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Methodenartikel

Dot-Blot-Assay zur Erkennung globaler N6-Methyladenosin-RNA-Modifikationsniveaus

553 Ansichten

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DOI:

10.3791/69860

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6. Februar 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 2Key Laboratory of Theory and Therapy of Muscles and Bones, Ministry of Education

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um globale m⁶A-Niveaus halb-quantitativ mittels Dot-Blot zu bewerten. Total RNA wird extrahiert, denaturiert, auf einer Nylonmembran gespottet, mit Anti-m⁶A-Antikörper untersucht und durch Chemilumineszenz visualisiert. Die Signalintensität, quantifiziert durch die ImageJ-Graustufenanalyse, spiegelt die relative Methylierungshäufigkeit wider und bietet so einen reproduzierbaren Forschungsfluss.

Zusammenfassung

N6-Methyladenosin (m⁶A) ist die am häufigsten verbreitete interne Modifikation in eukaryotischer Boten-RNA (mRNA) und dient als wichtiger Regulator der posttranskriptionellen Genexpression. Methoden zur Untersuchung von m⁶A können auf mehreren Auflösungsstufen angewendet werden, einschließlich globaler Quantifizierung, nukleotidspezifischer Detektion und Analyse bestimmter interessierender Transkripte. Dazu gehört der Dot-Blot-Assay zu einem einfachen, schnellen und kosteneffizienten Ansatz zur halbquantitativen Bewertung globaler m⁶A-Modifikationsniveaus. In diesem Test werden die Zellen zunächst verarbeitet, um die gesamte RNA zu extrahieren, die dann verdünnt und denaturiert wird. Die RNA-Proben werden auf einer Nylonmembran platziert, mit einem Anti-m⁶A-Antikörper untersucht und durch Chemilumineszenz visualisiert, wobei die Signalintensität die relative Menge der Methylierung anzeigt. Schließlich werden die Quantifizierung und der Vergleich der Signalintensitäten durchgeführt, indem Graustufenwerte mit ImageJ gemessen werden. Im Vergleich zu Sequenzierungs- oder massespektrometriebasierten Methoden erfordert Dotblot nur minimale Instrumentierung und technisches Fachwissen, was es besonders für routinemäßige Screening, vorläufige funktionelle Studien und vergleichende Analysen geeignet macht. Dieses Protokoll bietet einen detaillierten und reproduzierbaren Workflow zur Implementierung des m⁶A-Punkt-Blot-Assays sowohl in der Grundlagenforschung als auch in translationalen Anwendungen.

Einleitung

N6-Methyladenosin (m⁶A) ist die am weitesten verbreitete interne Modifikation in eukaryotischer Boten-RNA (mRNA) und spielt eine wesentliche Rolle bei der posttranskriptionellen Regulation, einschließlich RNA-Stabilität, Spleißen, Abbau, Translation und Export 1,2,3. Die Dysregulation der m⁶A-Modifikation wurde mit verschiedenen physiologischen und pathologischen Prozessen in Verbindung gebracht, einschließlich Tumorinitiierung, -progression und Metastasen 4,5. Beim Osteosarkom wurden erhöhte m⁶A-Werte sowohl in Zelllinien als auch in Geweben beobachtet, was auf eine Rolle abweichender RNA-Methylierung in der Krankheitsbiologiehindeutet 6,7. Daher ist die systematische Bewertung der globalen m⁶A-Häufigkeit zusammen mit ihren Veränderungen in osteosarkomassoziierten Transkripten und regulatorischen Wegen unerlässlich, um die biologischen Mechanismen und klinischen Implikationen der RNA-Methylierung im Osteosarkom zu klären.

