkallus zu beobachten. Schließen Sie in diesen Fällen die Tiere aus der Studie aus, um Verzerrungen bei der Analyse zu vermeiden.
15. Überprüfen Sie die Mäuse, bis sie wieder zu Bewusstsein kommen, bevor Sie sie wieder in den Käfig setzen.

3. Nachsorge

1. Bereiten Sie einen Mäusekäfig ohne Kroketten und harte Anreicherung vor, um Kaukräfte zu vermeiden.
2. Isolieren Sie die operierte Maus in der 1^. Woche in einem einzigen Käfig, bis die Haut vollständig verheilt ist. 1 Woche nach der Operation operierte die Gruppe weibliche Mäuse zusammen im selben Käfig.
3. Verabreichen Sie Buprenorphin (0,1 mg/kg) durch subkutane Injektionen nach 4 Stunden, 24 Stunden, 48 Stunden und 72 Stunden nach dem Eingriff.
4. Füttern Sie Mäuse während aller postoperativen Perioden von Tag 0 bis zum Ende der Konsolidierungsperiode (d. h. 28 Tage) mit weichem Diätgel, um Schmerzen und sekundäre Verschiebungen der Fraktur zu vermeiden.
5. Wiegen Sie die Mäuse täglich von Tag 0 bis Tag 4 nach der Fraktur, morgens vor der Buprenorphin-Injektion und dann 3x pro Woche bis zur Tiertötung (14 Tage nach der Fraktur).
6. Bewerten Sie das postoperative Wohlbefinden der Tiere, um die postoperative Tierpflege zu optimieren. Verwenden Sie die Score-Skala in Tabelle 1 , um den postoperativen Zustand des Tieres zu bewerten und die Nachbeobachtung anzupassen. Wenn der Score > 1 beträgt, wird Buprenorphin injiziert, und wenn der Score > 3 beträgt und/oder bei einem Gewichtsverlust von > 20% des präoperativen Gewichts trotz Nahrungsanreicherung muss über Euthanasie gesprochen werden (Tabelle 1).

Ergebnisse

Was die chirurgischen Eingriffe in vivo betrifft, so ist für die optimale Durchführung dieses Verfahrens der nicht-stabilisierten Unterkieferfraktur im Mausmodell spezifisches Lernen und Training erforderlich.

Diese Technik für nicht stabilisierte Unterkieferfrakturen ermöglicht die Untersuchung des endochondralen Knochenreparaturprozesses. Nach der Euthanasie wurden Unterkieferproben in 4% Paraformaldehyd entnommen (24 h). Nach vollständiger Entkalkung mit EDTA pH 8 wurden die Schnitte in Paraffin eingebettet. Es wurden sagittale Serienschnitte durchgeführt, die in einer Entparaffinisierungslösung deparaffiniert und dann vor der Färbung mit Sirus Red/Alcian Blue unter Verwendung von Standardprotokollen rehydriert wurden. Die histologischen Bilder bestätigten die Bildung eines weichen Kallus mit einer knorpeligen Schablone (Abbildung 5). Die Knochenheilung ist 4 Wochen nach der Fraktur abgeschlossen, wie Mikro-CT-Analysen zeigen. Wir empfehlen, den Knochenreparaturprozess zu verschiedenen Schlüsselpunkten vom Beginn der Kallusbildung (z. B. alle 7 Tage (Tag 7, 14, 21) oder öfter, je nach Ziel der Studie) bis zum Ende der Knochenheilung (d. h. Tag 28) mit histomorphologischen und mikro-CT-morphometrischen Analysen zu untersuchen.

Basierend auf einer retrospektiven Analyse dieses Verfahrens, die an 58 Wildtyp-Mäusen (C57BL/6J-Hintergrund) durchgeführt wurde, liegt die Erfolgsrate des Protokolls bei 86,3 % und die Ausschlussrate bei 13,7 %. Der Ausschluss erfolgte aufgrund des vorzeitigen spontanen Todes in der frühen postoperativen Phase (3%), der Entscheidung über die Euthanasie bei Mäusen mit einem kritischen Score (1%; Score > 3 und/oder bei Gewichtsverlust > 20%) oder im Falle einer abnormalen Position der Osteotomie mit abnormaler Spaltung des Unterkieferwinkels (5%) oder wenn die Fraktur auf molaren Höhe (n=1/58) lag. Im letzteren Fall wurde eine Infektion mit einer abnormalen Spaltung der Fraktur auf molaren Höhe (n= 1/58; Tabelle 2).

