Algenzählung mittels kultivierbarer Methodik

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Environmental Microbiology
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JoVE Science Education Environmental Microbiology
Algae Enumeration via Culturable Methodology

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09:29 min
April 30, 2023

Overview

Quelle: Labors von Dr. Ian Pfeffer und Dr. Charles Gerba – Arizona University
Demonstrierende Autor: Bradley Schmitz

Algen sind eine sehr heterogene Gruppe von Mikroorganismen, die eine Gemeinsamkeit, nämlich den Besitz der photosynthetische Pigmente haben. In der Umgebung können Algen für Schwimmbad-Besitzer Probleme durch den Anbau von im Wasser. Algen können auch Probleme verursachen, in den Gewässern wie Seen und Stauseen, durch Algenblüten, die Giftstoffe freisetzen. In jüngerer Zeit, werden Algen als neuartige Energiequellen über Algen Biokraftstoffe evaluiert. Blau – grüne Algen sind eigentlich Bakterien als Cyanobakterien eingestuft. Cyanobakterien nicht nur Photosynthese, sondern haben auch die Fähigkeit, Stickstoff aus der Atmosphäre zu beheben. Andere Algen sind eukaryotische, von einzelligen Organismen bis hin zu komplexen mehrzelligen Organismen wie Algen. Dazu gehören die grünen Algen, die Euglenoids der Dinoflagellaten, golden Braunalgen, Kieselalgen, die Braunalgen und die Rotalgen. In Böden, Algen Populationen sind häufig 106 pro Gramm. Diese Zahlen sind niedriger als die entsprechenden Zahlen für Pilze, Bakterien und Actinomyceten vor allem, weil das Sonnenlicht für die Photosynthese benötigt weit unterhalb der Bodenoberfläche nicht durchdringen kann.

Da Algen phototrophe sind, können Energiegewinnung aus Photosynthese und Carbon für Biomasse aus Kohlendioxid, sie im Wachstumsmedium besteht ausschließlich aus anorganischen Nährstoffen und ohne einen organischen Kohlenstoff-Substrat angebaut werden. Der Mangel an organisches Substrat verhindert das Wachstum von heterotrophen Bakterien. Verwenden eine anorganisches Wachstumsmedium, Algen ursprünglich in Erde oder Wasser kann durch die wahrscheinlichste Anzahl (MPN) Methode quantitated. Die MPN Methode beruht auf sukzessive verdünnen einer Probe, so dass die Algen sich zum Aussterben verdünnt werden. Das Vorhandensein von Algen in jeder Verdünnung richtet sich nach ein positiven Zeichen des Wachstums in der Mitte, in der Regel einen grünen Schleim von Algen, der Photosynthese entsteht. Einsatz von replizieren Rohren bei jeder Verdünnung und eine statistische Auswertung der Anzahl der Röhren positiv für Wachstum in einer bestimmten Verdünnung ermöglicht die Anzahl der Algen in der ursprünglichen Probe berechnet werden. MPN-Tabellen wurden entwickelt und veröffentlicht spezifisch für ein bestimmtes MPN-Design, einschließlich der Anzahl der Wiederholungen bei jeder Verdünnung verwendet.

Procedure

  1. Wiegen Sie ein 10 g Probe des Bodens, die entweder gesammelt hat Feuchte aus dem Feld, oder hatte Wasser hinzugefügt, so dass es für 2-3 Tage feucht bleibt. Beachten Sie, dass der Boden feucht, aber nicht gesättigt sein sollte.
  2. Bereiten Sie ein 10-divisibel Verdünnungsreihen durch Zugabe von 10 g des Bodens in 95 mL geändert Bristol-Lösung (Abbildung 1). Um geändert Bristol Lösung zu erstellen, Folgendes in 1.000 mL Wasser auflösen: 0,25 g NaNO3, 0,025 g CaCl2, 0,075 g MgSO4 · 7H2O, 0,075 g K2HPO40,018 g KH2PO4, 0,025 g NaCl und 0,5 mg FeCl3.
  3. Die Verdünnung-Serie durch die Zugabe von 1 mL der Suspension A bis 9 mL Bristol-Lösung und zusätzliche sequentielle Verdünnungen weiter.
  4. Impfen Sie 5 replizieren Rohre jedes mit 9 mL geändert Bristol-Lösung mit 1 mL der Verdünnungen 10-2 bis 10-6 (Tabelle 1).
  5. Inkubieren Sie die verschlossene Rohre für bis zu 4 Wochen in einer Gegend, die dem Sonnenlicht ausgesetzt.
  6. Beobachten Sie die Rohre für Algenwachstum einmal alle 7 Tage. Rohre mit Algenwachstum erscheinen grün.

