Method Article

Entwicklung und Validierung einer Methodik zur Etablierung von adipösen Rattenmodellen mit typischer Fettbauchspeicheldrüse

DOI:

10.3791/69553

⸱

November 11th, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Key Laboratory of Acupuncture and Medicine Research of Ministry of Education, Nanjing University of Chinese Medicine, 2Department of Acupuncture and Moxibustion, Yangzhou TCM Hospital Affiliated to Nanjing University of Chinese Medicine, 3Department of Specialty Medicine, Ohio University, 4Research Department, Swiss University of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Diese Studie bietet eine reproduzierbare und standardisierte Methode, um adipöse Rattenmodelle zu etablieren, die eine einfache Adipositas aufweisen, die häufig durch eine fettige Bauchspeicheldrüse gekennzeichnet ist. Es enthält auch detaillierte Protokolle für die Probenahme von Pankreasgewebe und die Immunhistochemie.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fettleibigkeit hat sich zu einer vorherrschenden globalen Gesundheitsepidemie entwickelt, wobei fast die Hälfte der Weltbevölkerung heute als übergewichtig oder fettleibig eingestuft wird. Ein wichtiges pathologisches Merkmal bei adipösen Personen ist die ektopische Lipidablagerung in nicht-fettigem Gewebe, einschließlich der Bauchspeicheldrüse - eine Erkrankung, die als Pankreassteatose oder Fettbauchspeicheldrüse bezeichnet wird. In Nagetiermodellen, die durch eine fettreiche Diät (HFD) induziert werden, geht die Pankreassteatose durchweg der Lebersteatose voraus, was die besondere Anfälligkeit der Bauchspeicheldrüse für eine Lipidakkumulation unterstreicht. Diese frühe Beteiligung positioniert die Bauchspeicheldrüse als kritisches Organ für das Verständnis der metabolischen Dysregulation bei Adipositas. Obwohl ernährungsinduzierte adipöse Ratten (DIO) Kernaspekte des menschlichen Krankheitsverlaufs rekapitulieren, sind gut charakterisierte Tiermodelle, die diesen Pankreas-Phänotyp zuverlässig aufweisen, in der Literatur rar.

Eine wichtige methodische Überlegung bei der Modellierung von Adipositas beim Menschen ist der Zeitpunkt der HFD-Einschleppung. Viele bestehende Modelle initiieren HFD während der Entwöhnungsphase, was zu verwirrenden entwicklungsbedingten metabolischen Programmierungseffekten führen kann, die die Fettleibigkeit beim Menschen, die sich hauptsächlich nach der Entwicklung entwickelt, nicht vollständig widerspiegeln. Im Gegensatz dazu etabliert die vorliegende Studie ein standardisiertes Protokoll, in dem HFD nach dem Absetzen eingeführt wird. Dieser Ansatz ahmt den üblichen menschlichen Verlauf des Auftretens von Fettleibigkeit im Erwachsenenalter genauer nach, vermeidet metabolische Anpassungen im frühen Leben und führt zu einem physiologisch relevanteren Fortschreiten zur Pankreassteatose.

Diese Forschung bietet einen detaillierten und reproduzierbaren Rahmen für die Generierung eines Rattenmodells für Adipositas, das durch eine ausgeprägte Fettbauchspeicheldrüsenpathologie gekennzeichnet ist. Die Methodik umfasst eine 1-wöchige Akklimatisierungsphase, eine 14-wöchige HFD-Induktionsphase ab der Entwöhnung und eine systematische Gewebeentnahme. Es werden zwei Gewebeverarbeitungswege beschrieben: das Snap-Freezing für molekulare Analysen (z.B. Western Blotting) und die Paraformaldehyd-Perfusionsfixierung für morphologische Bewertungen (z.B. IHC, H&E). Dieses Modell bietet eine robuste Plattform für mechanistische Untersuchungen der Adipositas-assoziierten metabolischen Dysfunktion der Bauchspeicheldrüse.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Einfache Adipositas ist definiert als Adipositas, die unabhängig ohne andere Komorbiditäten existiert und in erster Linie auf ein Energieungleichgewicht zurückzuführen ist, das auf einen ungesunden Lebensstil zurückzuführen ist, wie z. B. falsche Ernährungsmuster und unzureichende körperliche Aktivität1. Adipositas trägt erheblich zur steigenden Inzidenz nichtübertragbarer Krankheiten in der jüngeren Bevölkerung bei, die durch hohe Prävalenzraten, frühes Auftreten und Multisystemkomplikationen gekennzeichnet ist, was sie zu einer kritischen globalen Herausforderung für die öffentliche Gesundheit macht

