Name: Elektrophysiologische Aufzeichnung in der Drosophila Embryo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Lernen Sie elektrophysiologische Aufzeichnungen an Muskeln und Motorneuronen in Drosophila-Embryonen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung synaptischer Funktionen und neuronaler Entwicklung.

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Elektrophysiologische Ableitungen von Drosophila Embryonen erfordert die manuelle Manipulation und Präparation. Die Gesundheit der Vorbereitung und konsequente Qualität der Aufnahmen, hängt von einer in der Lage, schnell und sauber vorbereiten fragile embryonalen Gewebe für die Aufnahme, und führen Sie dann das Experiment. Experimentatoren sollten in beiden embryonalen Dissektionen und Patch-Clamp-Elektrophysiologie beherrschen, bevor Sie beides auf einmal anzugehen. Die Aufnahmen k...

elektrophysiologische aufzeichnung in der drosophila embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Drosophila ist ein führender genetisches Modell für die Untersuchung der beiden embryonalen Entwicklung und funktionelle Neurowissenschaften. Traditionell sind diese Felder ganz von einander getrennt, mit weitgehend unabhängigen Geschichten und Wissenschaft. Allerdings ist die Schnittstelle zwischen diesen in der Regel unterschiedliche Felder der Entwicklungsprogramme zugrunde liegenden Erwerb von funktionellen elektrischen Signal-Eigenschaften und die Differenzierung von funktionellen chemischen Synapsen während der letzten Phasen der neuronalen Schaltkreis Bildung. Diese Schnittstelle ist ein äußerst wichtiges Gebiet für die Untersuchung. In Drosophila treten diese Phasen der funktionalen Entwicklung über einen Zeitraum von &lt;8 Stunden (bei ​​25 ° C) während des letzten Drittels der Embryogenese. Diese späte Entwicklungsphase galt lange Zeit als unlösbar zu Ermittlungen wegen der Ablagerung von einem harten, undurchlässigen epidermale Kutikula. Ein Durchbruch Fortschritt war die Anwendung von Wasser-Polymerisation chirurgische Kleber, die lokal an der Nagelhaut kann angewendet werden, um kontrollierte Präparation des Late-Stage-Embryonen zu ermöglichen. Mit einem dorsalen Längsschnitt, kann der Embryo flach gelegt werden, Freilegung der Bauchmark und Körper Wand Muskulatur experimentelle Untersuchung. Whole-Cell-Patch-Clamp-Techniken kann dann eingesetzt werden, um von individuell identifizierbaren Neuronen und somatischen Muskeln aufzuzeichnen. Diese Aufnahme-Konfigurationen verwendet worden, um das Aussehen und die Reifung der Ionenströme und Aktionspotential Ausbreitung in beide Neuronen und Muskeln zu verfolgen. Genetische Mutationen nicht diese elektrischen Eigenschaften charakterisiert worden, um die molekulare Zusammensetzung von Ionenkanälen und damit verbundene Signal-Komplexen zeigen, und um die Erforschung der molekularen Mechanismen der funktionellen Differenzierung zu beginnen. Ein besonderer Schwerpunkt ist die Montage von synaptischen Verbindungen, sowohl in das zentrale Nervensystem und Peripherie. Die glutamatergen neuromuskulären Synapse (NMJ) ist am leichtesten zugängliche, eine Kombination von optischen bildgebenden und elektrophysiologischen Aufzeichnung. Ein Glas Saugelektrode wird verwendet, um die peripheren Nerven zu stimulieren, mit exzitatorischen Kreuzung Strom (EJC) Aufnahmen in der Spannungs-geklemmt Muskel gemacht. Diese Aufnahme wurde die Konfiguration verwendet werden, um die funktionale Differenzierung der Synapse-Chart, und verfolgen Sie das Aussehen und die Reifung der präsynaptischen Freisetzung von Glutamat Eigenschaften. Darüber hinaus können postsynaptischen Eigenschaften unabhängig über iontophoretischen oder Druck-Anwendung von Glutamat untersucht direkt auf den Muskel Oberfläche, um das Aussehen und die Reifung der Glutamat-Rezeptor-Felder zu messen. So können sowohl prä-und postsynaptischen Elemente einzeln oder in Kombination während der embryonalen Synaptogenese überwacht werden. Dieses System wurde stark genutzt zu isolieren und zu charakterisieren genetische Mutanten, die embryonale Synapsenbildung beeinträchtigen und damit zeigen, die molekularen Mechanismen, über die Spezifikation und Differenzierung von Synapsen-Verbindungen und funktionelle synaptische Signalisierung Eigenschaften.