Figure 1
Abbildung 1. Wie erstelle ich ein 10-divisibel Verdünnungsreihe.

Rohr Verdünnung
B 10-2
C 10-3
D 10-4
E 10-5
F 10-6

Tabelle 1. Röhren und Verdünnungen.

Algen sind photosynthetischen Organismen, die in einer Vielzahl von Umgebungen leben. Im Labor und ihrer Konzentration aufgelistet, durch einfache Berechnungen kann Boden Wohnung Algen kultiviert werden.

Algen sind eine sehr heterogene Gruppe von Organismen, die eine Gemeinsamkeit, nämlich den Besitz der photosynthetische Pigmente, häufig Chlorophyll haben. Die überwiegende Mehrheit der Algen sind mikroskopisch, die genaue Definition der Gruppe ist jedoch umstritten, und umfasst auch Algen, die in der Regel makroskopischen sind.

In der Umgebung können Algen Probleme in den Gewässern wie Seen oder Stauseen, Bildung von Algenblüten, die dem Wasser Nährstoffe, blockieren leicht über der Wasseroberfläche übergeben und Giftstoffe zum Abbau. Die Möglichkeit, Algen in Proben aufzulisten ermöglicht es Wissenschaftlern, die Gesundheit des Ökosystems und das potenzielle Risiko von Algen Überwucherung zu bewerten.

Algen Populationen in Böden treten häufig bei rund 10.000 Zellen pro Gramm. Diese Zahlen sind in der Regel niedriger als entsprechende Konzentrationen von Bakterien, Pilzen oder Actinomyceten, wie benötigen Algen Sonnenlicht für die Photosynthese, die weit unterhalb der Bodenoberfläche nicht durchdringen können.

Dieses Video zeigen wie Sie Algen aus dem Boden im Labor Kultur und wie die Konzentration der Algen in der Ausgangspunkt Bodenprobe aufgelistet.

Algen haben positive Auswirkungen auf die Ökosysteme. Blau – grüne Algen oder Cyanobakterien, haben die Fähigkeit, Stickstoff aus der Atmosphäre, so dass sie nützlich bei der Erhöhung Boden Stickstoff in semi-ariden Umgebung sowie ein mögliches Instrument zur Erzeugung von Biokraftstoffen zu beheben.

Andere Algen sind eukaryotische und reichen von einzelnen-celled, komplexe vielzellige Organismen wie Algen. Dazu gehören Grünalgen, Euglenoids Dinoflagellaten und Kieselalgen, Braunalgen und Rotalgen.

Algen sind phototrophe, Energiegewinnung aus Photosynthese und Carbon für Biomasse aus Kohlendioxid. Infolgedessen können sie in den Medien völlig bestehend aus anorganischen Nährstoffen, ohne einen zusätzlichen organischen Kohlenstoff-Substrat angebaut werden. Dieser Mangel an organisches Substrat verhindert das Wachstum von heterotrophen Bakterien, die auf externen organischen Kohlenstoff für Wachstum angewiesen sind.

Kultur-Algen für die Enumeration, Boden Proben sind seriell verdünnt 10-6 g Boden pro mL, und kultiviert in Wachstumsmedien verzehnfacht. Mehrere Wiederholungen sind für jede Verdünnung gemacht. Sie werden dann in einem gut beleuchteten Raum für bis zu 4 Wochen Algenwachstum inkubiert.

Das Vorhandensein von Algen in jeder Verdünnung richtet sich nach ein positiven Zeichen des Wachstums in der Mitte, die in der Regel als einen grünen Schleim erscheint. Schließlich empirisch entwickelte MPN-Tabellen für Algenwachstum konzipiert werden konsultiert, ermöglicht dem Anwender die ursprüngliche Algen Konzentration basierend auf Wachstum in Verdünnung bestimmt repliziert. Die MPN-Methode stützt sich auf die serielle Verdünnung von Proben so, dass die Algen vom Aussterben bedroht verdünnt sind, was bedeutet, dass bei einigen Verdünnung kein Algenwachstum erfolgt.