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Das Tierbehandlungsverfahren wurde von der Tierethikkommission der Universität für Traditionelle Chinesische Medizin Nanjing (202006A016) genehmigt und entsprach den ARRIVE-Richtlinien (Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments), den ethischen Richtlinien, den Leitlinien für die Durchführung des Animals (Scientific Procedures) Act 1986 und den zugehörigen Richtlinien, der EU-Richtlinie 2010/63 zum Schutz von Tieren, die für wissenschaftliche Zwecke verwendet werden. Alle Versuchstiere wurden vor der Sektion in Übereinstimmung mit zugelassenen Nagetieranästhesieverfahren anästhesiert. Das Verfahren gliederte sich in drei versch....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wir beschreiben ein reproduzierbares Protokoll zur Etablierung eines einfachen Adipositasmodells, das zuverlässig eine fettige Bauchspeicheldrüse aufweist (Abbildung 1). Der gesamte Prozess, von der Tierfütterung über die Gewebeentnahme bis hin zur anschließenden molekularen Validierung, ist in Abbildung 1 schematisch zusammengefasst. Die wöchentlichen Gewichtsveränderungen der Modellgruppe (n = 5) und der Kontrollgruppe (n = 5).......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Als Haupttreiber des metabolischen Syndroms stellt unkomplizierte Adipositas die erste Manifestation einer Dysregulation des systemischen Fettstoffwechsels dar. Ohne Intervention kann es zu T2DM und schweren diabetischen Komplikationen kommen, was die Notwendigkeit einer frühzeitigen metabolischen Korrektur unterstreicht30. Die Pankreassteatose (fettige Bauchspeicheldrüse), ein früher Marker für ektopische Lipidablagerungen bei Fettleibigkeit, definiert die Bauchs.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Diese Arbeit wurde unterstützt durch das Projekt der Erben und Dozenten für die akademische Erfahrung des Erbes der siebten Gruppe von national renommierten Experten für traditionelle chinesische Medizin; Die National Natural Science Foundation of China, Young Scientists Fund Project [Fördernummer 82305376]; Projekt zur Unterstützung junger Talente in Wissenschaft und Technologie in der Provinz Jiangsu im Jahr 2024 [Fördernummer JSTJ-2024-380].