Es stehen mehrere analytische Methoden zur Verfügung, um m⁶A-Modifikationen 8,9 zu untersuchen. Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie/Massenspektrometrie (LC-MS/MS)10 und enzymgekoppelte Immunsorbent-Assay (ELISA)-basierte Assays11 werden beide verwendet, um globale m⁶A-Werte zu messen. Ersteres bietet eine hohe Empfindlichkeit, erfordert jedoch spezialisierte Ausrüstung und Fachwissen, während letzteres relative m6A-Werte liefert und zu höheren Kosten als der Dot-Blot-Test beiträgt. MeRIP-qPCR ermöglicht eine gezielte Bewertung spezifischer Transkripte, wird jedoch stark von der Immunpräzipitationseffizienzbeeinflusst 12. MeRIP-seq13, m⁶A-seq14 und m⁶A-SAC-seq15 sind sequenzierungsbasierte Ansätze, die m⁶A-Methylierungsstellen präzise kartieren können; Sie sind jedoch teuer und erfordern umfangreiche bioinformatische Analysen.

Der m⁶A-Dot-Blot-Assay bietet eine einfache, schnelle und kostengünstige Methode zur Bestimmung globaler m⁶A-Modifikationsniveaus in RNA. Als semi-quantitative Immunoassay liegt sein Hauptvorteil darin, ein Gesamtbild der m⁶A-Häufigkeit zu erzeugen, ohne dass spezielle Geräte oder komplexe bioinformatische Analysen erforderlich sind. Dies macht den m⁶A-Dot-Blot-Assay zu einem wertvollen Werkzeug für routinemäßige Screening, vorläufige funktionelle Validierung und klinische Forschung sowie zu einer praktischen Ergänzung zu fortschrittlichen Sequenzierungs- und Massenspektrometrie-basierten Ansätzen. Das vorliegende Protokoll bietet einen detaillierten Schritt-für-Schritt-Workflow, der reproduzierbare Erkennung und breite Anwendbarkeit gewährleistet.

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Protokoll

HINWEIS: Das Protokoll ist in drei Abschnitte gegliedert: RNA-Präparation, Dot-Blot-Test und Quantifizierung. Die Materialtabelle fasst die benötigten Materialien zusammen, ergänzende Tabelle 1 beschreibt die Reagenzienformulierungen und Abbildung 1 veranschaulicht den experimentellen Arbeitsablauf.