Jetzt sind wir vertraut mit den Konzepten wächst und Auflisten von Algen aus Proben, werfen wir einen Blick auf wie dies im Labor durchgeführt wird.

Zu Beginn der Experiment, erste Gewicht, 10 Gramm für feuchten Boden, der entweder aus dem Bereich feucht gesammelt worden oder wurde rehydriert und blieb für 2 bis 3 Tage feucht. Der Boden sollte aber nicht gesättigt.

Als nächstes bereiten Sie eine zehnfache Verdünnungsreihen durch Zugabe von 10 Gramm Boden zuerst bis 95 mL Lösung modifiziert Bristol oder MBS. Dies als Suspension A. beschriften

Nach dem Schütteln kräftig, weiter die Verdünnungsreihe durch Zugabe von 1 mL der Suspension A bis 9 mL der MBS in einem Reagenzglas. Weiterhin die zehnfache Verdünnungsreihen noch 4 Mal Verdünnungen bis zu 10-6 g / mL.

Als nächstes impfen Sie 5 replizieren Röhren, jedes mit 9 mL von MBS mit 1 mL der einzelnen Verdünnungen 10-1 bis 10-5. Dies führt zu 5 Wiederholungen Rohre für jede Verdünnung von 10-2 bis 10-6. Die Rohre lose Kappe.

Inkubieren Sie die Rohre schließlich eine volle 4 Wochen in einer Gegend, die dem Sonnenlicht ausgesetzt. Beobachten Sie die Rohre für Algenwachstum einmal alle 7 Tage. Röhren, die ausstellenden Algenwachstum werden grün angezeigt.

Die meisten wahrscheinliche Anzahl oder MPN, Analyse ist eine häufig verwendete mathematische Methode aufzuzählenden Mikroorganismen von Verdünnung eine konzentrierte erste Substrat gewachsen. Durch die Berücksichtigung der Verdünnungsfaktoren der Lösungen und die Anzahl der Rohre, die bei jeder Verdünnung positive von Wachstum Anzeichen, kann die wahrscheinlichste Anzahl der Organismen pro Gramm des ursprünglichen Bodenprobe mit Hilfe MPN Tabelle und einer einfachen Formel berechnet werden.

Um MPN zu berechnen, ist die höchsten Verdünnung mit der höchsten Anzahl von positiven replizieren Röhren die Beschriftung von p1, in diesem Fall die Wiederholungen des Schlauches C. zugewiesen. Im Gegensatz dazu, einige der Röhren von D & E sind negativ, ohne Anzeichen von Algenwachstum.

Die Anzahl der Rohre in die nächsten beiden höhere Verdünnungen, die positive Wachstum zeigen werden als p2 und p3gekennzeichnet. Hier, p2 = D und p3 = E.

Der Wert für p1 finden Sie auf der Suche nach der ersten Spalte in der Tabelle MPN. Das gleiche sollte mit der Spalte p2 erfolgen. Schließlich wird der Wert p3, am oberen Rand verwendet, um die beiden festgelegten p1 und p2, um einen Wert für die wahrscheinlichste Anzahl der Organismen pro mL schneiden.

Als nächstes um die Konzentration von Organismen pro Gramm in der ursprünglichen Bodenprobe zu berechnen, diesen Wert durch die Konzentration des Bodens in der Verdünnung gliedert p2 zugewiesen wurde. Die folgende Gleichung wird verwendet, um die tatsächliche Zahl der Organismen pro Gramm Boden zu definieren.

Algen-Enumeration und MPN Analyse haben eine breite Palette von Anwendungen, von die einige hier erkundet werden.

Diese Kultivierung Methode Algen Enumeration kann in einer Vielzahl von Einstellungen verwendet werden. Es kann auf Flüssen oder Seen, um Algen zu bestimmen, und Bewertung der Risiken von schädlichen Algenblüten angewendet werden. Alternativ kann es verwendet werden, zu beurteilen, die Sauberkeit und Sicherheit des Wassers direkt von Menschen, einschließlich Schwimmbädern, Springbrunnen oder andere Trinkwasserquellen verwendet. Im Idealfall in Trinkwasser-Proben und Schwimmbäder gibt es keine Algen vorhanden.