Elektrophysiologischen Ableitungen aus<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryonen erlauben Analysen der Entwicklung von Muskel-und Neuron elektrische Eigenschaften, sowie die Charakterisierung der funktionellen Synaptogenese im glutamatergen neuromuskulären Synapse und zentralen cholinergen und GABAergen Synapsen.

Elektrophysiologische Aufzeichnung in der Drosophila Embryo

Drosophila ist ein herausragendes genetisches Modell für die Untersuchung sowohl der embryonalen Entwicklung als auch der funktionalen Neurowissenschaften. Traditionell sind diese Fachbereiche recht ...

Elektrophysiologische Ableitungen von Muskeln und Motoneuronen können von einer ordnungsgemäß präparierten Körperwand eines Oph-Embryos erhalten werden. Die Muskeln 6, 7, 12 oder 13 können einfach mittels Ganzzell-Ableitung konfiguriert werden, und robuste Ströme mit kleiner Amplitude können nach Herstellung einer Gigaseal-Ableitung an der neuromuskulären Verbindung gemessen werden. Eine Saugelektrode kann verwendet werden, um einen motorischen Nerv in der Nähe der Austrittsstelle aus dem ZNS anzusaugen und präsynaptische Reize zu liefern, während gleichzeitig die Ganzzellströme im postsynaptischen Muskel gemessen werden.Alternativ kann eine Pipette verwendet werden, um erregende Neurotransmitter nahe der Ableitelektrode über Iontophorese oder Druckeinspritzung zuzuführen. Hallo, ich bin Ton aus dem Labor von Dave am Department für Biowissenschaften der University of Illinois in Chicago. Heute werde ich Ihnen die elektrophysiologische Ableitung der neuromuskulären Verbindung im Embryonalstadium sowie der zentralen Neuronen zeigen.Mit diesen Verfahren untersuchen wir die Funktion und Entwicklung des neuromuskulären Systems von Joof. Diese Techniken wurden ursprünglich von Kendall Br

electrophysiological-recording-in-the-drosophila-embryo

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Isolierung von ganzen Gehirnen von adulten Drosophila in Vorbereitung für die Aufnahme von einzelnen Neuronen mit Standard ganzen Zelle-Technologie. Es enthält Bilder von GFP-markierten Zellen und Neuronen während der Aufnahme angesehen.

Whole Cell Recordings von Brain of Adult Drosophila

Hier beschreiben wir elektrophysiologische Methoden zur Messung der synaptischen Transmission an der neuromuskulären Synapse von Drosophila Larve. Evozierte Freisetzung wird künstlich durch die Stimulierung der Motoneuronen Axone initiiert, und die Übertragung durch die NMJ kann durch die postsynaptische Reaktion im Muskel ausgelöst gemessen werden.

Elektrophysiologischen Methoden für die Aufzeichnung Synaptic Potentials aus dem NMJ von Drosophila-Larven

Diese Technik macht die Drosophila embryonale neuromusculature für die Immunhistochemie oder elektrophysiologische Ableitung. Es ist für das Studium frühen Ereignisse in neuromuskulären Entwicklung oder Durchführung Elektrophysiologie in Mutanten, die nicht brüten können nützlich.

