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Ordnungsgemäße Verwendung von Autoklaven
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Ordnungsgemäße Verwendung von Autoklaven
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JoVE Science Education Lab Safety
Proper Use of Autoclaves

6.10: Ordnungsgemäße Verwendung von Autoklaven

96,384 Views
06:34 min
July 14, 2017
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

Robert M. Rioux & Regina Chen, Pennsylvania State University, University Park, PA

Autoklavieren gehört zu den am häufigsten verwendeten Methoden im Labor zur Dekontamination. Die häufigsten Elemente mit einem Autoklaven dekontaminiert werden die biologische Proben (in der Regel solche mit Mikroorganismen) zu kontaktieren. Ein Autoklav arbeitet durch die Verwendung von unter Druck stehenden Hochtemperatur Dampf zu töten Mikroorganismen in der geladenen Materialien. Genügend Dampf Strom und Wärme-Übertragung sind essentiell für hocheffiziente Autoklavieren, welches sind die wichtigsten Grundsätze, die bei der Verpackung Materialien. Sicherheit muss betrachtet werden, wenn die Arbeit mit einem Autoklaven durch hohen Druck und Temperatur darin, die auch eingesetzt setzt Grenzen auf die Materialien sind kompatibel und erfordern besondere Aufmerksamkeit beim Verpacken, be- und Entladen Materialien .

Procedure

1. tragen Sie geeignete persönliche Schutzausrüstung (PSA)

hohen Druck und Temperatur Betriebsbedingungen beim Autoklavieren aufgetreten Risiken möglicher Hitze Verbrennung oder Explosion. Geeignete PSA beinhaltet einen Laborkittel, Schutzbrille, hitzebeständige Handschuhe und geschlossene Schuhe; Diese müssen getragen werden, beim Be- und Entladen von Materialien aus dem Autoklaven. Tragen Sie beim Umgang mit flüssigen Proben, einen Schürze und Gesicht Schild als zusätzliche PSA.

2. Vorbereitung der Materialien geladen werden

  1. identifizieren Autoklaven kompatibel und Autoklaven nicht kompatibel Material
    Obwohl Autoklavieren eine häufig verwendete und wirtschaftliche Methode zur Dekontamination, nicht alle stellt Materialien sind geeignet für Autoklavieren aufgrund der hohen Druck- und Temperaturbedingungen arbeiten. Im Allgemeinen sind alle Materialien, die verdunsten oder unter hohem Druck Dampf schmelzen nicht kompatibel mit Autoklavieren. Dazu gehören Materialien wie organische Lösungsmittel, schlecht hitzebeständigen Kunststoff wie Polystyrol, Polyethylen und Metalle, die ausschließlich aus rostfreiem Stahl. Nie Autoklaven brennbare, ätzende, giftige, reaktive oder radioaktiven Chemikalien. Materialien kompatibel für Autoklavieren gehören Pyrex oder Typ-I-Borosilikat-Glas, Polypropylen, Polycarbonat, Handschuhe, Edelstahl, Pipettenspitzen, Papier (Put Innentaschen Autoklav) und Medienlösungen.
  2. Verpackungsmaterial
    Nach der Identifizierung Autoklav-kompatible Materialien, ist geeigneter Verpackung auch wichtig, da es Sicherheit und effiziente Autoklavierung gewährleistet. Hier sind die grundlegenden Prinzipien bei der Verpackung Materialien:
    1. verwenden Sie immer einen sekundären Behälter aus Polypropylen oder Edelstahl.
    2. Für flüssige Proben, füllen Sie das Fläschchen um ½ voll und lösen die Kappen oder belüftete Verschlüssen zu verwenden. Füllen Sie niemals die Behälter, die mehr als 2/3 voll mit der Kappe voll angezogen.
    3. Inspizieren das Glasgefäß, um sicherzustellen, dass keine Risse. Wenn Risse gekennzeichnet sind, verfügen über Glaswaren in eine geeignete Steckdose. Nie Autoklaven ein bekannter zerbrochenes Glas Schiff.
    4. Nutzen immer Autoklav-kompatiblen Taschen zu Paket Abfälle. Die Beutel sollten Anzeige Bänder drauf und sollte an den Enden vor dem Laden um Dampf im Inneren der Tasche kann geöffnet werden.
    5. Nie überladen die Säcke oder Container ermöglichen ausreichend Dampf Flow für vollständige Sterilisation. Leerzeichen zwischen den Elementen.
    6. Don ' t Mischgut unvereinbar.
    7. Ort niemals scharfe Gegenstände in den Auffangbeutel.

