Orthotope Injektion in das Brustfettpolster: Etablierung von Brustkrebs bei Mäusen

Etablieren Sie zunächst die gewünschte Brustkrebszelllinie in Kultur. Rasieren Sie am Tag vor der Operation den Bauch der Maus und verwenden Sie Enthaarungscreme, um das Fell zu entfernen und die Leistenbrustwarzen freizulegen. Sammeln Sie am Tag der Operation die Zellen, betäuben Sie die Maus und bestätigen Sie eine fehlende Reaktion auf das Einklemmen der Zehen. Kneifen Sie mit einer Pinzette die Haut um die Brustwarze zusammen, um einen angehobenen Tunnel zu erzeugen.

Dann stechen Sie mit der Spritze der gesammelten Zellen in die Haut. Die Nadel sollte dem Tunnel folgen, bis die Spitze in die Nähe des Nippels kommt. Bewegen Sie die Nadelspitze vorsichtig nach oben in das Brustfettpolster, direkt unter der Brustwarze. Entfernen Sie die Pinzette, um mit der Nadel ein Hautzelt zu bilden, und injizieren Sie dann langsam die Zellen.

Ziehen Sie zum Schluss die Spritze zurück und achten Sie darauf, die runde Beule, die den Sauger umgibt, nicht zu stören. Injizierte Zellen und nachfolgende Tumoren exprimieren Luziferase und können mit Hilfe von Biolumineszenz-Bildgebung verfolgt werden. Im Beispielprotokoll zeigen wir die Etablierung des murinen orthotopen Brustkrebses. Am Tag vor der Ope