Die Flussdiagramme wurden mit FigDraw, Biorender, erstellt.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Material
1,5 mL MikrozentrifugenröhreBiosharp Bioengineering Co. LtdBS-15-MWB
2 ml GefrierröhrchenLABSELECTCV-002-200-EXWB
2 ml MahlröhrchenWuhan Servicebio Technology Co., LtdHT-200-MWB
3 % H2O2Booster Electronics Technology Co., Ltd.20A23CIHC
4 % ParaformaldehydBiosharp Bioengineering Co. LtdBL539APerfusions-Pankreas-Dissektionsoperation
5%-BSA-LösungBiofroxx4240GR100IHC
50 mL Zentrifugenrohr Biosharp Bioengineering Co. LtdBS-500-MGewebekonservierung
AccuWest ECL Plus, Raegent ANanjing Gene Easy Biotechnology Co., Ltd.Q201220WB
AccuWest ECL Plus, Raegent BNanjing Gene Easy Biotechnology Co., Ltd.Q201220WB
Wasserfreies EthanolShanghai SCR-Biotech Co., Ltd.10009257IHC
Anti-Kaninchen-IgG, HRP-gebundener AntikörperCell Signaling Technology.Inc.7074WB
cOmplete Protease-Inhibitor-CocktailHoffmann-La Roche Ltd 82256300WB
CoverslipCITOTEST LABWARE MANUFACTURING Co., LTD10212450CIHC
DAB-chromogene LösungBooster Electronics Technology Co., Ltd.AR2017-1IHC
PinzetteShenzhen RWD Life Science Co., Ltd.SP0007-MSektion der SD-Ratte
Glas-Objektträger CITOTEST LABWARE MANUFACTURING Co., LTD188105IHC
Glasglas-Buntglas-GlasShanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.FG010IHC
HämatoxylinShanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.ST2067-20gIHC
Fettreiche DiätSuzhou Shuangshi Laboratory Animal Feed Technology Co., Ltd.Tabelle1Nahrung mit Versuchstieren
SalzsäurealkoholShanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.C0163MIHC
IsofluranShenzhen RWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10Betäubte Ratten
methanol Biofroxx67-56-1WB
MOPS läuft Buffer Liquid 20×Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd. C36842504WB
Neutraler BalsamPeking Solarbio Science & Technology Co., Ltd.G8590IHC
Neutrales HarzShanghai SCR-Biotech Co., Ltd.G8590IHC
PBS-LösungJiangsu Keygen Biotech Corp., Ltd.KGL2206-500Gewebekonservierung
Pierce BCA Protein-Assay Kit Thermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USA.ZB382867
Pierce BCA Protein-Assay Kit hermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USAZB382867WB
Protease-Inhibitor-CocktailHoffmann-La Roche Ltd 82256300
PVDF-Membran (Immobilon-P-Transfermembran, Millipore, 0000380346) Merck Millipore0000380346WB
RIPA-LysepufferBiosharp Bioengineering Co. LtdBL504A, 70096436WB
SABCBooster Electronics Technology Co., Ltd.20C03AIHC
KochsalzlösungSHANXI SHENGAO ANIMAL PHARMACEUTICAL CO., LTD. 270071460Gewebekonservierung
SD männliche RatsJiangsu GemPharmatech Co., Ltd. D000017Ratten
NatriumcitratMerck Life ScienceS1804IHC
Standard-WartungsfeedSuzhou Shuangshi Laboratory Animal Feed Technology Co., Ltd.Tabelle2Nahrung mit Versuchstieren
der Restkonzentrat eBlot L2 5&x;Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd. C97212410 WB
das Transferkonzentrat eBlot L2 5&x;Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd. C97211504WB
Tris gepufferte Kochsalzlösung, Pulver & NBSP;Biosharp Bioengineering Co. LtdBL602AWB
Tween 20BiofroxxEZ681A3EA8WB
UrethanSigma-Aldrich Co., Ltd.U2500-100GBetäubte Ratten
Vinculin Polyklonaler AntikörperProteintech Group, Inc.26520-1-APWB
XylenNanjing Reagenz-GesellschaftC0430530223IHC
Young PAGE, Bis-Tirs, 10& Mal; 8Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd. C33152505WB
Ausrüstung
AnästhesiemaschineShenzhen RWD Life Science Co., Ltd.Modell R5805Betäubte Ratten
Kugelmühle;Retsch Technology GmbH – MicrotracMM400WB
ZentrifugenEppendorf SE5418RWB
computergestützter biologischer GewebetrocknerZhejiang Jinhua Kedi Instrument Co.SC2013-G-KITIHC
verbesserte Chemilumineszenz-(ECL)-Reagenzien  VILBER BIO-BILDGEBUNG00170961WB
Microtome Thermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USA.HM325IHC
MikrowelleShanghai Boxun Industry Co., Ltd. 97000IHC
Mini-PROTEAN Tetra SystemBio-Rad Laboratories, Inc.1658004WB
OfenShanghai Jinghong Scientific Co., Ltd.DNP-9082IHC
Reines WasserSichuan UPT Ultra-Pure Technology Co., Ltd.ULUP-TEZIHC

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wang, G., et al. Comparative effectiveness of massage combined with lifestyle intervention and lifestyle intervention alone for simple obesity: a systematic review and meta-analysis. Medicine. 104 (2), e41074(2025).
  2. World Obesity Federation. World Obes....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Obese Rat ModelsFatty PancreasPancreatic SteatosisHigh Fat DietDiet Induced ObesityLipid DepositionTissue HarvestingWestern BlottingParaformaldehyde FixationMetabolic Dysfunction

Related Articles