Name: Orthotopen Aorten-Transplantation: Ein Rattenmodell die Entwicklung von chronischen Vaskulopathie Study (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Lernen Sie die orthotope Aortentransplantation bei Ratten zur Untersuchung der chronischen Transplantatvaskulopathie. Dieses Modell ermöglicht die Analyse von Neointimabildung durch histologische Methoden.

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Die Autoren danken Christiane Pahrmann für ihre histologischen Arbeit. Finanzierung Sonja Schrepfer hat ein Forschungsstipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 und SCHR992/4-1) erhalten haben.]

Ratten mit einem Gewicht ca. 250-300g sind von Charles River (Sandhofer Weg 7, D-97633 Sulzfeld) erworben. Transplantationen werden unter Verwendung PVG Ratten als Spender, und ACI Ratten als Empfänger. Ratten sind unter üblichen Bedingungen, gefüttert Standard Rattenfutter und Wasser ad libidum untergebracht. Alle chirurgischen Instrumente sind vor dem Gebrauch sterilisiert. Donor Zubereitung: Anesthetize Ratte mit Isofluran (2,5-3%) mit einer Induktion Kammer. <ol><li> Shave der Bauch-und Brust-Haar und Ort der Ratte auf den Rücken und legen Sie eine Gesichtsmaske über seinen Mund und Nase zu halten die Anästhesie. </li><li> Desinfizieren Sie die Bauch-und Brustbereich weit über Provo-Jod, nächsten Einsatz 80% Ethanol, wiederholen Sie diesen Schritt dreimal. </li><li> Überprüfen Reflexe kneifen die Hinterfüße sicher sein, dass die Ratte ausreichend narkotisiert ist. </li><li> Exsanguinate der Ratte durch die Eröffnung des Bauches und ein Loch in der abdominalen Aorta. </li><li> Öffnen Sie vorsichtig die Brust, um die absteigende Aorta zu finden. </li><li> Präparieren Sie die Aorta vom umgebenden Gewebe wie Fett, Nerven und der Speiseröhre. </li><li> Entnehmen Sie 1.5cm Stück der Aorta mit einem couter, ohne Gewebeschäden der Aorta. </li><li> Versorgen die Aorten-Transplantat gründlich mit kaltem steriler Kochsalzlösung und speichern das Transplantat bei 4 ° C. </li></ol> Empfänger: Anesthetize Ratte mit Isofluran (2,5-3%) mit einer Induktion Kammer. Die Körpertemperatur ist während des chirurgischen Eingriffs beibehalten. <ol><li> Shave Bauchbereich und gelten Augensalbe auf die Augen vor dem Austrocknen während der Narkose zu verhindern. </li><li> Legen Sie die Ratte auf den Rücken und legen Sie eine Gesichtsmaske über seinen Mund und Nase zu halten die Anästhesie. </li><li> Desinfizieren Sie den Bauchbereich mit Provo-Jod, nächsten Einsatz 80% Ethanol, wiederholen Sie diesen Schritt dreimal. </li><li> Überprüfen Reflexe kneifen die Hinterfüße sicher sein, dass die Ratte ausreichend narkotisiert ist. </li><li> Führen Sie eine Mittellinie Bauchschnitt Trennung der Haut und Muskeln in zwei Schritten auf den Bauch zu öffnen. </li><li> Setzen Sie den Darm in einer angewärmten Kochsalzlösung befeuchtet puderfrei Handschuhe. Klappen Sie den Handschuh um den Darm, um den Verlust von Feuchtigkeit zu verhindern. </li><li> Entfernen Sie das Fettgewebe für die Bauchaorta. </li><li> Präparieren Sie die Aorta Form der infrarenalen Region der Bifurkation, vorsichtig, um Schäden an den Zweigen der Gefäße führen. </li><li> Wenn nötig ligieren Zweige der Aorta. </li><li> Zunächst mit einem mikrochirurgischen Klemme an der infrarenalen Teil der Aorta seziert, um den Blutfluss zu stoppen. </li><li> Als nächstes legen Sie eine zweite Klammer in der Nähe der Bifurkation der Aorta. </li><li> Nun, da der Blutfluss gestoppt wird, entfernen Sie ein kurzes Segment der Aorta. </li><li> Nehmen Sie den Spender Aorten-Transplantat, dass in 0,9% steriler Kochsalzlösung wurde auf Eis gehalten, verkürzen sie die angemessene Länge und Position es in die Lücke. </li><li> Verbinden Sie den Spender Aorta an den Empfänger Aorta, Durchführung fortlaufenden Naht mit 8-0 Prolene Naht (Ethicon, Norderstedt, Deutschland). Beginnen Sie mit dem kranialen Ende-zu-End-Anastomose. </li><li> Wenn das distale Ende-zu-End Anastomose beendet ist, öffnen Sie vorsichtig die distale Klemme. </li><li> Wenn es keine Blutungen nach dem Öffnen der distalen Klemme, öffnen Sie vorsichtig die kraniale Klemme. Im Falle von Blutungen an den Nähten, schließen Sie die Klemme wieder, suchen Sie die Blutungen und die Blutung zu stoppen mit einem einzigen Stich. </li><li> Es sollte eine sichtbare Puls am distalen Ende der Aorta werden. </li><li> Nächstes verschieben Sie den Darm wieder in den Bauch. </li><li> Spülen Sie den Bauch mit vorgewärmtem steriler Kochsalzlösung. </li><li> Schließen Sie die Muskelschicht der Bauchwand mit 6-0 Prolene fortlaufenden Nähten (Ethicon, Norderstedt, Deutschland). </li><li> Verwenden Sie 5-0 Prolene (Ethicon, Norderstedt, Deutschland) läuft Nähte auf der Haut zu schließen. </li><li> Während die Ratte immer noch in Narkose, injizieren 4-5mg/kg Carprofen subkutan. </li><li> Um eine ausreichende Analgesie für diese Art von Verfahren wird Metamizol dem Trinkwasser (50 mg Metamizol pro 100ml) für Schmerzmittel für 3 Tage nach der Transplantation aufgenommen. </li></ol>

