Name: Dissection der Imaginalscheiben vom 3. Instar Drosophila-Larven (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-17T00:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: Lernen Sie die Präparation von Imaginalscheiben aus Drosophila-Larven der dritten Instarstufe. Diese Technik ermöglicht die Untersuchung von Entwicklungsprozessen wie Apoptose und Proteinexpression in vivo.

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dissection der imaginalscheiben vom 3. instar drosophila-larven

Dissection of Imaginal Discs from 3rd Instar Drosophila Larvae

Dieses Protokoll zeigt die Dissektionstechnik zur Isolierung Imaginalscheiben von Drosophila-Larven im 3. Larvenstadium Stufe eingesetzt. Verfahren zur Festsetzung des Gewebes nach Worten und dem Entfernen der Flügel-, Bein-und Augen-Scheiben werden direkt auf einem Objektträger für spätere Visualisierung unter Beweis gestellt.

Dissection der Imaginalscheiben vom 3. Instar Drosophila-Larven

Heute werde ich Ihnen zeigen, wie man Imaginalanlagen aus Drosophila-Larven des dritten Larvenstadiums präpariert. Die Imaginalanlagen von Larven des dritten Stadiums können für eine Vielzahl von Entwicklungsprozessen verwendet werden. In unserem Labor untersuchen wir sie, um den Prozess der Apoptose zu beobachten, aber Sie können auch verschiedene Proteine in ihnen exprimieren und auf diese Weise unterschiedlichste Entwicklungsprozesse innerhalb der Anlagen untersuchen.Dazu werde ich mehrere sehr wichtige Werkzeuge verwenden. Zunächst ist dies der Pflückstab, mit dem wir die Larven aus ihren Schalen entnehmen werden. Als nächstes, und das ist sehr wichtig, die Präparationspinzette, die äußerst scharf sein muss, damit die Dissektion erfolgreich durchgeführt werden kann.Dann verwenden wir eine chirurgische Klinge, eine Nr. 11-Chirurgieklinge, um die Discs vom Kopf zu entfernen. Anschließend platzieren wir die Discs auf einem Objektträger mit etwas Vector Shield als Einbettmedium. Zunächst sammeln wir daher einige dritte-Instar-Wanderlarven, dritte-Instar-Larven.Ich verwende hier lediglich meinen Pflückstab, um sie gewissermaßen von der Röhrenwand abzulösen. Manchmal hilft es, wenn d

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Hier beschreiben wir ein Protokoll, um die Migration von Gliazellen in den Entwicklungsländern Drosophila Auge mit Live-mikroskopische Analyse mit GFP markierten Gliazellen gepaart untersuchen.

Live-Imaging von Gliazellen Migration in der Drosophila Eye Imaginalscheibe

Wir beschreiben ein neuartiges rot fluoreszierendes Protein (RFP) Reporter, der speziell in den...

A Novel RFP Reporter in der Visualisierung des Eye Imaginalscheibe in Aid Drosophila</em

Drosophila melanogaster-Larven bieten ein ideales Modellsystem, um die Mechanismen der axonalen Transport innerhalb Larven segmentalen Nerven zu untersuchen. Mit diesem Verfahren können 3 rd Larvenstadium, die verschiedene Mutationen zu Wildtyp-Larven verglichen werden.

Visualisierung von Larven segmentalen Nerven in 3 Rd Instar Drosophila Larven Vorbereitungen

Dissektion und Immunhistochemie von Larven, Puppen und Erwachsenenbildung<em&gt; Drosophila</em&gt; Netzhäute

Bei der Färbung von Drosophila-Imaginalscheiben wird oft eine grobe Dissektion durchgeführt, bei der die Scheiben freigelegt werden, aber am Körper haften. Nach dem Färben werden die interessierenden Discs isoliert und montiert. Das Beispielprotokoll demonstriert ein Verfahren zum Disparieren und Montieren von Flügel-Imaginalscheiben.

Drosophila Dissektion der Imaginalscheibe der Larva: Eine Methode zur Beobachtung der Entwicklung von Epithelien

Dieses Protokoll Details eine optimierte Methode verwendet, um Live-Cell-Imaging im Rahmen eines intakten Larven Gehirn durchzuführen. Live-Cell-Imaging Ansätze sind von unschätzbarem Wert für die Erforschung der neuronalen Stamm asymmetrische Zellteilungen sowie andere neurogene und Entwicklungsprozesse konsequent aufzudecken Mechanismen, die bisher übersehen wurden.

Live-Imaging von<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven Neuroblasten

Die adulten Strukturen von Drosophila stammen von sackartigen Strukturen ab, die imaginale Scheiben genannt werden. Die Analyse dieser Scheiben bietet Einblicke in viele Entwicklungsprozesse, einschließlich der Gewebebestimmung, der Etablierung von Kompartimentgrenzen, der Zellproliferation, der Spezifikation des Zellschicksals und der planaren Zellpolarität. Dieses Protokoll wird verwendet, um imaginale Scheiben für die Licht-/Fluoreszenzmikroskopie vorzubereiten.

Präparation und Immunfärbung von Imaginalscheiben aus Drosophila melanogaster

Das Ziel dieser Technik ist es, Forschern die Möglichkeit zu geben, Puppenaugenscheiben jeden Alters zu dissektionieren, Immunfärbung  und Montage von Puppenaugenscheiben durchzuführen.

Dissection und Montage<em&gt; Drosophila</em&gt; Pupal Eye Discs

Dieses Protokoll zeigt , wie fluoreszierend markiert, genetisch definierten klonalen Tumoren im Auge von Drosophila melanogaster / antennal Imaginalscheiben (EAD) zu erzeugen. Es beschreibt, wie der EAD und Gehirn aus dem dritten Larvenstadium zu sezieren und wie sie zu verarbeiten, zu visualisieren und zu Veränderungen der Genexpression und Tumorinvasivität quantifizieren.

Das<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginalscheibe Tumormodell: Visualisierung und Quantifizierung von Genexpression und Tumorinvasivität mit Genetischen Mosaiken

Wir beschreiben ein Protokoll zur Messung von Kontakten zwischen Zellen in benachbarten Epithelschichten in lebenden Drosophila-Flügel-Imaginalscheiben unter Verwendung eines GFP-rekonstitutionsbasierten Ansatzes.

Ein GFP-komplementäres Dual-Expressionssystem zur Beurteilung des durch Cytoneme vermittelten Zell-Zell-Kontakts in lebenden Drosophila-Flügel-Imaginalscheiben

Dieser Artikel beschreibt ein effizientes Protokoll zur dissektion der imaginären Bandscheiben und zur Färbung von Antikörpern, das mit Reagenzien sparsam ist und den Umgang mit imaginären Bandscheiben in kleinen Mengen erleichtert.

Kleinskalige Dissektion und Antikörperfärbung der Augen-, Antennen- und Flügel-Imaginalscheiben von Drosophila melanogaster

Lernen Sie die Präparation von Imaginalscheiben aus Drosophila-Larven der dritten Instarstufe. Diese Technik ermöglicht die Untersuchung von Entwicklungsprozessen wie Apoptose und Proteinexpression in vivo.

Dissection der Imaginalscheiben vom 3. Instar Drosophila-Larven

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