3. Material zu laden

  1. Überprüfen Sie den Autoklaven ' s Interieur machen sicher, es gibt keine potenzielle Gefahr des vorherigen Benutzers Links.
  2. Reinigen Sie den Abfluss vor dem Laden Materialien damit gute Durchblutung kann.
  3. Sicherstellen, dass die Säcke nicht berühren die Innenwände des Autoklaven schmelzen zu vermeiden.
  4. Flüssigkeiten und trockene Materialien erfordern verschiedene Zyklen und müssen getrennt autoklaviert werden.
  5. Schließen Sie die Tür fest.

4. Bedienung des Autoklaven

  1. nur geschultes Personal darf Autoklaven zu betreiben. Finden Sie im Gerätehandbuch bei Bedarf da Betrieb Protokolle zwischen den verschiedenen Autoklaven variieren.
  2. Nach sicherstellen, dass die Autoklaven Tür fest verschlossen ist, stellen Sie die Temperatur Autoklavieren bis 121 ° C und halten einen Druck von mindestens 15 Psi.
  3. Um Autoklaven und Zyklus eingestellt, die folgenden Faktoren berücksichtigt werden müssen:
    1. Geräte Empfehlungen vom Hersteller ' Handbuch s.
    2. Die Art der geladenen Materialien im Inneren: trockenen oder flüssigen.
    3. Die Mengen an Material geladen.
    4. Form und Größe des Containers verwendet.
    5. Wärmeleitfähigkeit des Behälters und Materialien.
    6. Zweck der Dekontamination.

5. Entladen von autoklaviert Material(ien)

  1. richtige PSA tragen, wie oben beschrieben.
  2. Sicherstellen, dass die Temperatur und den Druck des Autoklaven in einem sicheren Bereich zurückgekehrt.
  3. Stehen hinter der Tür und vorsichtig die Tür um alle übrig gebliebenen Dampf in den Autoklaven in den Raum freizugeben.
  4. Erlauben die Materialien im Inneren des Autoklaven für 10 min. stehen lassen Sie Dampf oder Heißluft im Inneren des Materials gefangen.
  5. Nicht schütteln flüssiges Material während der Entnahme aus dem Autoklaven. Wenn nötig, Label das Material als heiß, um Hitze zu vermeiden an eine Einzelperson, die möglicherweise nichts von der Tatsache brennt, dass das Material vor kurzem autoklaviert wurde.
  6. Warten auf das Material auf Raumtemperatur abkühlen lassen vor dem Transport in das Labor oder außerhalb des Labors. In beiden Fällen unbedingt geeignete Containment für den Transport zu nutzen.
  7. Erfassen die Details der Materialien und Autoklavieren Bedingungen in einem Benutzer ' s log.

Autoklavieren gehört zu den am häufigsten verwendeten Methoden im Labor zur Dekontamination.

Viele Wissenschaftler, vor allem die Arbeit mit biologischen Proben, müssen sterilisiert Ausrüstung und Medien und Autoklaven bieten eine schnelle und kostengünstige Möglichkeit, Materialien zu dekontaminieren. Sie verwenden Dampf bei hohen Temperaturen und Druck, um Mikroorganismen zu töten. Aufgrund dieser extremen Bedingungen, aber sie müssen sorgfältig verwendet werden.

Dieses Video zeigen wie Autoklaven funktionieren und wie man sie richtig benutzt.

in einem Autoklaven Materialien sind beheizt, mit Dampf auf Temperaturen von 121 ° c bei Drücken von mindestens 15 p.s.i. Nach mindestens 30 Minuten, diese Bedingungen zu entwässern und Zellen zu töten werden.

