Neuartiger Tank Diving Assay: Eine Methode zur Untersuchung der angeborenen Stressreaktionen bei Zebrafischen

0 Aufrufe2:32 Min. • April 30th, 2023

- Platzieren Sie zunächst ein Infrarotlicht hinter dem neuartigen Tank und eine weiße Acrylplatte zwischen dem Tank und dem Licht, um das Licht zu streuen und Blendung zu vermeiden. Füllen Sie nun den Tank zu 3/4 mit Wasser aus dem Fischsystem, das durch Umkehrosmose von Leitungswasser erzeugt wird. Setzen Sie einen akklimatisierten Fisch aus einem Auffangbecken in ein Becherglas mit Wasser aus dem Fischsystem um und lassen Sie ihn weitere 10 Minuten ruhen. Gießen Sie dann das Wasser und den Fisch vorsichtig in das neuartige Becken.

Verwenden Sie ein Standbild-Videobild, um den oberen, mittleren und unteren Bereich des Panzers zu ermitteln, indem Sie die Höhe des Panzers berechnen und durch 3 dividieren, und bestimmen Sie die in jedem Bereich verbrachte Zeit und die zurückgelegte Gesamtstrecke mithilfe der Tracking-Software. Wenn ein erwachsener Fisch in ein unbekanntes Aquarium gesetzt wird, bevorzugt er aufgrund von Stress in der Regel die untere Hälfte. Wenn der Stresspegel abnimmt, schwimmt er nach und nach öfter an die Spitze. Testen Sie mindestens 10 Fische pro Versuch. In einem Beispielprotokoll sehen wir den Versuchsaufbau für einen neuartigen Tanktauchtest.

- Füllen Sie zunächst einen 250-Milliliter-Becher und mindestens zwei Fäkalientanks mit Wasser aus dem Fischsystem. Am Morgen des Tests werden mindestens 10 erwachsene Zebrafische für jede Versuchsbedingung in einzelne Auffangbecken umgesiedelt, bevor alle Fische für mindestens eine Stunde zur Akklimatisierung in den Verhaltensraum gebracht werden. Beschriften Sie die Tanks so, dass der Zustand oder der Genotyp der Tiere für den Versuchsleiter blind ist, und setzen Sie mit einem Netz einen einzelnen Erwachsenen vorsichtig in das vorgefüllte Becherglas ein.

Lassen Sie den erwachsenen Fisch 10 Minuten lang im Becherglas akklimatisieren, bevor Sie das Wasser und den Fisch aus dem Becher vorsichtig in das experimentelle neuartige Becken gießen. Sobald sich der Fisch im Aquarium befindet, beginnen Sie mit der Kameraaufzeichnung und entfernen Sie sich vom Setup, um zusätzlichen Stress für den Fisch zu vermeiden. Wenn die Aufnahme beendet ist, nehmen Sie das Individuum aus dem neuen Becken und setzen Sie den Fisch in ein neues Auffangbecken.