<ol><li>Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+and+Inhibition+But+Not+Reversion+of+Chronic+Allograft+Vasculopathy+by+FK778%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778.</a> Transplantation. 85, 870-877 (2008).</li>
<li>Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection+in+rat+allografts.+An+experimental+model+for+transplant+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).</li>
<li>Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+reverses+chronic+graft+vascular+disease+in+a+novel+cardiac+allograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model.</a> Circulation. 100, 67-100 (1999).</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK778+in+Experimental+Xenotransplantation%3A+A+Detailed+Analysis+of+Drug+Efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).</li>
</ol>

Aus mehreren Gründen fanden wir den orthotopen Aorten-Transplantation Modell eine genauere Möglichkeit, die Entwicklung der TVP im Vergleich zu den heterotopen Herztransplantation Modell zu untersuchen: In Bezug auf die chirurgische Technik, verkörpert die Aorten-Transplantation Modell eine leicht praktikable Methode, erfordert allein die Erfüllung der End-to-End-Anastomose, während die heterotope Herztransplantation Modell kann als ein komplexer und fehleranfälliger Herausforderung für den Chirurgen s Fähigkeite...

<table><tbody><tr><td>Chirurgisches Mikroskop (Vergrößerung 25x)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Haarschneider</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Provo-Jod</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9 % Salzlösung, eiskalt</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9 % sterile Salzlösung, vorgewärmt</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Augensalbe</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Handschuh</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische Mikroschere</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Klemmen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>8-0 Nahtmaterial (Prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-0 Nahtmaterial (Prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Nahtmaterial (Prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metamizol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Q-Tips</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopen aorten-transplantation: ein rattenmodell die entwicklung von chronischen vaskulopathie study

