Dissektion des Auge-Hirn-Komplexes aus Fliegenpuppen: Eine Methode zur Isolierung von Netzhautgewebe

- Befestigen Sie zunächst eine Fruchtfliegenpuppe mit der Rückenseite nach oben. Entfernen Sie das Operculum oder das vordere Ende der Puppe, um den Kopf des Tieres freizulegen. Fahren Sie fort, die Puppe zu öffnen, indem Sie die Hülle abschneiden und abziehen. Sobald sie befreit ist, bedecken Sie die sezierte Puppe mit PBS, um ein Austrocknen zu vermeiden. Machen Sie einen sauberen Querschnitt durch den Thorax und entfernen Sie den hinteren Teil des Schlachtkörpers.

Um den Auge-Hirn-Komplex freizulegen, zu dem die beiden Netzhäute gehören, die mit den Sehlappen verbunden sind, beginnen Sie, das Epithel von der aufgeschnittenen Kante des Thorax zu reißen und die Kopfkapsel allmählich zu öffnen. Führen Sie dann den Auge-Hirn-Komplex vorsichtig von den Überresten der Kopfkapsel weg.

Im Beispielprotokoll sehen wir eine Demonstration einer puppenhaften Auge-Hirn-Dissektion, die zur Isolierung von Gewebe für verschiedene nachgelagerte Analysen verwendet wird.

- Nachdem Sie die Drosophila-Puppen auf eine schwarze Präparierschale gelegt haben, legen Sie ein frisches Stück doppelseitiges Klebeband auf die Präparierschale, weg von den Puppen, und verwenden Sie eine Pinzette, um die Puppen m