Autoklaven sterilisieren können flüssige und feste Materialien, aber unterschiedliche Einstellungen müssen berücksichtigt werden. Flüssigkeiten müssen längere Zeiten als Feststoff, den Dampf zu erschöpfen, um Flash-Kochen zu verhindern. Darüber hinaus größere Mengen an Flüssigkeiten zu erhitzen bis die richtige Temperatur länger dauern.

Nicht alle Materialien können die Temperaturen in einem Autoklaven. Deshalb nie Autoklaven irgendetwas, das schmilzt, Verbrennungen, Explosive oder Flüssigkeiten, die verdunsten werden. Auch, tun nicht Autoklaven giftige oder radioaktiven Chemikalien.

Nun, wir zeigen Ihnen wie zur Vorbereitung von Proben für die Autoklaven und einer Bedienung.

Wählen Sie zuerst die Materialien Autoklavieren werden Sie und verwenden Sie ausschließlich kompatible Container und Instrumente. Pyrex, Borosilikat-Glas, Edelstahl, Polypropylen und Polycarbonat eignet sich für Autoklavieren.

Anderen gemeinsamen Labormaterialien wie Pipettenspitzen und Boxen sind auch kompatibel. Papier kann in Autoklaven-kompatiblen Taschen autoklaviert werden.

Feste Abfälle kann auch in einer entsprechenden Tasche autoklaviert werden. Lassen Sie Raum in diese Tasche zu lassen Sie Dampf zirkulieren und binden die Enden. Zu guter Letzt vor dem Autoklavieren stellen Sie sicher, erstellen Sie eine kleine Öffnung in der Tasche, um Dampf geben kann.

Für wässrige Medien und anderen kompatiblen flüssigen Proben verwenden einen intakten Behälter ohne Risse. Füllen Sie den Behälter etwa halb voll und nie mehr als zwei Drittel voll.

Lüften Gase aus einem Flüssigkeitsbehälter, lösen die Kappe. Wenn es keine Obergrenze gibt, decken locker mit Alufolie Verunreinigung des Werkstoffes autoklaviert.

Setzen alle Materialien in einer sekundären Behälter aus Polypropylen oder Edelstahl. Separate festen und flüssigen Materialien autoklaviert werden. Lassen Sie Platz zwischen Materialien und nicht den Container Überfüllsicherung.

Bringen Sie zu guter Letzt ein Stück Autoklaven Band auf alle MattenErials. Diese Band hat temperaturempfindliche Indikatoren, die schwarz werden, wenn ausreichende Temperatur erreicht worden ist.

Wenn ein Autoklav mit geeigneten persönlichen Schutzausrüstung zum Schutz gegen die hohe Temperatur und Druck Risiken tragen. Dazu gehören standard PSA-Schutzbrille, Kittel, und geschlossene Schuhe und Hitzeschutzhandschuhe. Verwenden Sie einen Schürze und Gesicht Schild, beim Umgang mit flüssiger Proben.

In den Autoklaven zuerst die Tür öffnen und überprüfen Sie, ob irgendwelche Gefahren innerhalb. Laden Sie Flüssigkeit und trockene Materialien getrennt, da sie unterschiedliche Autoklaven Zyklen erfordern.

, Schmelzen zu verhindern sicherstellen, dass Materialien die Wände nicht berühren. Gewährleisten Sie eine gute Luftzirkulation Wärme halten Sie genügend Abstand zwischen den Materialien. Zu guter Letzt schließen und die Tür verschließen.

Verschiedenen Autoklaven haben verschiedene Bedienungsanleitung. Zyklen können durch Temperatur und Uhrzeit manuell einstellen oder durch Auswahl aus einer vordefinierten Liste festgelegt werden. Im Allgemeinen verwenden Sie die empfohlenen Zyklen für die Art des Materials sind Sie dekontaminierende.