Die MPN-Analyse für die Enumeration kann auch auf andere nicht-Algen Mikroorganismen angewendet werden. Beispielsweise kann die Wasserqualität mit Indikator-Organismen wie Coliformen oder E. Colibeurteilt werden. Hier können Proben kultiviert werden, mit Medien, die Chemikalien, die geändert werden, um Farbe oder Fluoreszenz im Beisein der Indikator-Organismen produzieren. Indem Sie mehrere kleine Wiederholungen des Experiments in Einzelzellen, mit Proben zu einer bekannten Konzentration verdünnt ausführen, kann das Verhältnis der positiven Zellen zu einer MPN Tabelle für den spezifischen Indikator Organismus und ab Konzentration in den Proben bestimmt verwiesen werden.

Algen können auch für kommerzielle Anwendungen kultiviert werden. Beispielsweise verwenden einige Arten von gezüchteten blau – grüne Algen, die als Symbionten mit Pflanzen, Unterstützung ihrer Befestigung und Aufnahme von Stickstoff, die besonders nützlich bei der Beihilfe Pflanzenwachstums in Bereichen mit mageren Böden ist fungieren können. Algen können in ähnlicher Weise für Biokraftstoffe oder als eine Quelle der Nährstoff reiche Nahrung für das Vieh angebaut werden.

Sie sah nur Jupiters Einführung in die Algenkultur und Enumeration. Sie sollten jetzt verstehen, wie, Bodenproben für Algenwachstum zu verwässern, wie Algen im Labor Kultur und wie die Algen Konzentration Schriftproben Start aufgelistet. Danke fürs Zuschauen!

Results

Abbildung 2 zeigt ein Beispiel der repräsentative Ergebnisse.

p 1 wird gewählt, um die Zahl replizieren Röhren der höchsten Verdünnung (zuletzt konzentriert im Boden), die die höchste von positiven Rohre Anzahl. Hier zählen die Wiederholungen von Rohr B nicht weil das Rohr C aus einer höheren Verdünnung sind. Im Gegensatz dazu ist die Anzahl der Röhren aus Rohr D, die ein positiven Zeichen des Wachstums zeigen weniger als die von Rohr C. Ja, p1 = 5.

p 2 und p3 sind gewählt, um die Anzahl der Rohre in die nächsten beiden höhere Verdünnungen, die ein positiven Zeichen des Wachstums zeigen. So, p2 = 3 und p3 = 1.

Der Wert für p1 finden Sie auf der Suche nach der ersten Spalte in Tabelle 2unten. Das gleiche Verfahren wird in der Spalte p2 . Dann schneidet der Wert p3 (ganz oben) die beiden definiert durch die Werte von p1 und p2. In diesem Beispiel ist der Wert 1,1 Organismen pro mL.

Teilen Sie diesen Wert durch die Konzentration des Bodens in der Verdünnung, die Sie p2zugewiesen. In diesem Beispiel ist das Rohr D.

Equation 1

So gab es in diesem Beispiel 1.1 x 104 Algenzellen pro g des Bodens. Dieser Wert ist ziemlich typisch für die Anzahl der Algen im Boden gefunden.

Figure 2
Abbildung 2:  Hypothetische Ergebnis eines Algen Enumeration Experiments. Schattigen Rohre weisen auf das Vorhandensein von Algen. Ungeschwärzt Röhren repräsentieren das Fehlen von Algen.

Wahrscheinlichste Anzahl für die angegebenen Werte von p-3
P1 P2 0 1 2 3 4 5
0
0
0
0
0
0
0
1
2
3
4
5