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Forschung Modelle der chronischen Abstoßung sind unerlässlich, um pathobiologischen und pathophysiologische Prozesse bei der Entwicklung der Transplantatvaskulopathie (TVP) zu untersuchen. Die am häufigsten verwendete Tiermodell für Herz-Kreislauf chronische Abstoßung Studien ist die heterotope Herztransplantation Modell in Labornagern durchgeführt. Dieses Modell wird häufig in Experimenten verwendet werden, da Ono und Lindsey (3) veröffentlicht ihre Technik. Zur Analyse der Ergebnisse in die Blutgefäße, das Herz zu geschnitten und alle Schiffe müssen gemessen werden. Eine andere Methode, um chronische Abstoßung in der kardiovaskulären Fragestellungen zu untersuchen ist die Aorta Transplantation Modell (1, 2). In der orthotopen Transplantation Aorten-Modell können die Aorta leicht histologisch untersucht werden (2). Die PVG-to-ACI-Modell ist besonders nützlich für CAV-Studien, da akute vaskuläre Abstoßung ist keine wichtigen verwirrenden Faktor und Cyclosporin A (CsA)-Behandlung verhindert nicht, dass die Entwicklung der CAV, ähnlich dem, was wir in der klinischen Umgebung zu finden (4 ). A7-Tage-Frist von CsA ist in diesem Modell erforderlich, um akute Abstoßung zu verhindern und um das langfristige Überleben mit der Entwicklung des TVP zu erreichen. Dieses Modell kann auch zur akuten zellulären Abstoßung und Medien Nekrose in xenogenen Modellen (5) zu untersuchen.

Dieses Video zeigt die orthotopen Aorten-Transplantat-Modell als ein einfaches Modell für die Entwicklung der Transplantatvaskulopathie (TVP) in Ratten zu untersuchen.

Orthotopen Aorten-Transplantation: Ein Rattenmodell die Entwicklung von chronischen Vaskulopathie Study

Forschungsmodelle zur chronischen Abstoßung sind essenziell, um die pathobiologischen und pathophysiologischen Prozesse während der Entwicklung einer Transplantat...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, ein genaues Modell und eine leicht durchführbare Methode zur Untersuchung der Entwicklung einer Transplantatvaskulopathie zu etablieren. Dies wird durch die Verwendung der PVG-zu-CI-Stamm-Kombination erreicht. Der zweite Schritt des Verfahrens ist die Entnahme der Spenderaorta.Der dritte Schritt des Verfahrens besteht darin, den Empfänger vorzubereiten. Der letzte Schritt des Verfahrens ist die Anastomosierung der Spenderaorta mit der Aorta des Empfängers. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden, die mittels pathohistologischer Untersuchung die Neointimabildung zeigen.Hallo, ich bin Sonya Schwefel, Professorin für Transplantationsimmunologie im TS Eye Lab am UniversitätsHerzzentrum in Hamburg, Deutschland. Und ich bin Manish Duboff, ebenfalls vom TS Eye Lab.Unser Labor beschäftigt sich mit der Transplantationsimmunologie. In diesem Video stellen wir Ihnen das orthotopische Aortentransplantationsmodell vor, ein einfaches und aussagekräftiges Modell zur Untersuchung der Entwicklung einer Transplantatvaskulopathie in Wes. Wir verwenden dieses Verfahren in unserem Labor, um die chronische Abstoßung bei kardiovaskulären Frage

orthotopic-aortic-transplantation-rat-model-to-study-development

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir beschreiben ein Verfahren, bei dem ein Abschnitt der Bauchaorta von einer Maus transplantiert orthotopisch wird knapp unterhalb der Nierenarterien in einer allogenen oder syngenen Empfänger. Diese Technik kann in Untersuchungen, bei denen die Transplantation von grossen Arterien von einheitlicher Größe als vorteilhaft erachtet wird nützlich.

Orthotopen Aortic Transplantation in Mäuse für das Studium der Vascular Disease

Wir beschreiben ein Protokoll für die Aorteninterpositionstransplantation bei Mäusen. Ziel des Protokolls ist es, ein Modell zur Verfügung zu stellen, mit dem pathologische Prozesse und therapeutische Strategien, die für alloimmune Reaktionen in den Arterien relevant sind, und die daraus resultierenden arteriellen Veränderungen, die zum Versagen von Organtransplantaten beitragen, untersucht werden können.

Maus-Modell der Alloimmune-induzierte Gefäßabstoßung und Transplantat-Arteriosklerose

Polyurethan-Katheter Einfügung in die Aorta Lumen und Naht Ligatur der Aorta verursachen chronische Hypoxie durch Minderdurchblutung der adventitial Vasa Vasorum. Dieser Artikel beschreibt eine neuartige Tiermodell der abdominalen Aortenaneurysma (AAA) mit Eigenschaften ähnlich denen von AAA beim Menschen.