1. RNA-Präparation

  1. Zellpräparation
    1. Entfernen Sie 143B-Zellen mit stabilem SNHG21-Knockdown (shSNHG21), negativen Kontrollzellen (shCtrl) und Zellen, die mit 3-Deazaadenosin (3-DAA) behandelt wurden; [100 μM, 24 H]) und Meclofenamsäure (MA; [100 μM, 24 H]) aus dem 37 °C Inkubator.
    2. Überprüfen Sie unter dem Mikroskop, dass die Zellkonfluenz etwa 80-90 % beträgt und die Zellen in gutem Zustand sind.
    3. Entferne das Kulturmedium und spüle die Zellen dann zweimal mit 1 ml PBS.
    4. Entfernen Sie PBS und fügen Sie dann 1 ml Trypsin pro 6 cm Schüssel hinzu.
    5. Schüttle vorsichtig, um das Trypsin gleichmäßig zu verteilen, und brüte 1 Minute lang.
    6. Entferne das Trypsin und gib dann 1 ml Medium mit 10 % FBS hinzu, um die Verdauung zu beenden.
    7. Pipettieren Sie die Zellsuspension mehrmals, um die Zellen zu verteilen.
    8. Übertragen Sie die Zellsuspension in ein 1,5 mL RNase-freies Mikrozentrifugenrohr.
      HINWEIS: Beschriften Sie die Tube vor der Benutzung. Die Schritte 1.1.3 bis 1.1.8 müssen unter sterilen Bedingungen durchgeführt werden.
    9. Zentrifugiere bei 1000 × g für 3 Minuten und entferne dann das Überstandsmittel vollständig.
  2. RNA-Extraktion
    HINWEIS: Die RNA-Extraktion erfolgt mit einem EZ-Press RNA-Reinigungskit.
    1. Fügen Sie dem Pellet 600 μL Lysepuffer (vorhanden im RNA-Reinigungskit) hinzu und wirbeln gründlich vor, um die Zellen vollständig zu lysieren, und lassen Sie es 5 Minuten stehen.
      HINWEIS: Etwa 2 × 106Zellen werden für die RNA-Isolierung verwendet.
    2. Fügen Sie ein gleiches Volumen 100% Ethanol und Vortex gründlich hinzu.
    3. Geben Sie 600 μL des Gemisch auf eine Spin-Säule, die mit einem Sammelrohr zusammengesetzt ist.
      HINWEIS: Setze die Spin-Säule und das Sammelrohr vor der Verwendung zusammen und beschrifte das Rohr vor der Benutzung.
    4. Zentrifugiere bei 12.000 × g für 1 Minute und entsorge die Flüssigkeit im Sammelrohr.
      HINWEIS: Vermeiden Sie Kontakt zwischen dem Säulenboden und der Flüssigkeit oder dem Bediener.
    5. Wiederholen Sie die oben genannten Schritte 1.2.3-1.2.4 für die verbleibende Mischung.
    6. Fügen Sie 500 μL Waschpuffer (vorhanden im RNA-Reinigungskit) zu jeder Spin-Säule hinzu und lassen Sie sie 1 Minute bei Raumtemperatur stehen.
    7. Zentrifugiere bei 12.000 × g für 1 Minute und entsorge die Flüssigkeit im Sammelrohr.
    8. Zentrifugiere die leere Säule erneut bei 12.000 × g für 1 Minute, um die Restflüssigkeit zu entfernen.
    9. Die Spin-Säule auf ein neues 1,5 mL RNase-freies Rohr umlegen, den Deckel öffnen und 2 Minuten an der Luft trocknen.
      HINWEIS: Beschriften Sie die Tube vor der Benutzung.
    10. Fügen Sie 25–50 μL Elutionspuffer (enzymfreies Wasser) in die Mitte der Spin-Säule hinzu.
    11. Inkubiere bei Zimmertemperatur für 2 Minuten.
    12. Zentrifugiere bei 12.000 × g für 1 Minute, um RNA zu elutieren.
    13. Werfen Sie die Spin-Säule weg und legen Sie die RNA auf Eis.
      HINWEIS: Lagere RNA bis zur Anwendung bei -80 °C.
  3. RNA-Verdünnung
    1. Messung der RNA-Konzentration von 143B shSNHG21-Zellen, 143B shCtrl-Zellen sowie Zellen, die mit 3-DAA und MA behandelt wurden, mit einem DS-11-Spektrophotometer.
    2. Bereite 1 μg Gesamt-RNA aus jeder Zelllinie vor.
    3. Serielle Verdünnung der RNA auf 400 ng, 200 ng und 100 ng mit diethylpyrocarbonat (DEPC)-behandeltem Wasser.
      HINWEIS: Passen Sie den Konzentrationsgradienten nach Bedarf an.
  4. RNA-Denaturierung
    1. Hitzeverdünnte RNA-Proben bei 95 °C für 3 Minuten.
    2. Die Proben werden sofort auf Eis zum Abkühlen übertragen.
      HINWEIS: Denaturierte RNA kann bis zu einer Woche bei 4 °C gelagert werden.