Eine Vielzahl von Zyklen gibt es für Feststoffe und Flüssigkeiten sowie für unterschiedliche Mengen an Material und Abfall, autoklaviert werden. Wenn Sie einen Zyklus ausführen, sicherstellen, dass die Temperatur erreicht hat, mindestens 121 Grad Celsius und die Druck mindestens 15 p.s.i.

Nach der Zyklus vorbei, stellen Sie sicher der Druck ist auf Null zurück und der Autoklaven abgekühlt hat. Öffnen Sie vorsichtig die Tür zu lassen, übrig gebliebene Dampf. Führen Sie die Materialien für 10 Minuten stehen, heißen Gase freizugeben. Das Autoklav-Band sollte jetzt haben schwarze Streifen oder sagen autoklaviert drauf, obwohl dies nicht garantiert werden kann, dass Sterilisation stattgefunden hat.

Tragen geeignete PSA, Materialien, achten Sie darauf, flüssigen Proben nicht schütteln entfernen. Notieren Sie sich Ihre Nutzung im Protokoll, einschließlich der Art der Stoffe und besonderen Umstände, wenn gestoßen. Zu guter Letzt transport von Materialien zu einem gesicherten Bereich oder eine laminare Strömung Kapuze abkühlen lassen.

Sie haben beobachtete, wie Jupiters Einführung in Autoklaven. Sie sollten jetzt verstehen, welche Materialien autoklaviert werden können, wie man sie zubereitet und wie man das Instrument sicher zu verwenden. Danke fürs Zuschauen!

Transcript

Das Autoklavieren ist eine der am häufigsten verwendeten Methoden im Labor zum Zwecke der Dekontamination.

Viele Wissenschaftler, insbesondere diejenigen, die mit biologischen Proben arbeiten, benötigen sterilisierte Geräte und Medien, und Autoklaven bieten eine schnelle und kostengünstige Möglichkeit, Materialien zu dekontaminieren. Sie verwenden Dampf bei hohen Temperaturen und hohem Druck, um Mikroorganismen abzutöten. Aufgrund dieser extremen Bedingungen müssen sie jedoch vorsichtig verwendet werden.

In diesem Video wird veranschaulicht, wie Autoklaven funktionieren und wie man sie richtig einsetzt.

In einem Autoklaven werden die Materialien mit Dampf auf Temperaturen von 121 Grad Celsius bei Drücken von mindestens 15 p.s.i. erhitzt. Nach mindestens 30 Minuten dehydrieren diese Bedingungen und töten die Zellen ab.

Autoklaven können sowohl flüssige als auch feste Materialien sterilisieren, jedoch müssen unterschiedliche Betriebseinstellungen berücksichtigt werden. Flüssigkeiten benötigen längere Zeiten als Feststoffe, um den Dampf abzulassen, um ein Schocksieden zu verhindern. Darüber hinaus dauert es länger, bis sich größere Mengen flüssiger Materialien auf die richtige Temperatur erwärmen.

Nicht alle Materialien können den Temperaturen in einem Autoklaven standhalten. Autoklavieren Sie daher niemals etwas, das schmilzt, verbrennt, explosiv ist oder Flüssigkeiten, die verdampfen. Autoklavieren Sie auch keine giftigen oder radioaktiven Chemikalien.

Nun zeigen wir Ihnen, wie Sie Proben für den Autoklaven vorbereiten und wie Sie ihn bedienen.

Wählen Sie zunächst die Materialien aus, die Sie autoklavieren möchten, und verwenden Sie nur kompatible Behälter und Instrumente. Für das Autoklavieren können Pyrex, Borosilikatglas, Edelstahl, Polypropylen und Polycarbonat verwendet werden.

Auch andere gängige Labormaterialien wie Pipettenspitzen und -boxen sind kompatibel. Papier kann in autoklaventauglichen Beuteln autoklaviert werden.

Feste Abfälle können auch in einem entsprechenden Beutel autoklaviert werden. Lassen Sie in diesem Beutel Platz, damit der Dampf zirkulieren kann und die Enden zusammengebunden werden. Achten Sie schließlich vor dem Autoklavieren darauf, eine kleine Öffnung im Beutel zu schaffen, damit Dampf eindringen kann.