0,018
0,037
0,056
0,075
0.094
0,018
0,036
0,055
0,074
0.094
0,11
0,036
0,055
0,074
0.093
0,11
0.13
0.054
0.0.73.
0,092
0,11
0.13
0,15
0.072
0.091
0,11
0.13
0,15
0,17
0.090
0,11
0.13
0,15
0,17
0,19
1
1
1
1
1
1
0
1
2
3
4
5
0,020
0,040
0.061
0.083
0,11
0.13
0,040
0.061
0.082
0.1
0.13
0,16
0.060
0.081
0.10
0.13
0,15
0,17
0.080
0.10
0.12
0,15
0,17
0,19
0.10
0.12
0,15
0,17
0,19
0,22
0.12
0,14
0,17
0,19
0,22
0,24
2
2
2
2
2
2
0
1
2
3
4
5
0,045
0,068
0.093
0.12
0,15
0,17
0,068
0,092
0.12
0,14
0,17
0,20
0.091
0.12
0,14
0,17
0,20
0,23
0.12
0,14
0,17
0,20
0,23
0.26
0,14
0,17
0,19
0,22
0,25
0.29
0,16
0,19
0,22
0,25
0,28
0,32
3
3
3
3
3
3
0
1
2
3
4
5
0,078
0,11
0,14
0,17
0.21
0,25
0,11
0,14
0,17
0.21
0,24
0.29
0.13
0,17
0,20
0,24
0,28
0,32
0,16
0,20
0,24
0,28
0,32
0,37
0,20
0,23
0,27
0,31
0,36
0,41
0,23
0,27
0,31
0,35
0,40
0,45
4
4
4
4
4
4
0
1
2
3
4
5
0.13
0,17
0,22

0,34
0,41
0,17
0.21
0.26
0,33
0,40
0,48
0.21
0.26
0,32
0,39
0,47
0,56
0,25
0,31
0,38
0,45
0,54
0.64
0,30
0,36
0,44
0,52
0,62
0,72
0,36
0,42
0,5
0,59
0.69
0.81
5
5
5
5
5
5
0
1
2
3
4
5
0,23
0,33
0.49
0.79
1.3
2.4
0,31
0,46
0,7
1.1
1.7
3.5
0,43
0.64
0.95
1.4
2.2
5.4
0,58
0,84
1.2
1.8
2.8
9.2
0,76
1.1
1.5
2.1
3.5
16
0.95
1.3
1.8
2.5
4.3

Tabelle 2. Am wahrscheinlichsten Zahlen für die Verwendung mit dem experimentellen Design in dieser Übung.

Applications and Summary

Die MPN-Methode ist nützlich, weil es ermöglicht die Abschätzung einer funktionalen Bevölkerung basierend auf eine prozessuale Zuschreibung. Im Beispiel wurde die funktionale Prozess Photosynthese von Algen, die für das Wachstum in der Abwesenheit von organischem Kohlenstoff erlaubt durchgeführt. Dies ermöglichte Algen Gesamtbevölkerung im Boden aufgelistet werden sollen.

MPN wird auch verwendet, um die Anzahl eines bestimmten Typs von mikrobiellen Krankheitserregern im Wasser, wie Salmonellen, unter Verwendung des Widerstands von Salmonellen , Malachitgrün schätzen.

Eine weitere Anwendung ist die Schätzung von Mykorrhiza-Pilzen durch impfen Boden Verdünnungen auf vielfältige Pflanze und Wurzel Kolonisierung durch die Pilze suchen.

Transcript

Algae are photosynthetic organisms that live in a variety of environments. Soil dwelling algae can be cultured in the laboratory, and their concentration enumerated using simple calculations.

Algae are a highly heterogeneous group of organisms that have one common trait, namely the possession of photosynthetic pigments, commonly chlorophyll. The vast majority of algae are microscopic, however, the exact definition of the group is controversial, and also includes seaweeds, which are typically macroscopic.

In the environment, algae can cause problems in surface waters such as lakes or reservoirs, forming algal blooms that deplete the water nutrients, blocking light passing beyond the water surface, and releasing toxins. The ability to enumerate algae in samples allows scientists to evaluate the health of an ecosystem, and the potential risk of algal overgrowth. 

Algal populations in soils frequently occur at around ten thousand cells per gram. These numbers are typically lower than corresponding concentrations of bacteria, fungi, or actinomycetes, as algae require sunlight for photosynthesis, which cannot penetrate far below the soil surface.

This video will illustrate how to culture algae from soil in the laboratory, and how to enumerate the concentration of algae in the starting soil sample.

Algae have beneficial effects on ecosystems. Blue-green algae, or cyanobacteria, have the ability to fix nitrogen gas from the atmosphere, making them useful in increasing soil nitrogen in semi-arid environments and also as a potential tool for biofuel production.

Other algae are eukaryotic, and range from single-celled to complex multicellular organisms, like seaweeds. These include green algae, euglenoids, dinoflagellates and diatoms, brown algae, and red algae.