2. Punktfleck

  1. RNA-Spotting
    1. Schneiden Sie die positiv geladene Nylonmembran auf die gewünschte Größe.
    2. Zeichne Referenzlinien und beschrifte die Membran mit dem Probennamen.
    3. Mischen Sie die RNA gründlich durch sanftes Wirbeln oder Pipetieren.
    4. Jede RNA-Probe wird 1–2 μL auf die vorgesehenen Positionen auf der Membran eingesetzt.
      HINWEIS: Verwenden Sie jederzeit RNase-freie Pipettenspitzen. Vermeiden Sie direkten Kontakt zwischen der Pipettenspitze und der Membran. Lassen Sie RNA natürlich auf der Membran diffundieren. Verwenden Sie für jede Probe eine neue Pipettenspitze. Überschreiten Sie nicht 2 μL pro Fleck, um eine unregelmäßige Diffusion zu verhindern.
  2. RNA-Vernetzung
    1. Die Membran 3 Minuten an der Luft trocknen.
    2. Führen Sie RNA-Vernetzung durch, indem Sie die Membran in einem UV-Vernetzer bei 254 nm, 120 mJ/cm² bestrahlen.
      HINWEIS: Inkubieren Sie die Membran als alternative Option bei 37 °C für 30 Minuten.
    3. Waschen Sie die Membran mit 10 ml 1x TBST auf einer Schaukelplattform für 5 Minuten, um ungebundene RNA zu entfernen.
  3. Membranblockierung
    1. Bereite eine 5%-BSA-Lösung vor.
      HINWEIS: Bereiten Sie diese Lösung vor der Anwendung frisch vor.
    2. Inkubieren Sie die Membran in der Blocklösung bei Raumtemperatur für 2 Stunden.
  4. Antikörperinkubation
    1. Inkubieren Sie die Membran über Nacht mit einem Anti-m⁶A-Antikörper bei 4 °C.
      HINWEIS: Antikörper 1:1000 in 5% BSA-Lösung vor der Anwendung verdünnen. Inkubieren Sie die Membran auf einer Schaukelplattform mit sanftem Schütteln (50 U/min).
    2. Waschen Sie die Membran dreimal mit 10 ml 1x TBST auf einer Schaukelplattform für 10 Minuten.
    3. Inkubieren Sie die Membran 1 Stunde lang mit Meerrettichperoxidase (HRP)-konjugierten sekundären Antikörpern bei Raumtemperatur.
      HINWEIS: Antikörper 1:1000 in 5% BSA-Lösung vor der Anwendung verdünnen.
    4. Waschen Sie die Membran dreimal mit 10 ml 1x TBST auf einer Schaukelplattform für 10 Minuten.
  5. Chemilumineszenz-Detektion
    1. Trage das chemilumineszente HRP-Substrat gleichmäßig tropfweise auf die Membran auf.
      HINWEIS: Inkubieren Sie die Membran mit Substrat 1 Minute lang bei Zimmertemperatur und sanftem Schaukeln.
    2. Signale mit einem chemilumineszenzbildenden Bildgebungssystem erkennen.
    3. Verwenden Sie eine Autobelichtungsfunktion im chemilumineszenzbildenden Bildgebungssystem als initialen Vorscan.
      HINWEIS: Auto-Time wird nur akzeptiert, wenn das hellste Signal weniger als 65 % gesättigt ist; ansonsten halbieren Sie die Belichtung und erfassen Sie es erneut, bis das Peak-Signal innerhalb von 30-60 % liegt.
  6. Methylenblaue (MB) Färbung
    1. Inkubieren Sie die Membran 1 Minute lang in der MB-Färbelösung.
    2. Waschen Sie die Membran dreimal mit 10 ml 1x TBST auf einer Schaukelplattform für 5 Minuten und bilden Sie es als Ladekontrolle ab.
      HINWEIS: Färben Sie dieselbe Membran, die für Chemilumineszenz verwendet wird. Vermeiden Sie es, das Sediment in der Färbungslösung zu stören. Tragen Sie Schutzkleidung und eine Maske, da MB schwer zu entfernen ist.
    3. Entfärbe die MB-blotted Membran nach der Bildgebung mit einer Lösung mit 1 % SDS auf einer Schaukelplattform für 15 Minuten, um die Dokumentation oder eine mögliche Nachuntersuchung zu erleichtern.

3. Quantifizierung

  1. Messung des Graustufenwerts
    1. Importiere das Bild in die ImageJ-Software.
    2. Konvertiere das Bild in das 8-Bit-Format mit Image > Type > 8-Bit.
    3. Hintergrund mit Prozess abziehen > Hintergrund abziehen.
      HINWEIS: Radius: 50,0 Pixel, siehe Lichthintergrund.
    4. Verwenden Sie das Rechteck-Werkzeug , um den Analysebereich auszuwählen.
    5. Definieren Sie die Spuren nacheinander mit Analyze > Gels > Select First Lane.
    6. Erstellen Sie Intensitätsprofile mit Analyze > Gels > Plot Lanes und messen Sie Peaks.
    7. Messen Sie die Graustufenwerte von m⁶A bzw. MB.
  2. Kopieren Sie die Daten in eine Tabelle zur Analyse.
  3. Signalintensitäten vergleichen, um globale m⁶A-Modifikationsniveaus zu beurteilen.