Verwenden Sie für wässrige Medien und andere kompatible flüssige Proben einen intakten Behälter ohne Risse. Füllen Sie den Behälter etwa zur Hälfte und nie zu zwei Dritteln.

Um Gase aus einem Flüssigkeitsbehälter zu belüften, lösen Sie die Kappe. Wenn keine Kappe vorhanden ist, decken Sie sie locker mit Aluminiumfolie ab, um eine Kontamination des autoklavierten Materials zu vermeiden.

Geben Sie alle Materialien in einen Sekundärbehälter aus Polypropylen oder Edelstahl. Trennen Sie feste und flüssige Materialien, die autoklaviert werden sollen. Lassen Sie Platz zwischen den Materialien und überfüllen Sie den Behälter nicht.

Befestigen Sie zum Schluss ein Stück Autoklavenband an allen Materialien. Dieses Band verfügt über temperaturempfindliche Anzeigen, die schwarz werden, wenn eine ausreichende Temperatur erreicht wurde.

Tragen Sie bei der Verwendung eines Autoklaven geeignete persönliche Schutzausrüstung, um sich vor hohen Temperatur- und Druckrisiken zu schützen. Dazu gehören Standard-PSA-Schutzbrillen, Laborkittel sowie geschlossene Schuhe und hitzebeständige Handschuhe. Verwenden Sie eine Schürze und einen Gesichtsschutz, wenn Sie mit flüssigen Proben umgehen.

Öffnen Sie am Autoklaven zuerst die Tür und prüfen Sie, ob sich darin Gefahren befinden. Laden Sie flüssige und trockene Materialien getrennt, da sie unterschiedliche Autoklavenzyklen erfordern.

Um ein Schmelzen zu verhindern, stellen Sie sicher, dass die Materialien die Wände nicht berühren. Sorgen Sie für einen guten Wärmefluss, indem Sie einen ausreichenden Abstand zwischen den Materialien einhalten. Schließen und versiegeln Sie zum Schluss die Tür.

Unterschiedliche Autoklaven haben unterschiedliche Bedienungsanleitungen. Die Zyklen können durch manuelles Einstellen von Temperatur und Zeit oder durch Auswahl aus einer Voreinstellungsliste eingestellt werden. Verwenden Sie im Allgemeinen die empfohlenen Zyklen für die Art des Materials, das Sie dekontaminieren.

Es gibt eine Vielzahl von Kreisläufen für Feststoffe und Flüssigkeiten sowie für unterschiedliche Mengen an Material und Abfällen, die autoklaviert werden sollen. Wenn Sie einen Zyklus durchführen, stellen Sie sicher, dass die Temperatur mindestens 121 Grad Celsius und der Druck mindestens 15 p.s.i. erreicht hat.

Stellen Sie nach Beendigung des Zyklus sicher, dass der Druck wieder auf Null gesunken ist und der Autoklav abgekühlt ist. Öffnen Sie vorsichtig die Tür, um übrig gebliebenen Dampf abzulassen. Lassen Sie die Materialien dann 10 Minuten stehen, um heiße Gase freizusetzen. Das Autoklavenband sollte nun schwarze Streifen aufweisen oder z.B. autoklaviert sein, obwohl dies keine Garantie dafür ist, dass die Sterilisation stattgefunden hat.

Tragen Sie geeignete PSA, entfernen Sie die Materialien und achten Sie darauf, keine flüssigen Proben zu schütteln. Notieren Sie Ihren Verbrauch im Protokoll, einschließlich der Art der Substanzen und etwaiger besonderer Umstände, falls sie auftreten. Transportieren Sie die Materialien schließlich zum Abkühlen in einen sicheren Bereich oder eine Laminar-Flow-Haube.

Sie haben gerade die Einführung von JoVE in Autoklaven gesehen. Sie sollten nun verstehen, welche Materialien autoklaviert werden können, wie sie vorbereitet werden und wie Sie das Instrument sicher verwenden. Danke fürs Zuschauen!

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