Escape Response Assay: Eine Methode zur Untersuchung der Reaktion von Zebrafischlarven auf Berührungsreize

0 Aufrufe • 2:54 Min. • April 30th, 2023

- Übertragen Sie zunächst vorsichtig einige Embryonen in eine Petrischale, die das Embryomedium enthält. Halten Sie nun das Chorion mit einer Pinzette fest und machen Sie mit einer anderen Pinzette einen Riss hinein.

Schieben Sie dann den Embryo vorsichtig durch den Riss. Die Entnahme des Chorions aus dem Embryo beschleunigt sein Wachstum und seine Bewegung. Um die Rückstände zu entfernen, übertragen Sie die Embryonen mit einer Pasteur-Pipette in eine andere Petrischale, die das Embryomedium enthält.

Stellen Sie die Petrischale in einen Inkubator und lassen Sie die Embryonen bei 28 Grad Celsius wachsen. Stellen Sie einen beleuchteten, mit Wasser gefüllten Mikroskoptisch vor dem Experiment auf 28 Grad Celsius ein, um temperaturbedingte Abweichungen im Larvenverhalten zu vermeiden.

Stellen Sie die Petrischale auf die Bühne und montieren Sie sie in der Kamera über der Schale. Zentrieren Sie als Nächstes den Embryo im Sichtfeld der Kamera. Berühren Sie nun den Embryo vorsichtig mit einer stumpfen Nadel und zeichnen Sie die Reaktion der Larve mit der Aufnahmesoftware der Videokamera auf.

Bei einem Reiz zeigt der Embryo eine starke Fluchtreaktion - ein geplatztes Schwimmen zusammen mit s

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