Injektion von adulten Drosophila-Fliegen: Eine Methode der Verabreichung von Verbindungen oder Etiketten

- Bereiten Sie konische Injektionsnadeln vor, indem Sie dünnwandige Glaskapillaren mit einem Nadelabzieher ziehen. Halten Sie eine Nadel unter ein Mikroskop und brechen Sie die Spitze, wobei Sie darauf achten, dass die Öffnung gerade groß genug ist, um die Nagelhaut der erwachsenen Fliege zu durchstechen, ohne sie mehr als nötig zu verletzen. Messen Sie das Injektionsvolumen, indem Sie Ihre Nadel mit einer sterilen Farb- und Salzpufferlösung beladen und dann auf einen Tropfen Mineralöl auf einem Tischmikrometer ausstoßen. Verwenden Sie die Skala am Mikrometer, um den Durchmesser des ausgestoßenen Tröpfchens zu messen, anhand dessen das abgegebene Volumen berechnet werden kann, und kalibrieren Sie Ihre Injektoreinstellungen entsprechend.

Befüllen Sie die Nadel mit Ihrer Injektionslösung und montieren Sie sie auf eine Injektionsdüse. Betäuben Sie Ihre Fliegen mit CO2 und ordnen Sie sie auf einem CO2-Fliegenpad an, das sie betäubt. Sobald sich die Fliegen in der richtigen Ausrichtung für Ihr Experiment befinden, fahren Sie mit den Injektionen fort. Im Beispielprotokoll werden wir adulten Fliegen fluoresceinmarkierte Partikel für die in vivo-Bildgebung injizieren.

- Nachdem Sie dünnwan