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Ergebnisse

Um die Leistung des Dot-Blot-Tests rigoros zu validieren und die Rolle von SNHG21 bei der Regulierung der globalenm6-A-Werte zu untersuchen, wurden 143B-Zellen pharmakologischen Störungen ausgesetzt, die entweder die m6-A-Methylierung unterdrücken oder verstärken unddie m6-A-Menge in beide Richtungen überwachten.

Punktblot-Quantifizierung der globalen m6 A-Häufigkeit
Zunächst untersuchten wir die Fähigkeit dieses ...

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Diskussion

In dieser Studie führte das Knockdown von SNHG21 in Osteosarkom-143B-Zellen zu einer verminderten m⁶A-Signalintensität, was den Wert dieses Tests zur Bewertung der Auswirkungen auf RNA-Methylierung demonstriert. Darüber hinaus dient dieser Test als Werkzeug für verschiedene Anwendungen, darunter: 1) Funktionelle Studien und mechanistische Validierung: Dieser Test kann für schnelle vorläufige Screenings verwendet werden, um festzustellen, ob globale m⁶A-Werte mit bestimmten biologischen P...

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Offenlegungen

Die Autoren berichten von keinen Interessenkonflikten.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde durch Fördermittel der National Nature Science Foundation (82174408, 82374477 und 82474535) unterstützt. Abbildung 1 wurde mit BioRender.com erstellt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
3-Deazaadenosine (3-DAA)MCEHY-W013332A1 mg
Anti-m6A Monoklonaler AntikörperProteintech68055-1-Ig50 μ L
Rinderserumalbumin (BSA, Fraktion V)BioFroxx4240GR100 100 g
ChemiDoc MP BildgebungssystemBIO RAD12003154
DMEM Hoher GlukoseWISENT319-005-CL500 mL
DS-11-SpektrophotometerDeNOVIXDS-11
EZ-Press RNA-ReinigungskitEZB B0004DP100 Preps
FBS – Überlegene QualitätWISENT086-150500 mL
HRP-konjugiertes Ziegen-Anti-Maus-IgG (H+L)BeyotimeA02161 mL
Immobilon Westliches chemilumineszentes HRP-Substrat  MilliporeWBKLS05002 & Times; 250 mL
Meclofenamsäure (MA)MCEHY-1172751 mg
Methylenblau-FärbungslösungSolarbioG13000,1 %, 100 mL
Nylon-TransfermembranLABSELECTTM-NY-XS-457.4 & Times; 8,5 cm, 0,45 μ m, 10 PCS/BEUTEL
PBS-Puffer (gebrauchsfertiges Trockenpulver)biosharpBL601ApH-Wert: 7,2–7,4, 2 L/Beutel
Natriumdodecylsulfat (SDS)SigmaL5750-500G500 g
TBS Puffer-Premix-PulverSangon  A510025-00011EA (243,9 g Pulver)
TrypLE-ExpressenzymGibco12604-0211& mal;, 500 mL
Tween-20SangonA600560-0500500 mL
UV-QuervernetzerUVPCL-1000