Abbildung 1: Bild des submandibulären kutanen Zugangs des aufsteigenden Unterkieferastes. Der untere Rand des Unterkiefers wird mit einem Piezotom-Einsatz gebrochen, was einen minimalen Knochenverlust ermöglicht (Pfeil). Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 2: Färbung des Maus-Unterkiefers. Seitenansicht eines 6 Wochen alten Wildtyp-Maus-Unterkiefers (gefärbt mit Alizarinrot / Alzianblau-Färbung): 1. Kondylus, 2. Coronoid-Prozess, 3. Coronoid-Kerbe, 4. Processus angle, 5. Hinterer Rand des Ramus, 6. Basilarer (oder unterer) Rand des Unterkiefers. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 3: Röntgenaufnahme des Schädels der Maus. Laterale Röntgenaufnahmen des Schädels einer 6 Wochen alten Wildtyp-Maus (sagittale Ansicht), die das Aussehen des Unterkiefers einer nicht frakturierten Maus (links) und das Aussehen des Unterkiefers einer frakturierten Maus und die Richtung der nicht stabilisierten Unterkieferfraktur (Pfeile) zeigen, von der unteren Grenze bis zur Coronoidkerbe, die anterior zum Kondylus platziert ist (rechts). Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 4. Röntgenaufnahme des Schädels der Maus unter suboptimalen Bedingungen. Laterale Röntgenaufnahmen des Schädels einer 6 Wochen alten Wildtyp-Maus (sagittale Ansicht), die eine abnormale Fraktur des Unterkieferwinkels zeigen (Pfeile). Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 5: Repräsentative Ergebnisse. Ergebnisse am Tag 14 nach der Fraktur bei einer Wildtyp-Maus (C57BL/6J). Repräsentative 3D-Koronaansichten eines rekonstruierten μCT-Scans der Unterkieferfrakturstelle, die den Knochenkallus zeigt (weiße Pfeile). Repräsentative Bilder des Kallusknorpels (Sirus Red/Alcian Blue Färbung), die das Vorhandensein eines endochondralen Knochenreparaturprozesses bestätigen. Abkürzungen: B = Knochen, C = Knorpel. Maßstab: 200 μm. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

	0	1	2
Tierischer Aspekt	Normal	Reduzierung der Toilette	Zerzauste Haare, nach hinten gebogener Rücken
Benehmen	Normal	Hypomobilität	Hypomobilität, Verringerung der Nahrungsaufnahme, Gewichtsverlust > 10 %
Klinische Symptome	Normal	Entzündung der Narbe	Geöffnete Narbe, Infektion

Tabelle 1. Bewertungsskala für postoperatives Wohlbefinden.

	n = 58 Mäuse
Erfolgsquote	86.3 %
Ausschlussquote :	13.7 %
Vorzeitiger spontaner Tod	3%
Kritischer Wert < 3 und/oder Gewichtsverlust > 20 %	1%
Abnorme Frakturspaltung zum Unterkieferwinkel	5%
Abnorme Frakturspaltung auf molarer Höhe	1.7 %

Tabelle 2. Erfolgs- und Ausschlussquoten des Protokolls.

Diskussion

Die Technik ermöglicht die Realisierung von nicht-stabilisierten Unterkieferfrakturen im Mausmodell innerhalb eines minimalen offenen Zugangs in einer kurzen Eingriffszeit (ca. 10 min oder weniger). Dieses Kurzzeitverfahren begrenzt das Risiko der Morbidität und des Todes von Tieren, insbesondere bei Kleintieren wie Mäusen. Um vergleichbare Ergebnisse bei der Analyse des endochondralen Knochenreparaturprozesses zu erhalten, sollte besonders darauf geachtet werden, die Unterkieferfrakturen in der gleichen Richtung ohne abnormale Spaltung des Unterkieferwinkels durchzuführen, da dieser unerwünschte Effekt das Volumen des Knochenkallus abnormal vergrößern und die Konsolidierungsperiode verzögern kann. Dieses Protokoll für Unterkieferfrakturen hat keinen Einfluss auf das Wachstum der Unterkieferschneidezähne nach der Operation. Um die Wirksamkeit dieses Protokolls zu verbessern, raten wir dem Experimentator, zuerst an euthanasierten Tieren ähnlichen Alters zu üben und unmittelbar nach dem Frakturieren des Unterkiefers zu präparieren, um die Frakturrichtung bei Bedarf direkt sichtbar zu machen.