Ernte und Vorbereitung Drosophila Embryonen für die elektrophysiologische Ableitung und andere Verfahren

Wir präsentieren verschiedene Wege, um die Herzfunktion in der Larve des...

Überwachung Herzfunktion Larven Drosophila melanogaster Für physiologische Untersuchungen

The Giant Fiber System ist eine einfache neuronale Schaltkreis der...

Elektrophysiologischen Ableitungen aus dem Riesen-Fiber Pathway der D. melanogaster</em

Dieses Video beschreibt das Protokoll zur elektrophysiologischen Aufzeichnung der Photorezeptoraktivität im Auge einer immobilisierten Drosophila, das eine präzise Messung von Spannungsänderungen als Reaktion auf Lichtreize ermöglicht.

Elektrophysiologische Aufzeichnung der Spannungsantworten von retinalen Photorezeptoren der Drosophila auf Lichtreize

Das Video zeigt die extrazelluläre Aufzeichnung der neuronalen Aktivität aus dem Zentralnervensystem (ZNS) von Drosophila-Larven. Das durchtrennte ZNS wird in einer Aufzeichnungskammer positioniert, und die elektrische Aktivität eines absteigenden Nervs wird aufgezeichnet, um die Ausgangsfeuerfrequenz zu bestimmen. Dann wird ein Prüfmittel eingeführt, und die Änderung der Brennhäufigkeit wird aufgezeichnet, um die erregende oder hemmende Wirkung des Mittels zu bestimmen.

Extrazelluläre Aufzeichnung der elektrischen Aktivität im zentralen Nervensystem der Drosophila

Dieses Protokoll beschreibt extrazellulären Aufnahme der Aktionspotentialantworten durch labellar Geschmack Neuronen in Drosophila gefeuert.

Elektrophysiologische Aufnehmen von<em&gt; Drosophila</em&gt; Labellar Geschmack Sensillen

Scharfe Mikroelektroden ermöglichen eine genaue elektrophysiologische Charakterisierung der Photorezeptor- und visuellen Interneuronenleistung in lebenden Drosophila. Hier zeigen wir, wie man mit dieser Methode qualitativ hochwertige Spannungsreaktionen einzelner Zellen auf kontrollierte Lichtstimulation aufzeichnen kann. Diese Methode ist ideal, um die neuronale Informationsverarbeitung in Facettenaugen von Insekten zu untersuchen.

Elektrophysiologische Verfahren zur Aufzeichnung von intrazellulärer Spannung Antworten von<em&gt; Drosophila</em&gt; Fotorezeptoren und Inter auf Lichtreize<em&gt; In Vivo</em

Ganzzellige Aufnahmen von Drosophila Melanogaster Photorezeptoren ermöglichen die Messung von spontanen Dunkelstößen, Quantenstößen, makroskopischen Reaktionen auf Licht und Strom-Spannungs-Beziehungen unter verschiedenen Bedingungen. In Kombination mit D. melanogaster genetischen Manipulationswerkzeugen ermöglicht diese Methode die Untersuchung des ubiquitären Inositol-Lipid-Signalwegs und seines Ziels, des TRP-Kanals.

Elektrophysiologische Methode für Ganzzell-Spannungsklemmen Aufnahmen von<em&gt; Drosophila</em&gt; Fotorezeptoren

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zum Aufzeichnen der absteigenden elektrische Aktivität von Drosophila Melanogaster Zentralnervensystems ermöglichen kostengünstige und praktische Erprobung von pharmakologischen Wirkstoffen, Genmutationen neuronaler Proteine, und/oder die Rolle der unerforschten physiologischen Wege.

Elektrophysiologische Aufnahme der zentralen Nervensystems Tätigkeit der dritte Instar Drosophila Melanogaster

Lernen Sie elektrophysiologische Aufzeichnungen an Muskeln und Motorneuronen in Drosophila-Embryonen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung synaptischer Funktionen und neuronaler Entwicklung.

Elektrophysiologische Aufzeichnung in der Drosophila Embryo

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