Referenzen

  1. Wang, X., et al. N6-methyladenosine-dependent regulation of messenger RNA stability. Nature. 505 (7481), 117-120 (2014).
  2. Zhang, Z., Wei, W., Wang, H., Dong, J. N6-methyladenosine-sculpted regulatory landscape of noncoding RNA. Front Oncol. 11 (1), 743990(2021).
  3. Hsu, P. J., et al. The RNA-binding protein FMRP facilitates the nuclear export of N6-methyladenosine-containing mRNAs. J Biol Chem. 294 (52), 19889-19895 (2019).
  4. Chen, X. -Y., Zhang, J., Zhu, J. -S. The role of m6A RNA methylation in human cancer. Mol Cancer. 18 (1), 103(2019).
  5. Li, Y., et al. Molecular characterization and clinical relevance of m6A regulators across 33 cancer types. Mol Cancer. 18 (1), 137(2019).
  6. Hu, Y., Zhao, X. Role of m6A in osteoporosis, arthritis and osteosarcoma (review). Exp Ther Med. 22 (3), 926(2021).
  7. Zhang, Y., et al. N6-methyladenosine (m6A) modification in osteosarcoma: expression, function and interaction with noncoding RNAs-an updated review. Epigenetics. 18 (1), 2260213(2023).
  8. Zhu, W., et al. Detection of N6methyladenosine modification residues (review). Int J Mol Med. 43 (6), 2267-2278 (2019).
  9. Wang, Y., Jia, G. Detection methods of epitranscriptomic mark N6-methyladenosine. Essays Biochem. 64 (6), 967-979 (2020).
  10. Stejskal, S., et al. Global analysis by LC-MS/MS of N6-methyladenosine and inosine in mRNA reveal complex incidence. RNA. 31 (4), 514-528 (2025).
  11. Ensinck, I., et al. m6A-ELISA, a simple method for quantifying N6-methyladenosine from mRNA populations. RNA. 29 (5), 705-712 (2023).
  12. Liu, J., et al. m6A mRNA methylation regulates AKT activity to promote the proliferation and tumorigenicity of endometrial cancer. Nat Cell Biol. 20 (9), 1074-1083 (2018).
  13. Zhang, M., Li, Q., Xie, Y. A Bayesian hierarchical model for analyzing methylated RNA immunoprecipitation sequencing data. Quant Biol (Beijing). 6 (3), 275-286 (2018).
  14. Dominissini, D., et al. Topology of the human and mouse m6A RNA methylomes revealed by m6A-seq. Nature. 485 (7397), 201-206 (2012).
  15. Mishra, T., Phillips, S., Zhao, Y., Wilms, B., He, C., Wu, L. Epitranscriptomic m6A modifications during reactivation of HIV-1 latency in CD4+ T cells. mBio. 15 (11), e0221424(2024).
  16. Li, J., et al. METTL16 promotes lipid metabolic reprogramming and colorectal cancer progression. Int J Biol Sci. 21 (11), 4782-4797 (2025).
  17. Ren, F., Cai, Y., Song, Y. OTUD7B stabilization by METTL14-mediated m6A methylation drives HIF-1α expression in esophageal squamous cell carcinoma. Oncol Res. 33 (8), 2055-2074 (2025).
  18. Chen, Y., et al. WTAP facilitates progression of hepatocellular carcinoma via m6A-HuR-dependent epigenetic silencing of ETS1. Mol Cancer. 18 (1), 127(2019).
  19. Gu, Y., et al. Upregulation of circGDI2 inhibits tumorigenesis by stabilizing the expression of RNA m6A demethylase FTO in oral squamous cell carcinoma. Noncoding RNA Res. 10 (1), 140-152 (2025).
  20. Ura, Y., et al. Quantitative dot blot analyses of blood-group-related antigens in paired normal and malignant human breast tissues. Int J Cancer. 50 (1), 57-63 (1992).
  21. Reed, K. C., Mann, D. A. Rapid transfer of DNA from agarose gels to nylon membranes. Nucleic Acids Res. 13 (20), 7207-7221 (1985).
  22. Herrin, D. L., Schmidt, G. W. Rapid, reversible staining of northern blots prior to hybridization. Biotechniques. 6 (3), 196-200 (1988).
  23. Rio, D. C., Ares, M., Hannon, G. J., Nilsen, T. W. RNA: A Laboratory Manual. , Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor. NY. (2010).
  24. Sambrook, J., Russell, D. W. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. , 3rd ed, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY. (2001).
  25. Helm, M., Motorin, Y. Detecting RNA modifications in the epitranscriptome: Predict and validate. Nat Rev Genet. 18 (5), 275-291 (2017).
  26. Meyer, K. D., Jaffrey, S. R. The dynamic epitranscriptome: N6-methyladenosine and gene expression control. Nat Rev Mol Cell Biol. 15 (5), 313-326 (2014).

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Nachweis von N6 Methyladenosinglobale m6A SpiegelRNA ExtraktionChemilumineszenz ImagingAntik rper SondierungMethylenblau F rbungImageJ Quantifizierungposttranskriptionelle Regulation
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