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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Ensaio de agressão

 
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Ensaio de agressão: um método para estudar o comportamento agressivo do zebrafish em resposta a um espelho

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- Comece com dois tanques retangulares, um tanque de aclimatação e um tanque de agressão. Agora cubra os três lados externos do tanque de agressão com um papel branco para reduzir os estímulos externos. Marque o tanque externamente para dividi-lo em quatro quadrantes retangulares iguais para rastreamento de posição. Fixe um espelho no quadrante inferior esquerdo em ângulo a 22,5 graus da vertical.

Despeje água em ambos os tanques. A água deve ser pré-aquecida a 27,5 graus. Coloque o peixe focal no tanque de aclimatação. Este peixe é o objeto de teste para o ensaio comportamental. Após 10 minutos, transfira o peixe focal do tanque de aclimatação para o tanque de agressão através de cupping.

Regisce o número de mordidas, os pulmões rápidos em direção ao espelho com a boca aberta, o número de displays laterais, queima de barbatanas dorsais, peitorais, anais e caudais na direção do espelho, e a quantidade de tempo gasto no quadrante perto do espelho.

- Comece obtendo um tanque retangular de 19 litros medindo 30 por 15 por 10 centímetros. Equipar o tanque com partições opacas externas em torno de três lados do tanque de agressão, deixando a frente exposta para visualização, para reduzir estímulos externos indesejáveis. Divida o tanque com marcas externas em quatro quadrantes retangulares iguais. Use caldeirão de silicone para fixar um espelho dentro do quadrante inferior esquerdo, inclinado a 22,5 graus, formando um triângulo direito contra o lado esquerdo do tanque.

Tenha água envelhecida pré-aquecida a 27,5 a 28,5 graus Celsius pronta para adicionar ao tanque de agressão, a fim de garantir que a temperatura da água no tanque de aclimatação e tanque de agressão estejam dentro de 2 graus Celsius do rack de habitação.

Confirme que a câmera de vídeo está focada no tanque de ensaio de agressão e registro de prensa. Em seguida, transfira imediatamente o peixe focal através do reservatório de aclimatação para o tanque de agressão. Registre o tanque de agressão por 10 minutos e 30 segundos. Em seguida, coloque o peixe focal do tanque de agressão de volta para o tanque de aclimatação.

Ao assistir a gravação após o ensaio estar completo, espere 30 segundos após o peixe ter sido introduzido no tanque como um período adicional de aclimatação antes de marcar comportamentos. Por fim, marque um único ensaio de agressão pelo menos duas vezes até que o ensaio seja pontuado com alta concordância entre as iterações.

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