Mesenchymale Vorläuferzellen, die von benachbarten Muskeln in den Kallus wandern, tragen zur Knochenreparatur^{bei 6}. Es wurde gezeigt, dass das Periost und Muskelverletzungen die Knochenkonsolidierung beeinflussen ^5,6. Darüber hinaus führen ausgedehnte Muskelabschnitte zu einem erhöhten Blutungsrisiko und können zu postoperativen Infektionen führen. Die Piezochirurgie hat sich weitgehend auf dem Gebiet der kraniofazialen Knochenchirurgie entwickelt; Es wurde berichtet, dass sie im Vergleich zu herkömmlichen Osteotomien niedrigere Raten von Weichteilverletzungen und postoperativen Schmerzen aufweist ^7,9. Um Verletzungen des Kaumuskels und des Periosts zu minimieren, haben wir die Fraktur am unteren Rand des Unterkiefers mit Hilfe der Piezochirurgie eingeleitet und die Fraktur mit einer Schere auf der oberen Ebene des Ramus abgeschlossen, um einen ausgedehnten Abschnitt des Kaumuskels zu vermeiden. Dies bedeutet, dass die Position des hinteren Randes des Unterkiefers und der koronoiden Kerbe kontrolliert wird, bevor der obere Teil des Ramus mit der Schere gebrochen wird. Wir hatten keine Schwierigkeiten, die Fraktur mit einer kleinen geraden Schere zu vollenden, nachdem wir sie piezochirurgisch am unteren Rand des Unterkiefers eingeleitet hatten. Wir haben dieses Verfahren bei adulten Mäusen mit unterschiedlichem genetischen Hintergrund (C57BL/6J, CD1 (Ergebnisse nicht gezeigt)), mit unterschiedlichen Knochendichten und Unterkiefergrößen (Prognathie, Mikrognathie) erlebt. Wir empfehlen jedoch, nur einmal zu überprüfen, ob die Länge der Schere für das Frakturieren des oberen Ramus geeignet ist, um abnormale Frakturrisse zu vermeiden.

Das Risiko von Blutungen wird bei diesem Verfahren durch diesen minimalen offenen Zugang minimiert. Bei überschießenden Blutungen, die bei der Muskelhochlagerung auftreten können, stoppt eine kurze Kompression des Operationsfeldes mit Gaze die Blutung. Ein potenzielles Risiko einer Infektion an der Operationsstelle kann im Falle einer Molarenzahnfraktur auftreten, wenn die Unterkieferfraktur zu vordern platziert wird. Dieser nachteilige Effekt kann auf postoperativen lateralen Röntgenbildern festgestellt werden. In diesem Fall muss das Tier von der Studie ausgeschlossen werden. Eine postoperative Infektion der Operationsstelle kann auch auf ein Hämatom zurückzuführen sein; Dies kann verhindert werden, indem getrennte Hautnähte durchgeführt werden, die eine spontane Evakuierung ermöglichen, wenn präoperativ abnormale Blutungen auftreten. Eine Vollnarkose mit Isofluran im Vergleich zur intraperitonealen Injektion vermeidet übermäßige Mortalitätsraten, die mit den nachteiligen traumatischen Wirkungen intraperitonealer Injektionen verbunden sind. Nach unserer Erfahrung haben wir keinen Tod von Tieren beobachtet, der in direktem Zusammenhang mit einer Vollnarkose mit Isofluran steht.