Algae are phototrophic, obtaining energy from photosynthesis and carbon for biomass from carbon dioxide. As a result, they can be grown in media consisting entirely of inorganic nutrients, without an added organic carbon substrate. This lack of organic substrate prevents the growth of heterotrophic bacteria, which are dependent on external organic carbon for growth.

To culture algae for enumeration, soil samples are serially diluted tenfold to 10-6 g soil per mL, and cultured in growth media. Several replicates are made for each dilution. They are then incubated in a well-lit area for up to 4 weeks to allow algal growth.

The presence of algae in any dilution is determined by a positive sign of growth in the medium, which will typically appear as a green slime. Finally, empirically developed MPN tables designed for algal growth are consulted, enabling the user to determine the original algal concentration based on growth in dilution replicates. The MPN method relies on the serial dilution of samples such that the algae are diluted to extinction, meaning that at some dilution, no algal growth ensues.

Now that we are familiar with the concepts behind growing and enumerating algae from samples, let’s take a look at how this is carried out in the laboratory.

To begin the experiment, first weight out 10 grams of moist soil that has either been collected moist from the field, or been rehydrated and remained moist for 2 to 3 days. The soil should but not saturated.

Next, prepare a ten-fold dilution series by adding the 10 grams of soil first to 95 mL of Modified Bristol’s solution, or MBS. Label this as suspension A.

After shaking vigorously, continue the dilution series by adding 1 mL of suspension A to 9 mL of MBS in a test tube. Continue this ten-fold dilution series another 4 times to give dilutions up to 10-6 g per mL.

Next, inoculate 5 replicate tubes, each containing 9 mL of MBS with 1 mL of each of the dilutions 10-1 to 10-5. This results in 5 replicates tubes for each dilution from 10-2 to 10-6. Cap the tubes loosely.

Finally, incubate the tubes for a full 4 weeks in an area exposed to sunlight. Observe the tubes for algal growth once every 7 days. Tubes exhibiting algal growth will appear green.

Most Probable Number, or MPN, analysis is a commonly used mathematical method to enumerate microorganisms grown from dilution of a concentrated initial substrate. By taking into account the dilution factors of the solutions, and the number of tubes which show positive signs of growth at each dilution, the most probable number of organisms per gram of original soil sample can be calculated using an MPN table and simple formula.

To calculate MPN, the highest dilution with the highest number of positive replicate tubes is assigned the label of p1, in this case, the replicates of tube C. In contrast, some of the tubes from D & E are negative with no signs of algal growth.

The number of tubes in the next two higher dilutions that show positive growth are labeled as p2 and p3. Here, p2 = D and p3 = E.

The value for p1 can be found by looking down the first column in the MPN table. The same should be done with the p2 column. Finally, the value of p3, across the top, is used to intersect the two defined by p1 and p2, to give a value of the most probable number of organisms per mL.

Next, to calculate the concentration of organisms per gram in the original soil sample, this value is divided by the concentration of soil in the dilution to which p2 was assigned. The following equation is used to define the actual number of organisms per gram of soil.

Algal enumeration and MPN analysis have a wide range of applications, some of which are explored here.

This culturing method of algal enumeration can be used in a variety of settings. It can be applied to rivers or lakes to determine algal levels, and assess the risks of harmful algal blooms. Alternatively, it can be used to assess the cleanliness and safety of waters more directly used by humans, including swimming pools, water fountains, or other drinking water sources. Ideally, in potable water samples and swimming pools, there are no algae present.

The MPN analysis for enumeration can also be applied to other non-algal microorganisms. For example, water quality can be assessed using indicator organisms such as coliforms or E. coli. Here, samples can be cultured with media containing chemicals that are altered to produce color or fluorescence in the presence of the indicator organisms. By performing multiple small replicates of this experiment in individual cells, with samples diluted to a known concentration, the ratio of positive cells can be referenced to an MPN table for the specific indicator organism, and the starting concentration in the samples determined.

Algae may also be cultured for commercial applications. For example, some types of biofertilizer utilize blue-green algae, which can act as symbionts with plants, aiding their fixture and take-up of nitrogen, which is particularly useful in aiding crop growth in areas with poor soil. Similarly, algae can be grown for biofuels, or as a source of nutrient rich food for livestock.

You’ve just watched JoVE’s introduction to algal culture and enumeration. You should now understand how to dilute soil samples for algal growth, how to culture algae in the laboratory, and how to enumerate the algal concentration of your starting samples. Thanks for watching!