Erstellung eines Nagetier Modells der abdominalen Aortenaneurysma Vaskulogenese Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Hier stellen wir ein Protokoll der heterotopischen Aortentransplantation bei Mäusen mit der Nicht-Naht-Manschettentechnik in einem zervikalen Murin-Modell vor. Dieses Modell kann verwendet werden, um die zugrunde liegende Pathologie der chronischen Allograft-Vaskulopathie (CAV) zu untersuchen und kann helfen, neue therapeutische Wirkstoffe zu bewerten, um ihre Bildung zu verhindern.

Murine Cervical Aortic Transplantation Modell mit einer modifizierten Non-Suture Manschettentechnik

Wir beschreiben ein Modell der heterotopischen Bauchherztransplantation bei Ratten, was Veränderungen der aktuellen Strategien impliziert, die zu einem vereinfachten chirurgischen Ansatz führen. Zusätzlich beschreiben wir ein neuartiges Abstoßungsmodell durch In-Ear-Injektion lebenswichtiger Herzmuskelzellen, das weitere transplantierte immunologische Analysen bei Ratten ermöglicht.

Ein immunologisches Modell für heterotopische Herz- und Herzmuskelzelltransplantation bei Ratten

Dieser Artikel stellt ein partielles heterotopes osteomyokutanes Lappentransplantationsprotokoll bei Ratten und seine möglichen Ergebnisse in der mittelfristigen Nachbeobachtung vor.

Partielles heterotopes Hinterbeinein Transplantationsmodell bei Ratten

Dieses Protokoll beschreibt eine einfache und effiziente Methode zur Transplantation von Aortenklappenblättchen unter die Nierenkapsel, um die Alloreaktivität von Herzklappen untersuchen zu können.

Ein vereinfachtes Modell für die heterotope Herzklappentransplantation bei Nagetieren

Wir zeigen, wie man ein murines Modell der Lungenwurzelimplantation in die absteigende Aorta etabliert, um das Ross-Verfahren zu simulieren. Dieses Modell ermöglicht die mittel- / langfristige Bewertung des pulmonalen Autotransplantat-Remodelings in einer systemischen Position und stellt die Grundlage für die Entwicklung therapeutischer Strategien zur Förderung seiner Anpassung dar.

Ein Nagetiermodell der Ross-Operation: Syngene Lungenarterientransplantatimplantation in einer systemischen Position

Das orthotope Nierentransplantationsmodell der Ratte trägt dazu bei, den Mechanismus der renalen Allotransplantatabstoßung zu untersuchen. Das aktuelle Modell erhöht das Überleben der Empfänger ohne Beeinträchtigung der Blutversorgung und venösen Reflux des Unterkörpers unter Verwendung einer End-to-End-Anastomose der Nierenimplantation und einer End-to-Side-"Tunnel" -Methode der Harnleiter-Blasen-Anastomose.

Ein orthotopes Nierentransplantationsmodell für die renale Allotransplantatabstoßung

Diese Studie demonstriert eine reproduzierbare heterotope abdominale Herztransplantationstechnik bei Ratten, die Anfänger erlernen und durchführen können. Darüber hinaus wird ein neuartiges Aorteninsuffizienzmodell bei Ratten generiert, indem eine heterotope abdominale Herztransplantation durchgeführt und die Aortenklappe des Spenders nach der Entnahme mit einem Führungsdraht geschädigt wird.

Modifizierte heterotope abdominale Herztransplantation und ein neuartiges Aorteninsuffizienzmodell bei Ratten

In dieser Arbeit wird ein Tiermodell der endothelial-mesenchymalen Transitions-induzierten Fibrose vorgestellt, wie sie bei angeborenen Herzfehlern wie der kritischen Aortenstenose oder dem hypoplastischen Linksherzsyndrom auftritt, das eine detaillierte histologische Gewebebewertung, die Identifizierung regulatorischer Signalwege und die Erprobung von Behandlungsoptionen ermöglicht.

Ein neonatales heterotopes Rattenherztransplantationsmodell zur Untersuchung des Übergangs von Endothel zu Mesenchym

Lernen Sie die orthotope Aortentransplantation bei Ratten zur Untersuchung der chronischen Transplantatvaskulopathie. Dieses Modell ermöglicht die Analyse von Neointimabildung durch histologische Methoden.

Orthotopen Aorten-Transplantation: Ein Rattenmodell die Entwicklung von chronischen Vaskulopathie Study

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