Mechanische Entfernung der Chorion- und Vitellinmembran: Eine Methode zur Vorbereitung von Drosophila-Eizellen für die direkte Beobachtung

- Beginnen Sie mit reifen Eizellen aus fixierten Eierstöcken in einer Kochsalzlösung. Reife Eizellen tragen Eierschalen, die aus einer äußeren Chorion und einer inneren Vitellinmembran bestehen.

Um die Chorion- und Vitellinmembran mechanisch zu entfernen, legen Sie die Eizellen zwischen die mattierten Teile von zwei vorbehandelten Objektträgern. Bewegen Sie den oberen Schieber in geraden Hin- und Herbewegungen, um eine Reibung zu erzeugen, die die Eizellen rollt.

Bewegen Sie nun den oberen Objektträger in einem leichten Winkel, um die Eizellen in eine andere Richtung zu rollen. Um kreisende Bewegungen zu vermeiden, erhöhen Sie diesen Winkel in kurzen Schritten, bis sich die obere Folie senkrecht zur unteren Folie bewegt. Durch diese Bewegung werden die Chorionen und Vitellinmembranen mechanisch entfernt, wodurch Sonden oder Färbungen in die Eizelle gelangen können.

Eizellen ohne Chorionen erscheinen lang und dünn, und Eizellen ohne Vitellinmembranen haben spitze Enden. Um die gereinigten Eizellen von den umgebenden Ablagerungen zu trennen, geben Sie die Probenmischung in ein Röhrchen und lassen Sie die Eizellen am Boden absetzen, während die Eizellen oben schwimmen und entfernt wer