Bei Mäusen kann es zu einer postoperativen Verringerung der Nahrungsaufnahme kommen. Bei unzureichender Nahrungsaufnahme oder unzureichender Gewichtszunahme kann dem Gel gesiebtes Krokettenpulver zugesetzt werden. Um die postoperative Nahrungsaufnahme zu verbessern, empfehlen wir, mindestens 1 Woche vor dem Eingriff zur Unterbringung ein Nahrungsergänzungsmittelgel mit Kroketten zu verabreichen. Wir empfehlen, während der Nachsorge (jede Woche, während der Nachsorge) und zum Zeitpunkt der Opferung zusätzliche Röntgenaufnahmen durchzuführen, um eine mögliche Frakturverschiebung zu beurteilen. Bei nicht-pathologischen Zuständen ist die Knochenkonsolidierung 4 Wochen nach der Fraktur abgeschlossen.

Mehrere Autoren haben unterschiedliche Protokolle für nicht-stabilisierte Frakturen des Unterkiefers bei Mäusen beschrieben ^3,10,11. Die Instrumente, die für die Durchführung der Osteotomie verwendet werden, können unterschiedlich sein, nämlich Bohrer, chirurgische Pinzetten usw. Der Einsatz von Bohrern kann jedoch zu einem größeren Knochenverlust und Weichteilverletzungen führen. Nach unserem Kenntnisstand ist dieses Verfahren der unstabilisierten Unterkieferfrakturen das erste, bei dem Piezochirurgie und Schere zur Vervollständigung der Osteotomie kombiniert werden. Diese Technik hat den Vorteil, dass das Weichgewebe erhalten bleibt und gleichzeitig eine präzise Osteotomie mit minimalem Knochenverlust möglich ist.

Wie bei allen Techniken gibt es auch bei dieser Methode einige Einschränkungen. Wir zogen es vor, die Fraktur mit einer Schere durchzuführen, nachdem wir sie mit einem piezoelektrischen Operationseinsatz eingeleitet hatten, um einen ausgedehnten Kaumuskelabschnitt und eine Periostverletzung zu vermeiden, die eine mögliche Konsolidierungsverzögerung und/oder Bildung einer Pseudarthrose verschlimmern könnte. Diese Technik impliziert jedoch, dass die Position der koronoiden Kerbe ohne vollständige Visualisierung des Unterkieferastes kontrolliert wird, um die Fraktur in der gleichen Richtung durchzuführen. Es wird also eine Lernkurve erwartet, abhängig von der chirurgischen Erfahrung. Darüber hinaus kann die Richtung der Unterkieferfraktur auf Röntgenbildern je nach Röntgengerät schwer zu visualisieren sein. Wir verwendeten keine in vivo Mikro-CT, um die Frakturrichtung zu bestätigen, da dies die Genesung der Maus aufgrund der verlängerten Dauer der Vollnarkose beeinträchtigen könnte.

Die Untersuchung des endochondralen Knochenreparaturprozesses impliziert die Realisierung von nicht stabilisierten Frakturen, was ein besseres Verständnis des Knochenreparaturprozesses ermöglicht. Dieser Schritt ist notwendig, wenn wir präklinische Studien in Mausmodellen mit Knochenreparaturdefekten in Betracht ziehen wollen, mit dem Ziel, neue klinische Anwendungen für die Behandlung von defekter Knochenreparatur und Pseudarthrose bei Patienten im Rahmen genetischer Erkrankungen oder bei posttraumatischen oder posttumoralen Folgeerkrankungen zu entwickeln.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Buprenorphin : Buprecare 0,3 mg/kg	Animalcare
Elevator OBWEGESER Breite 6mm Länge 17,5cm	Collin Medical	HA 5905
Pinzette : Padplatte MORIA 11 cm N° 5	MORIA	9906
Heiztisch Bioseblab 55 cm x 33 cm	Bioseblab	707
Nadelhalter : Micro Halsey Nadelhalter - Metall	LABODERM	21.100
Neo Klarlack	Merck Millipore, Darmstadt, Deutschland	109843
Ocry Gel Tube 10 g (Gleitmittel für die Augen)	tvm lab	3.70045E+12
Piezotom 2 ASS FINAL	ACTEON	X57402
Piezotom-Einsatz Piezocision PZ3	ACTEON	F87574
Schere Mikro	MORIA	MC52
Seidennähte PERMA HAND SEIDE  / MERSILK	ETHICON	REF 18501G
Gerade Schere	MORIA	4877A
Vetfluran (Isofluran) 250 ml	VIRBAC	VET066 (Centravet)